| 致谢 | 第1-9页 |
| 主要英文缩写 | 第9-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| 英文摘要 | 第13-18页 |
| 第一章 卵巢上皮癌分子生物学研究概况(综述) | 第18-68页 |
| 1 细胞遗传学 | 第18-19页 |
| ·染色体数目的异常 | 第18页 |
| ·染色体结构的改变 | 第18-19页 |
| 2 分子遗传学 | 第19-47页 |
| ·癌基因 | 第19-32页 |
| ·Her(C-erbB-2)基因 | 第19-23页 |
| ·Her2基因的结构和功能 | 第19-20页 |
| ·Her-2诱发肿瘤的机制 | 第20页 |
| ·Her-2受体的信号传导 | 第20-21页 |
| ·Her-2与肿瘤发生的机制关系 | 第21页 |
| ·Her-2与卵巢癌 | 第21-22页 |
| ·针对Her2的治疗 | 第22-23页 |
| ·K-RAS基因 | 第23-24页 |
| ·K-RAS的结构与功能 | 第23页 |
| ·K-RAS的改变与卵巢癌癌肿起源的关系 | 第23-24页 |
| ·K-RAS基因在肿瘤治疗中的应用 | 第24页 |
| ·c-myc基因 | 第24-26页 |
| ·c-myc的结构和功能 | 第24-25页 |
| ·c-myc与卵巢肿瘤 | 第25-26页 |
| ·Akt | 第26-28页 |
| ·Akt癌基因的结构和激活 | 第26页 |
| ·抑制细胞凋亡 | 第26-27页 |
| ·Akt促进细胞侵袭和转移 | 第27-28页 |
| ·促进血管生成 | 第28页 |
| ·抵抗化疗和放疗中的细胞凋亡 | 第28页 |
| ·PI3K/Akt | 第28-32页 |
| ·PI3K的结构 | 第29页 |
| ·PI3K/Akt信号转导通路 | 第29-30页 |
| ·PI3K/Akt信号转导通路对细胞周期的调节 | 第30页 |
| ·PI3K/Akt信号转导通路对肿瘤转移的影响 | 第30-31页 |
| ·PI3K/Akt信号转导通路对恶性肿瘤放化疗的影响 | 第31页 |
| ·PI3K/Akt信号转导通路肿瘤治疗的靶点 | 第31-32页 |
| ·抑癌基因 | 第32-47页 |
| ·BRCA1 | 第33-35页 |
| ·BRCA1的结构及功能 | 第33-34页 |
| ·BRCA1与卵巢癌相关的临床研究 | 第34-35页 |
| ·抑制基因p53 | 第35-37页 |
| ·p53的结构 | 第35页 |
| ·p53与细胞周期调控 | 第35-36页 |
| ·p53与细胞凋亡 | 第36页 |
| ·p53基因与卵巢癌 | 第36-37页 |
| ·p73 | 第37-41页 |
| ·p73的定位和结构特点 | 第37-38页 |
| ·p73与p53的差异 | 第38页 |
| ·p73与p53的联系 | 第38-39页 |
| ·p73与卵巢癌 | 第39-41页 |
| ·p63基因 | 第41-44页 |
| ·p63基因的结构 | 第41页 |
| ·p63基因的功能 | 第41-42页 |
| ·p63基因的表达和调控 | 第42页 |
| ·p63基因与p53、p73基因的相互关系 | 第42-43页 |
| ·p63与各种肿瘤的相关性 | 第43-44页 |
| ·p16基因 | 第44-46页 |
| ·p16基因及其产物的结构和功能 | 第44页 |
| ·p16的抑癌机制 | 第44-45页 |
| ·CpG岛及CpG岛甲基化 | 第45页 |
| ·p16基因通过CpG岛异常甲基化失活 | 第45-46页 |
| ·FHIT基因 | 第46-47页 |
| ·FHIT基因的定位、结构和功能 | 第46页 |
| ·FHIT与卵巢癌 | 第46-47页 |
| 3 细胞粘附分子在卵巢恶性肿瘤转移中的作用 | 第47-56页 |
| ·整合素与肿瘤转移 | 第48-52页 |
| ·整合素的结构和功能 | 第48页 |
| ·整合素与信号传导 | 第48-49页 |
| ·整合素与肿瘤血管生成 | 第49-50页 |
| ·整合素与肿瘤转移 | 第50-51页 |
| ·整合素与卵巢癌 | 第51-52页 |
| ·整合素与卵巢癌化疗耐药 | 第52页 |
| ·整合素与卵巢癌预后 | 第52页 |
| ·钙粘素(cadherin,CD) | 第52-54页 |
| ·钙粘素的结构和功能 | 第52-53页 |
| ·E-cad与卵巢肿瘤 | 第53-54页 |
| ·CD44分子 | 第54-56页 |
| ·CD44的结构及生物学特性 | 第54-55页 |
| ·CD44与肿瘤的相关性 | 第55页 |
| ·CD44与卵巢癌 | 第55-56页 |
| 4 RNAi及其在肿瘤分子机理研究中的应用 | 第56-62页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第57页 |
| ·RNAi的发生机制 | 第57-58页 |
| ·dsRNA的形成 | 第57-58页 |
| ·RNAi的特点 | 第58页 |
| ·siRNA的合成 | 第58-59页 |
| ·化学合成法 | 第58页 |
| ·体外转录合成法 | 第58-59页 |
| ·siRNA表达载体在细胞中表达siRNA | 第59页 |
| ·siRNA表达框架在细胞中表达siRNA | 第59页 |
| ·RNAi技术在卵巢癌的研究现况 | 第59-62页 |
| 5 WWOX基因与卵巢癌的关系 | 第62-67页 |
| ·WWOX基因的结构与功能 | 第62-64页 |
| ·WWOX mRNA转录异常与肿瘤 | 第64页 |
| ·WWOX基因杂合性丢失与肿瘤 | 第64-65页 |
| ·WWOX与p53 | 第65-66页 |
| ·WWOX与p73 | 第66-67页 |
| 6 WWOX与卵巢癌研究中存在问题及本研究的目的 | 第67-68页 |
| 第二章 WWOX基因在肿瘤细胞株中杂合性缺失的研究 | 第68-83页 |
| 1 材料与方法 | 第68-74页 |
| ·材料 | 第68-69页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·主要的工具酶及溶液 | 第68-69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-74页 |
| ·细胞的培养 | 第69-70页 |
| ·RNA的提取(按试剂盒中的步骤) | 第70页 |
| ·RNA的浓度测定 | 第70-71页 |
| ·cDNA的合成 | 第71页 |
| ·Beta-actin testing cDNA | 第71-72页 |
| ·RT-PCR | 第72-73页 |
| ·从琼脂糖凝胶中分离和提取DNA(按QIAquick Gel Extraction的步骤) | 第73-74页 |
| ·DNA纯化 | 第74页 |
| ·DNA的测序 | 第74页 |
| ·实验结果判断 | 第74页 |
| 2 实验结果与分析 | 第74-80页 |
| ·细胞总RNA抽取 | 第74页 |
| ·Lamin A/C险测cDNA | 第74-75页 |
| ·RT-PCR | 第75-76页 |
| ·DNA提取、纯化及测序 | 第76-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 4 结论 | 第82-83页 |
| 第三章 WWOX基因在Fn介导的卵巢癌粘附浸润中的作用 | 第83-110页 |
| 1 材料与方法 | 第83-94页 |
| ·材料 | 第83-85页 |
| ·主要试剂与质粒 | 第83-84页 |
| ·常用溶液 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84-85页 |
| ·方法 | 第85-88页 |
| ·检测稳定转染细胞株的WWOX表达 | 第85页 |
| ·细胞的培养 | 第85页 |
| ·RNA的提取 | 第85-86页 |
| ·cDNA的合成 | 第86页 |
| ·β-actin检测cDNA | 第86-87页 |
| ·RT-PCR | 第87-88页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第88页 |
| ·Western Blot | 第88-90页 |
| ·Western Blot的原理 | 第88-89页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE电泳 | 第89-90页 |
| ·蛋白质的电转移 | 第90页 |
| ·瞬时转染 | 第90-92页 |
| ·质粒DNA的提取及纯化 | 第90-91页 |
| ·质粒DNA的无菌处理 | 第91页 |
| ·细胞的质粒瞬时转染 | 第91-92页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第92页 |
| ·Western Blot | 第92页 |
| ·Matrix粘附实验 | 第92-94页 |
| ·Fibronect(Fn)处理96孔板 | 第92-93页 |
| ·稳定转染细胞的粘附实验 | 第93-94页 |
| ·结果判断方法 | 第94页 |
| ·结果判定 | 第94页 |
| ·统计学处理 | 第94页 |
| 2 实验结果与分析 | 第94-107页 |
| ·稳定转染细胞的结果与分析 | 第94-99页 |
| ·转染细胞总RNA抽取 | 第94页 |
| ·β-actin检测cDNA | 第94-95页 |
| ·阳性转染和阴性转染对照细胞的WWOX mRNA表达测定 | 第95页 |
| ·稳定转染细胞的WWOX蛋白表达情况 | 第95-97页 |
| ·Western Blot检测整合素的表达 | 第97-99页 |
| ·Matrix粘附试验 | 第99-104页 |
| ·瞬时转染细胞的WWOX表达情况 | 第104页 |
| ·瞬时转染细胞的整合素的表达情况 | 第104-106页 |
| ·瞬时转染细胞的粘附实验 | 第106-107页 |
| 3 讨论 | 第107-109页 |
| 4 结论 | 第109-110页 |
| 第四章 WWOX基因在Fn介导的卵巢癌浸润转移的作用 | 第110-129页 |
| 1 材料与方法 | 第110-116页 |
| ·材料 | 第110-111页 |
| ·主要试剂与抗体 | 第110-111页 |
| ·主要的仪器 | 第111页 |
| ·方法 | 第111-112页 |
| ·α整合素介导的细胞粘附实验 | 第111-112页 |
| ·结果判断方法 | 第112页 |
| ·β整合素介导的细胞粘附实验 | 第112页 |
| ·封闭整合素的粘附实验 | 第112-114页 |
| ·封闭α整合素的粘附试验 | 第112-114页 |
| ·结果判断方法 | 第114页 |
| ·封闭β整合素的粘附试验 | 第114页 |
| ·FACS实验 | 第114-115页 |
| ·结果判断方法 | 第115页 |
| ·Mesothelial试验 | 第115-116页 |
| ·结果判断方法 | 第116页 |
| 16 统计学处理 | 第116页 |
| 2 实验结果与分析 | 第116-125页 |
| ·α整合素介导的细胞粘附试验 | 第116-117页 |
| ·β整合素介导的细胞粘附试验 | 第117-119页 |
| ·封闭整合素的粘附试验结果 | 第119-122页 |
| ·封闭α整合素的粘附试验 | 第119-120页 |
| ·封闭β整合素的粘附试验 | 第120-122页 |
| ·FACS实验结果 | 第122-124页 |
| ·FACS检测α3整合素的表达情况 | 第122-123页 |
| ·FACS检测α2整合素的表达情况 | 第123-124页 |
| ·Mesothelial粘附试验 | 第124-125页 |
| 3 讨论 | 第125-128页 |
| 4 结论 | 第128-129页 |
| 第五章 WWOX基因沉默对Fn介导的粘附与对铂类诱导凋亡的影响 | 第129-142页 |
| 1 材料与方法 | 第129-132页 |
| ·主要试剂 | 第129页 |
| ·siRNA WWOX的粘附试验 | 第129-131页 |
| ·具体步骤 | 第129-130页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第130-131页 |
| ·蛋白质的Westtern Blot | 第131页 |
| ·siRNA WWOX对DDP诱导凋亡的影响 | 第131-132页 |
| ·结果判断 | 第132页 |
| ·统计学处理 | 第132页 |
| 2 实验结果与分析 | 第132-138页 |
| ·siRNA的粘附性试验 | 第132-133页 |
| ·Western Blot检测siRNA WWOX蛋白表达 | 第133-135页 |
| ·siRNA WWOX对DDP诱导凋亡的影响 | 第135-136页 |
| ·SRB检测活细胞数 | 第136-137页 |
| ·Western Blot检测敲除WWOX后的蛋白表达 | 第137-138页 |
| 3 讨论 | 第138-141页 |
| 4 结论 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-163页 |
