中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-8页 |
前言 | 第8-22页 |
1. 植物远缘杂交的研究进展 | 第8-11页 |
·远缘杂交与新种的形成 | 第8-9页 |
·植物远源杂交中的基因组变异和表观遗传变异 | 第9-10页 |
·植物远缘杂交引起基因表达的变化 | 第10-11页 |
·远缘杂交可激活沉默的转座元件 | 第11页 |
2. 转座子的研究进展 | 第11-19页 |
·转座子及其分类 | 第11-14页 |
·MITEs 类转座子的研究进展 | 第14-16页 |
·转座子与基因组进化 | 第16-17页 |
·转座子的应用 | 第17-18页 |
·转座子活性与DNA甲基化 | 第18-19页 |
3 本研究的背景、目的和意义 | 第19-22页 |
材料与方法 | 第22-35页 |
1. 实验材料 | 第22-23页 |
2. 实验方法 | 第23-35页 |
·植物材料的准备 | 第23-24页 |
·“复态授粉法”获得渐渗杂交系 | 第23页 |
·体细胞融合方法获得体细胞杂种(SH6) | 第23-24页 |
·愈伤组织的诱导及植株分化 | 第24页 |
·植物基因组DNA的提取与纯化 | 第24-25页 |
·Southern杂交分析 | 第25-26页 |
·植物基因组DNA的酶切 | 第25页 |
·Southern印迹 | 第25页 |
·探针的分离 | 第25-26页 |
·探针标记、Southern杂交及杂交信号的检测 | 第26页 |
·Southern杂交 | 第26页 |
·杂交信号的检测 | 第26页 |
·mPing、Pong跳出、插入位点侧翼序列的克隆与序列分析 | 第26-29页 |
·mPing、Pong跳出位点侧翼序列的克隆 | 第26-29页 |
·mPing、Pong插入位点侧翼序列的克隆 | 第29页 |
·转座子展示 | 第29-32页 |
·酶切及连接 | 第30页 |
·预扩增 | 第30页 |
·选择性扩增 | 第30-31页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
·玻璃板的准备 | 第31页 |
·凝胶配制 | 第31页 |
·银染 | 第31-32页 |
·PCR产物的纯化与克隆 | 第32页 |
·感受态细胞的制备、转化及α互补筛选 | 第32-33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
·感受态细胞的转化及α互补筛选 | 第32页 |
·阳性克隆的 PCR检测 | 第32-33页 |
·植物总RNA的提取与RT-PCR | 第33-34页 |
·植物总RNA的提取 | 第33页 |
·RT-PCR | 第33页 |
·检测总RNA中的DNA污染是否完全去除及反转录第一链合成是否成功 | 第33-34页 |
·DNA序列测定、同源性探寻及mPing侧翼序列的表达序列同源性分析 | 第34-35页 |
·DNA 序列测定及同源性探寻 | 第34页 |
·mPing侧翼序列的表达序列同源性分析 | 第34-35页 |
结果与分析 | 第35-58页 |
1. 菰DNA 渐渗诱导渐渗系RZ1、RZ2、RZ35 中mPing、Pong 的转座激活 | 第35-50页 |
·Southern blot 检测渐渗系中mPing、Pong 的激活 | 第35-37页 |
·渐渗系中mPing、Pong 跳出、插入位点的检测 | 第37-46页 |
·组织培养激活松前基因组中的mPing 和 Pong,二者跳出后也均未留有足迹 | 第46-50页 |
2 菰DNA 导入诱导中花8 号基因组内的mPing、Pong 转座激活 | 第50-56页 |
·Southern blot 检测体细胞杂种中mPing、Pong 的激活 | 第50-51页 |
·体细胞杂种中mPing、Pong 跳出、插入位点的克隆及跳出后的足迹分析 | 第51-56页 |
3 松前、渐渗系基因组中mPing 对侧翼序列表达的影响分析 | 第56-58页 |
讨论 | 第58-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第78页 |