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菰DNA渐渗诱发水稻内源转座子mPing、Pong的转座激活

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-8页
前言第8-22页
 1. 植物远缘杂交的研究进展第8-11页
   ·远缘杂交与新种的形成第8-9页
   ·植物远源杂交中的基因组变异和表观遗传变异第9-10页
   ·植物远缘杂交引起基因表达的变化第10-11页
   ·远缘杂交可激活沉默的转座元件第11页
 2. 转座子的研究进展第11-19页
   ·转座子及其分类第11-14页
   ·MITEs 类转座子的研究进展第14-16页
   ·转座子与基因组进化第16-17页
   ·转座子的应用第17-18页
   ·转座子活性与DNA甲基化第18-19页
 3 本研究的背景、目的和意义第19-22页
材料与方法第22-35页
 1. 实验材料第22-23页
 2. 实验方法第23-35页
   ·植物材料的准备第23-24页
     ·“复态授粉法”获得渐渗杂交系第23页
     ·体细胞融合方法获得体细胞杂种(SH6)第23-24页
     ·愈伤组织的诱导及植株分化第24页
   ·植物基因组DNA的提取与纯化第24-25页
   ·Southern杂交分析第25-26页
     ·植物基因组DNA的酶切第25页
     ·Southern印迹第25页
     ·探针的分离第25-26页
     ·探针标记、Southern杂交及杂交信号的检测第26页
       ·Southern杂交第26页
       ·杂交信号的检测第26页
   ·mPing、Pong跳出、插入位点侧翼序列的克隆与序列分析第26-29页
     ·mPing、Pong跳出位点侧翼序列的克隆第26-29页
     ·mPing、Pong插入位点侧翼序列的克隆第29页
   ·转座子展示第29-32页
     ·酶切及连接第30页
     ·预扩增第30页
     ·选择性扩增第30-31页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第31-32页
       ·玻璃板的准备第31页
       ·凝胶配制第31页
       ·银染第31-32页
   ·PCR产物的纯化与克隆第32页
   ·感受态细胞的制备、转化及α互补筛选第32-33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第32页
     ·感受态细胞的转化及α互补筛选第32页
     ·阳性克隆的 PCR检测第32-33页
   ·植物总RNA的提取与RT-PCR第33-34页
     ·植物总RNA的提取第33页
     ·RT-PCR第33页
     ·检测总RNA中的DNA污染是否完全去除及反转录第一链合成是否成功第33-34页
   ·DNA序列测定、同源性探寻及mPing侧翼序列的表达序列同源性分析第34-35页
     ·DNA 序列测定及同源性探寻第34页
     ·mPing侧翼序列的表达序列同源性分析第34-35页
结果与分析第35-58页
 1. 菰DNA 渐渗诱导渐渗系RZ1、RZ2、RZ35 中mPing、Pong 的转座激活第35-50页
   ·Southern blot 检测渐渗系中mPing、Pong 的激活第35-37页
   ·渐渗系中mPing、Pong 跳出、插入位点的检测第37-46页
   ·组织培养激活松前基因组中的mPing 和 Pong,二者跳出后也均未留有足迹第46-50页
 2 菰DNA 导入诱导中花8 号基因组内的mPing、Pong 转座激活第50-56页
   ·Southern blot 检测体细胞杂种中mPing、Pong 的激活第50-51页
   ·体细胞杂种中mPing、Pong 跳出、插入位点的克隆及跳出后的足迹分析第51-56页
 3 松前、渐渗系基因组中mPing 对侧翼序列表达的影响分析第56-58页
讨论第58-62页
结论第62-63页
参考文献第63-77页
致谢第77-78页
在学期间公开发表论文及著作情况第78页

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