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铈诱导子强化红豆杉细胞次生代谢产物生产的信号机制研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
前言第9-11页
第一章 文献综述第11-27页
   ·诱导子胁迫下植物细胞培养第11-13页
     ·诱导子胁迫下植物细胞次生代谢产物的生产第11-12页
     ·诱导子胁迫下植物细胞的凋亡第12-13页
   ·后基因组时代的有力工具——脂质组学(lipidomics)第13-19页
     ·脂质组学的迅速发展第13-15页
     ·脂质组学的研究策略第15-19页
   ·脂质信号途径第19-23页
     ·磷脂酶及相关的脂质信号分子的调控功能第19-21页
     ·氧脂途径的概述第21-23页
   ·与脂质信号途径相关的其它重要信号途径第23-25页
     ·氧迸发与脂质信号途径第23-24页
     ·MAPK 途径激活与脂质信号途径第24-25页
   ·本课题的研究意义和主要研究内容第25-27页
     ·研究意义第25-26页
     ·研究内容第26-27页
第二章 基于LC/ESI/MS~n和ESI-MS/MS 策略构建红豆杉细胞膜磷脂图谱第27-47页
   ·引言第27页
   ·材料与方法第27-31页
     ·主要仪器第27-28页
     ·主要试剂第28页
     ·细胞株系及其培养第28-29页
     ·红豆杉细胞膜磷脂的提取第29-30页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析第30-31页
     ·膜磷脂的直接进样质谱(ESI-MS/MS)分析第31页
   ·结果与讨论第31-45页
     ·细胞膜磷脂定性分析的策略第31-33页
     ·细胞膜磷脂定性分析第33-44页
     ·细胞膜磷脂定量方法的构建第44-45页
   ·小结第45-47页
第三章 红豆杉细胞生长和自发凋亡过程中膜磷脂代谢差异的分析第47-60页
   ·引言第47页
   ·材料与方法第47-49页
     ·主要仪器与试剂第47-48页
     ·细胞株系及其培养第48页
     ·红豆杉细胞膜磷脂的提取第48页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析第48页
     ·数据的标准化和主成分分析(PCA)第48页
     ·磷脂酶D(PLD)活性的检测第48-49页
   ·结果与讨论第49-59页
     ·不同培养时期红豆杉细胞膜磷脂的含量分析第50-53页
     ·细胞膜磷脂代谢差异的PCA 分析第53-56页
     ·比较分析两种红豆杉细胞PLD 酶的差异激活第56-59页
   ·小结第59-60页
第四章 不同诱导子胁迫下红豆杉细胞膜磷脂代谢差异的分析第60-72页
   ·引言第60页
   ·材料与方法第60-62页
     ·主要仪器与试剂第60-61页
     ·细胞株系培养及诱导第61页
     ·实验设计第61页
     ·红豆杉细胞膜磷脂的提取第61页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI-MS)分析第61-62页
     ·多元统计分析第62页
     ·统计学处理第62页
   ·结果与讨论第62-70页
     ·MeJA 和铈诱导下红豆杉细胞膜磷脂代谢变化第62-67页
     ·多元统计分析诱导子胁迫下细胞膜磷脂代谢物的变化规律第67-70页
   ·小结第70-72页
第五章 磷脂酶及下游脂质信号的激活触发铈诱导细胞凋亡和紫杉醇合成第72-84页
   ·引言第72页
   ·材料与方法第72-75页
     ·主要仪器与试剂第72-73页
     ·细胞株系培养及诱导第73页
     ·实验设计第73页
     ·磷脂酶活性的检测第73页
     ·内源性JA 的检测第73-74页
     ·PI-Hoechst33342 双重染色及荧光显微镜观察和凋亡率统计第74页
     ·紫杉醇的提取与测定第74-75页
     ·统计学处理第75页
   ·结果与讨论第75-82页
     ·诱导子胁迫下东北红豆杉细胞PLD 的激活第75-76页
     ·诱导子胁迫下东北红豆杉细胞PLA_2的激活第76-79页
     ·PLA_2 的激活对JA 积累,紫杉醇合成和细胞凋亡的影响第79-82页
   ·小结第82-84页
第六章 铈诱导细胞凋亡中O_2·- 类 ERK 和脂质途径的信号层次构建第84-95页
   ·引言第84页
   ·材料与方法第84-87页
     ·主要仪器与试剂第84-85页
     ·细胞株系培养及诱导第85页
     ·实验设计第85页
     ·O_2·-的测定第85页
     ·Western Blotting 测定类 ERK 激酶的表达第85-87页
     ·胶内类 ERK 激酶活性测定第87页
     ·DNA 提取与琼脂糖凝胶电泳第87页
     ·统计学处理第87页
   ·结果与讨论第87-93页
     ·Ce~(4+)诱导东北红豆杉细胞凋亡中类 ERK 的下调第87-90页
     ·0_2·-迸发对类 ERK 的信号负调控第90-93页
     ·细胞诱导凋亡过程中信号层次的构建第93页
   ·小结第93-95页
第七章 结论与展望第95-98页
   ·结论第95-96页
   ·创新点第96-97页
   ·展望第97-98页
参考文献第98-112页
发表论文及参加科研情况第112-114页
缩写词与符号表第114-116页
致谢第116页

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