中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一部分 结核分枝杆菌PPE68蛋白编码基因Rv3873原核表达质粒的构建 | 第15-26页 |
1 引言 | 第15页 |
2 材料与方法 | 第15-19页 |
·材料 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-19页 |
3.结果 | 第19-24页 |
·结核分枝杆菌结核分枝菌Rv3873基因的PCR扩增 | 第19-20页 |
·转化后阳性重组克隆的筛选 | 第20-21页 |
·pGRv3873的PCR及限制性酶切鉴定 | 第21-22页 |
·Rv3873基因序列测定结果 | 第22-24页 |
4.讨论 | 第24-25页 |
5.小结 | 第25-26页 |
第二部分 结核分枝杆菌PPE68蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定 | 第26-35页 |
1 引言 | 第26页 |
2 材料和方法 | 第26-30页 |
·材料 | 第26-28页 |
·方法 | 第28-30页 |
3 结果 | 第30-33页 |
·重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第30-31页 |
·重组蛋白表达形式和溶解性分析 | 第31-33页 |
·免疫印迹检测结果 | 第33页 |
4.讨论 | 第33-34页 |
5.小结 | 第34-35页 |
第三部分 结核分枝杆菌PPE68蛋白多克隆抗体的制备 | 第35-43页 |
1.引言 | 第35页 |
2.材料和方法 | 第35-39页 |
·材料 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-39页 |
3.结果 | 第39-41页 |
·重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
·纯化的重组蛋白的浓度测定 | 第40页 |
·抗体效价的检测结果 | 第40页 |
·纯化重组蛋白的的免疫印迹检测 | 第40-41页 |
4.讨论 | 第41-42页 |
5.小结 | 第42-43页 |
第四部分 结核分枝杆菌特异性蛋白抗原、抗体ELISA检测方法的建立及初步应用 | 第43-55页 |
1.前言 | 第43页 |
2.材料和方法 | 第43-47页 |
·材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-47页 |
3.结果 | 第47-53页 |
·PPD-ELISA最佳反应条件的确立 | 第47-50页 |
·结核分枝杆菌特异抗体ELISA检测方法的建立 | 第50页 |
·结核分枝杆菌特异抗原ELISA检测方法的建立 | 第50-51页 |
·批内和批间重复性试验 | 第51页 |
·结核分枝杆菌特异性抗原/抗体ELISA检测方法的临床应用 | 第51-53页 |
4.讨论 | 第53-54页 |
5 小结 | 第54-55页 |
第五部分 结核分枝杆菌PPE68蛋白编码基因Rv3873真核表达质粒的构建 | 第55-61页 |
1.引言 | 第55页 |
2.材料和方法 | 第55-58页 |
·材料 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-58页 |
3.结果 | 第58-59页 |
4.讨论 | 第59页 |
5.小结 | 第59-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
文献综述 结核分支杆菌实验室诊断的研究进展 | 第66-85页 |
引言 | 第66页 |
一、细菌学诊断现状 | 第66-69页 |
二 血清学诊断现状 | 第69-74页 |
(一) 血清学诊断技术的方法 | 第69-71页 |
(二) 特异性抗原的研究状况 | 第71-74页 |
三.分子生物学诊断现状 | 第74-79页 |
(一) PCR方法 | 第75-77页 |
(二) DNA指纹技术 | 第77-78页 |
(三) 基因芯片技术(gene chip) | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
在读期间发表的论文情况 | 第85-87页 |
致谢 | 第87页 |