中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
·诱导子胁迫下植物细胞培养 | 第11-13页 |
·诱导子胁迫下植物细胞次生代谢产物的生产 | 第11-12页 |
·诱导子胁迫下植物细胞的凋亡 | 第12-13页 |
·后基因组时代的有力工具——脂质组学(lipidomics) | 第13-19页 |
·脂质组学的迅速发展 | 第13-15页 |
·脂质组学的研究策略 | 第15-19页 |
·脂质信号途径 | 第19-23页 |
·磷脂酶及相关的脂质信号分子的调控功能 | 第19-21页 |
·氧脂途径的概述 | 第21-23页 |
·与脂质信号途径相关的其它重要信号途径 | 第23-25页 |
·氧迸发与脂质信号途径 | 第23-24页 |
·MAPK 途径激活与脂质信号途径 | 第24-25页 |
·本课题的研究意义和主要研究内容 | 第25-27页 |
·研究意义 | 第25-26页 |
·研究内容 | 第26-27页 |
第二章 基于LC/ESI/MS~n和ESI-MS/MS 策略构建红豆杉细胞膜磷脂图谱 | 第27-47页 |
·引言 | 第27页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·细胞株系及其培养 | 第28-29页 |
·红豆杉细胞膜磷脂的提取 | 第29-30页 |
·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析 | 第30-31页 |
·膜磷脂的直接进样质谱(ESI-MS/MS)分析 | 第31页 |
·结果与讨论 | 第31-45页 |
·细胞膜磷脂定性分析的策略 | 第31-33页 |
·细胞膜磷脂定性分析 | 第33-44页 |
·细胞膜磷脂定量方法的构建 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-47页 |
第三章 红豆杉细胞生长和自发凋亡过程中膜磷脂代谢差异的分析 | 第47-60页 |
·引言 | 第47页 |
·材料与方法 | 第47-49页 |
·主要仪器与试剂 | 第47-48页 |
·细胞株系及其培养 | 第48页 |
·红豆杉细胞膜磷脂的提取 | 第48页 |
·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析 | 第48页 |
·数据的标准化和主成分分析(PCA) | 第48页 |
·磷脂酶D(PLD)活性的检测 | 第48-49页 |
·结果与讨论 | 第49-59页 |
·不同培养时期红豆杉细胞膜磷脂的含量分析 | 第50-53页 |
·细胞膜磷脂代谢差异的PCA 分析 | 第53-56页 |
·比较分析两种红豆杉细胞PLD 酶的差异激活 | 第56-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第四章 不同诱导子胁迫下红豆杉细胞膜磷脂代谢差异的分析 | 第60-72页 |
·引言 | 第60页 |
·材料与方法 | 第60-62页 |
·主要仪器与试剂 | 第60-61页 |
·细胞株系培养及诱导 | 第61页 |
·实验设计 | 第61页 |
·红豆杉细胞膜磷脂的提取 | 第61页 |
·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI-MS)分析 | 第61-62页 |
·多元统计分析 | 第62页 |
·统计学处理 | 第62页 |
·结果与讨论 | 第62-70页 |
·MeJA 和铈诱导下红豆杉细胞膜磷脂代谢变化 | 第62-67页 |
·多元统计分析诱导子胁迫下细胞膜磷脂代谢物的变化规律 | 第67-70页 |
·小结 | 第70-72页 |
第五章 磷脂酶及下游脂质信号的激活触发铈诱导细胞凋亡和紫杉醇合成 | 第72-84页 |
·引言 | 第72页 |
·材料与方法 | 第72-75页 |
·主要仪器与试剂 | 第72-73页 |
·细胞株系培养及诱导 | 第73页 |
·实验设计 | 第73页 |
·磷脂酶活性的检测 | 第73页 |
·内源性JA 的检测 | 第73-74页 |
·PI-Hoechst33342 双重染色及荧光显微镜观察和凋亡率统计 | 第74页 |
·紫杉醇的提取与测定 | 第74-75页 |
·统计学处理 | 第75页 |
·结果与讨论 | 第75-82页 |
·诱导子胁迫下东北红豆杉细胞PLD 的激活 | 第75-76页 |
·诱导子胁迫下东北红豆杉细胞PLA_2的激活 | 第76-79页 |
·PLA_2 的激活对JA 积累,紫杉醇合成和细胞凋亡的影响 | 第79-82页 |
·小结 | 第82-84页 |
第六章 铈诱导细胞凋亡中O_2·- 类 ERK 和脂质途径的信号层次构建 | 第84-95页 |
·引言 | 第84页 |
·材料与方法 | 第84-87页 |
·主要仪器与试剂 | 第84-85页 |
·细胞株系培养及诱导 | 第85页 |
·实验设计 | 第85页 |
·O_2·-的测定 | 第85页 |
·Western Blotting 测定类 ERK 激酶的表达 | 第85-87页 |
·胶内类 ERK 激酶活性测定 | 第87页 |
·DNA 提取与琼脂糖凝胶电泳 | 第87页 |
·统计学处理 | 第87页 |
·结果与讨论 | 第87-93页 |
·Ce~(4+)诱导东北红豆杉细胞凋亡中类 ERK 的下调 | 第87-90页 |
·0_2·-迸发对类 ERK 的信号负调控 | 第90-93页 |
·细胞诱导凋亡过程中信号层次的构建 | 第93页 |
·小结 | 第93-95页 |
第七章 结论与展望 | 第95-98页 |
·结论 | 第95-96页 |
·创新点 | 第96-97页 |
·展望 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-112页 |
发表论文及参加科研情况 | 第112-114页 |
缩写词与符号表 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |