摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
1 绪论 | 第9-17页 |
·柽柳简介 | 第9页 |
·Lea蛋白及Lea基因的研究现状 | 第9-12页 |
·Lea蛋白的种类及分布 | 第9-10页 |
·Lea蛋白的结构及其性质 | 第10-11页 |
·Lea基因的表达 | 第11页 |
·Lea蛋白与植物抗逆性 | 第11-12页 |
·SOD基因的研究现状 | 第12-15页 |
·SOD的种类、分布及理化性质 | 第12-13页 |
·SOD基因的克隆与表达 | 第13-14页 |
·SOD转基因植物方面的研究 | 第14页 |
·SOD与植物抗逆性 | 第14-15页 |
·以酿酒酵母作为外源基因表达系统的研究现状 | 第15-16页 |
·本项研究的目的及意义 | 第16-17页 |
2 柽柳Lea基因酵母表达及抗逆性研究 | 第17-31页 |
·材料 | 第17-19页 |
·菌株与载体 | 第17页 |
·Lea基因 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·培养基 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·方法 | 第19-23页 |
·酵母表达载体pYES2-Lea的构建 | 第19页 |
·酵母表达载体重组质粒pYES2-Lea的鉴定 | 第19-20页 |
·重组质粒pYES2-Lea的酵母遗传转化 | 第20页 |
·酵母转化子的鉴定 | 第20页 |
·pYES2-Lea重组质粒的诱导表达 | 第20-22页 |
·转Lea基因酵母逆境胁迫实验 | 第22-23页 |
·结果与分析 | 第23-29页 |
·载体与目的基因的双酶切 | 第23-24页 |
·大肠杆菌重组质粒pYES2-Lea的检测 | 第24-25页 |
·酵母重组质粒pYES2-Lea的PCR检测 | 第25页 |
·Lea基因在酵母中表达结果 | 第25-26页 |
·转Lea基因酵母抗逆性实验 | 第26-29页 |
·本章小结 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
3 转MnSOD基因山新杨抗逆性研究 | 第31-53页 |
·实验材料 | 第31-33页 |
·菌株和质粒 | 第31页 |
·植物材料 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·培养基 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-39页 |
·MnSOD基因植物表达载体的构建 | 第33页 |
·中间表达载体导入农杆菌EHA105 | 第33-34页 |
·根癌农杆菌介导的山新杨遗传转化 | 第34页 |
·影响转化率的若干因素的优化实验 | 第34-35页 |
·MnSOD基因对逆境胁迫的应答 | 第35-36页 |
·转化山新杨的PCR检测 | 第36-37页 |
·转化山新杨的Southern斑点杂交 | 第37页 |
·转基因山新杨的Northern杂交 | 第37页 |
·转化山新杨的抗逆性 | 第37-39页 |
·结果与分析 | 第39-50页 |
·MnSOD基因植物表达载体的构建 | 第39-41页 |
·山新杨的遗传转化系统的优化结果分析 | 第41-43页 |
·盐碱胁迫下MnSOD基因的表达 | 第43-44页 |
·转基因山新杨的分子检测 | 第44-45页 |
·转基因山新杨的抗逆性分析 | 第45-50页 |
·本章小结 | 第50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
·农杆菌介导的山新杨遗传转化体系的优化 | 第50-51页 |
·盐胁迫对转基因山新杨生理生化特性的影响 | 第51-52页 |
·转基因植株的耐盐性与Northern杂交结果的相关性分析 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录1 Lea基因酵母表达载体的构建流程 | 第61-62页 |
附录2 MnSOD基因植物表达载体的构建流程 | 第62-63页 |
附录3 图版 | 第63-64页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |