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重组DEV gH与UL24基因杆状病毒构建及gH与UL24蛋白细胞定位

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-24页
   ·鸭肠炎病毒研究进展第13-20页
     ·历史第13页
     ·病原学第13-15页
     ·流行病学第15页
     ·DEV人工感染鸭体内分布规律第15-16页
     ·分子生物学特性第16-18页
     ·诊断第18-19页
     ·疫苗研制第19-20页
   ·α疱疹病毒gH与UL24蛋白研究进展第20-23页
     ·α疱疹病毒gH蛋白研究进展第20-23页
     ·α疱疹病毒UL24蛋白研究进展第23页
   ·研究的目的与意义第23-24页
2 材料与方法第24-34页
   ·实验材料第24-26页
     ·病毒与细胞第24页
     ·鸡胚与实验动物第24页
     ·载体第24页
     ·生物学试剂第24页
     ·引物设计第24页
     ·主要仪器第24-26页
   ·实验方法第26-34页
     ·DEV目的基因的克隆第26-28页
     ·重组gH与UL24基因杆状病毒的构建第28-31页
     ·gH蛋白细胞定位第31-32页
     ·UL24蛋白细胞定位第32-34页
3 结果第34-44页
   ·DEV目的基因的克隆第34-35页
   ·重组质粒pMD18-T-gH1与gH2基因片段的鉴定第35-36页
     ·重组质粒pMD18-T-gH1的鉴定第35页
     ·gH2基因片段的鉴定第35-36页
   ·重组质粒pMD18-T-UL24的鉴定第36页
   ·重组DEV gH与UL24基因杆状病毒的构建第36-39页
     ·重组质粒pBlue-gH的鉴定第36-37页
     ·重组质粒pBlue-UL24的鉴定第37页
     ·重组质粒pBlue-gH与pBlue-UL24的纯化第37-38页
     ·昆虫细胞的转染及重组病毒筛选第38页
     ·重组病毒的PCR检测第38-39页
   ·gH蛋白细胞定位第39-41页
     ·重组质粒pMD18-T-gH的鉴定第39页
     ·重组质粒pcDNA-gH的鉴定第39-40页
     ·重组质粒pcDNA-gH的纯化第40页
     ·重组质粒pcDNA-gH瞬时表达的间接免疫荧光检测第40-41页
     ·重组质粒pcDNA-gH瞬时表达的RT-PCR检测第41页
   ·UL24蛋白细胞定位第41-44页
     ·PCR反应克隆UL24基因第41页
     ·重组质粒pMD18-T-UL24的鉴定第41-42页
     ·重组质粒pEGFP-UL24的鉴定第42页
     ·重组质粒pEGFP-UL24的纯化第42-43页
     ·重组质粒pEGFP-UL24瞬时表达的荧光检测第43页
     ·重组质粒pEGFP-UL24瞬时表达的RT-PCR检测第43-44页
4 讨论第44-48页
   ·gH基因分段克隆策略第44页
   ·重组DEV gH与UL24基因杆状病毒的构建第44-45页
     ·杆状病毒表达系统的选择第44页
     ·重组DEV gH基因杆状病毒第44-45页
     ·重组DEV UL24基因杆状病毒第45页
   ·脂质体转染第45-46页
     ·细胞第45页
     ·血清第45-46页
     ·DNA质量第46页
   ·DEV gH蛋白细胞定位第46-47页
     ·pcDNA3.1载体的选择第46页
     ·DEV gH蛋白的细胞定位第46-47页
   ·DEV UL24蛋白细胞定位第47-48页
     ·pEGFP-C1载体的选择第47页
     ·DEV UL24蛋白的细胞定位第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-56页
攻读硕士期间发表的学术论文第56页

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