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α-法尼烯合成酶基因转化拟南芥和烟草的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-21页
   ·植物体内萜类合成途径及关键酶定位研究进展第11-13页
     ·植物萜类的合成途径第11-12页
     ·植物萜类合酶的定位研究第12-13页
     ·异戊二烯合成途径的交互对话第13页
   ·α-法尼烯合成酶的研究进展第13-17页
     ·AFS 的特性第14-15页
     ·AFS 基因的分离和分析第15-16页
     ·AFS 基因的表达及调控第16-17页
     ·AFS 基因表达产物的研究第17页
   ·前景展望第17-21页
2 材料与方法第21-40页
   ·实验材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌株与质粒第21页
     ·酶及生化试剂第21页
     ·PCR 引物第21-22页
   ·实验方法第22-40页
     ·CTAB 大量法提取苹果组培苗叶片总RNA第22-23页
     ·RNA 反转录第23页
     ·苹果α-法尼烯合成酶表达载体的构建第23-26页
     ·拟南芥的栽培第26-27页
     ·拟南芥花絮侵染第27-28页
     ·转基因拟南芥的分子水平检测第28-35页
     ·转基因拟南芥、烟草色素含量的测定第35-36页
     ·转基因植株萜类和甾醇的测定第36-37页
     ·烟草激素含量测定第37-38页
     ·拟南芥原生质体定位第38-40页
3 结果与分析第40-55页
   ·正义表达载体的构建第40-41页
   ·pBI-AFS-GFP 载体的构建第41-42页
   ·转基因植株的检测及基因的表达分析第42-46页
     ·转基因拟南芥T1代的获得及转基因植株的PCR 检测第42-44页
     ·转基因植株的表达分析第44页
     ·转基因植株western 的检测第44-46页
   ·苹果α-法尼烯合成酶的亚细胞定位第46-50页
     ·AFS 的蛋白结构分析和定位预测第46-49页
     ·AFS 蛋白在拟南芥原生质体中的亚细胞定位第49-50页
   ·转基因拟南芥、烟草的色素含量第50-55页
     ·转基因烟草叶片主要挥发物含量第51-53页
     ·转基因烟草生长素、赤霉素含量第53-55页
4 讨论第55-58页
   ·α-法尼烯合成酶基因的转入对异戊二烯途径的影响第55-56页
   ·α-法尼烯合成酶的定位与功能第56-57页
   ·展望第57-58页
5 结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68页

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