| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 一 前言 | 第11-19页 |
| 1 研究背景 | 第11-18页 |
| ·生长抑素(SST)及其类似物(SSTA) | 第11-12页 |
| ·生长抑素受体 | 第12-13页 |
| ·SST及SSTA的抗肿瘤作用机制 | 第13-15页 |
| ·SS及SSA在胰腺癌中的应用 | 第15-16页 |
| ·胰腺癌基因治疗新进展 | 第16-18页 |
| 2 技术路线 | 第18-19页 |
| 二 实验仪器与材料 | 第19-26页 |
| 1 仪器 | 第19-20页 |
| 2 质粒、菌株、细胞株 | 第20页 |
| 3 主要试剂 | 第20-22页 |
| 4 主要溶液配方 | 第22-26页 |
| 三 实验方法 | 第26-40页 |
| 1 方法 | 第26-40页 |
| ·293细胞培养 | 第26页 |
| ·、重组腺病毒Ad-SSTR2和Ad-LacZ的扩增和保存 | 第26-27页 |
| ·重组腺病毒的纯化 | 第27页 |
| ·、重组腺病毒的滴度测定 | 第27-28页 |
| ·重组腺病毒感染能力测定 | 第28-29页 |
| ·检测胰腺癌细胞Capan-2和肺癌细胞A549的生长抑素受体类型 | 第29-33页 |
| ·重组腺病毒Ad-SSTR2在胰腺癌细胞Capan-2和肺癌细胞A549的表达测定 | 第33-35页 |
| ·重组腺病毒对Capan-2和A549细胞增殖的影 | 第35-36页 |
| ·裸鼠胰腺癌模型的制备 | 第36页 |
| ·Ad-SSTR2和Ad-LacZ转染裸鼠胰腺癌移植瘤后抑瘤效果观察 | 第36页 |
| ·转染Ad-SSTR2和Ad-LacZ的细胞注射裸鼠观察成瘤效果 | 第36页 |
| ·Ad-SSTR2转染裸鼠胰腺癌移植瘤后SSTR2蛋白的检测 | 第36-37页 |
| ·细胞的培养 | 第37页 |
| ·Western blotting检测p16、p21、Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53、survivin、ERK2、ras、VEGF、TIMP-2和PARP的蛋白表达水平 | 第37-38页 |
| ·SDS-PAGE和转膜 | 第38页 |
| ·、抗原抗体反应和发光显影 | 第38-39页 |
| ·、统计学分析 | 第39-40页 |
| 四 结果与分析 | 第40-71页 |
| 1 重组腺病毒的扩增、纯化和滴度测定 | 第40页 |
| 2 重组腺病毒感染能力测定 | 第40-42页 |
| 3 胰腺癌细胞Capan-2和肺癌细胞A549的生长抑素受体类型 | 第42页 |
| 4 Ad-SSTR2可在Capan-2和A549中成功表达 | 第42-43页 |
| 5 SSTR2的过表达对实验癌细胞株Capan-2和A549的生长有明显的抑制作用 | 第43-45页 |
| 6 SSTR2过表达对细胞生长的抑制是由受体激活所介导的特异性效应 | 第45-49页 |
| 7 Ad-SSTR转染裸鼠胰腺癌移植瘤后能明显抑制肿瘤的生长 | 第49-51页 |
| 8 转染Ad-SSTR2和Ad-LacZ的细胞注射裸鼠观察成瘤效果 | 第51-52页 |
| 9 SSTR2在裸鼠肿瘤组织中的表达 | 第52页 |
| 10 Ad-SSTR2对Capan-2和A549细胞生长的抑制作用的可能机制 | 第52-71页 |
| ·Ad-SSTR2对p16和p21蛋白表达的影响 | 第52-56页 |
| ·Ad-SSTR2对ERK2和ras蛋白表达的影响 | 第56-59页 |
| ·Ad-SSTR2对VEGF和TIMP-2蛋白表达的影响 | 第59-62页 |
| ·Ad-SSTR2对细胞Caspase-3和PARP蛋白表达的影响 | 第62-65页 |
| ·Ad-SSTR2对p53利Bax蛋白表达的影响 | 第65-68页 |
| ·Ad-SSTR2对survivin和Bcl-2蛋白表认的影响 | 第68-71页 |
| 五 讨论 | 第71-87页 |
| 1 重组病毒的感染力 | 第71页 |
| 2 SSTR2在Capan-2和A549细胞中的表达 | 第71-72页 |
| 3 生长抑素 | 第72页 |
| 4 重组腺病毒对Capan-2和A549细胞增殖的影响 | 第72-73页 |
| 5 SSTR2抑制胰腺肿瘤的生长 | 第73-87页 |
| ·SSTR2通过阻滞细胞周期抑制胰腺癌生长 | 第74-77页 |
| ·SSTR2通过诱导细胞凋亡抑制胰腺癌生长 | 第77-81页 |
| ·SSTR2通过影响Ras-Raf-MEK-ERK信号转导通路抑制胰腺癌生长 | 第81-83页 |
| ·SSTR2通过影响肿瘤血管生成抑制胰腺癌生长 | 第83-87页 |
| 六 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-97页 |
| 附录 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
