| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 缩写词 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-30页 |
| 第一节 植物次生代谢 | 第12-24页 |
| 1 植物次生代谢研究状况 | 第12-24页 |
| ·植物次生代谢物质 | 第12页 |
| ·植物次生代谢物质获得途径 | 第12-13页 |
| ·细胞工程的优缺点 | 第13页 |
| ·植物次生代谢调控 | 第13-24页 |
| 第二节 雪莲研究 | 第24-30页 |
| 1 雪莲简介 | 第24页 |
| 2 雪莲的药理 | 第24页 |
| 3 雪莲的化学成分研究 | 第24-26页 |
| ·黄酮类 | 第24-25页 |
| ·倍半萜内酯及内酯苷类 | 第25页 |
| ·香豆精和木质素类 | 第25页 |
| ·甾体和生物碱类 | 第25-26页 |
| ·糖类及其它化合物 | 第26页 |
| ·水母雪莲培养物的成分 | 第26页 |
| 4 雪莲目前研究进展 | 第26-28页 |
| ·培养雪莲药理研究 | 第26-27页 |
| ·雪莲大规模再生植株培养 | 第27页 |
| ·雪莲分子生物学研究 | 第27-28页 |
| 5 本实验室在提高水母雪莲细胞黄酮产量方面所做的研究 | 第28-30页 |
| 第二章 诱导子对水母雪莲培养物的生长及次生代谢产物合成影响 | 第30-52页 |
| 第一节 引言 | 第30-32页 |
| 第二节 材料与方法 | 第32-40页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·仪器设备、试剂耗材及其他材料 | 第32-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-40页 |
| ·诱导子的准备 | 第33页 |
| ·不同添加浓度的SA 对水母雪莲细胞和毛状根系生长、黄酮及紫丁香甙合成影响 | 第33页 |
| ·不同添加时间的SA 对水母雪莲细胞和毛状根系生长、黄酮及紫丁香甙合成影响 | 第33-34页 |
| ·不同添加浓度的YE 对水母雪莲细胞和毛状根系生长、黄酮及紫丁香甙合成影响 | 第34页 |
| ·不同添加时间的YE 对水母雪莲细胞和毛状根系生长、黄酮及紫丁香甙合成影响 | 第34页 |
| ·测定分析 | 第34-35页 |
| ·查耳酮合成酶和查耳酮异构酶基因RT-PCR 分析 | 第35-38页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性测定 | 第38-40页 |
| 第三节 实验结果与分析 | 第40-52页 |
| 1 水母雪莲培养物与野生植株黄酮和紫丁香甙含量对比 | 第40页 |
| 2 细胞系 | 第40-43页 |
| ·SA 诱导效应 | 第40-42页 |
| ·YE 诱导效应 | 第42-43页 |
| 3 水母雪莲毛状根系 | 第43-45页 |
| ·SA 诱导效应 | 第43-44页 |
| ·YE 诱导效应 | 第44-45页 |
| 4 SA 和YE 对水母雪莲悬浮细胞系和毛状根诱导效果的比较 | 第45-46页 |
| 5 SA 诱导下CHS、CHI 基因表达量、PAL 酶活性与黄酮含量的关系 | 第46-49页 |
| 6 讨论 | 第49-51页 |
| 7 小结 | 第51页 |
| 8 下一步工作 | 第51-52页 |
| 第三章 水母雪莲查耳酮合成酶基因（Sm CHS）的克隆 | 第52-75页 |
| 第一节 引言 | 第52-54页 |
| 第二节 材料与方法 | 第54-63页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第54页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·菌种与质粒 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| 2 实验方法 | 第54-63页 |
| ·引物设计 | 第54-55页 |
| ·RT-PCR 扩增获得SmCHS 上游片断 | 第55-56页 |
| ·RT-PCR 获得SmCHS 全长cDNA | 第56页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态制备及转化 | 第56-57页 |
| ·转化子的鉴定 | 第57页 |
| ·测序分析 | 第57页 |
| ·SmCHS 植物表达载体构建 | 第57-61页 |
| ·三亲交配转化 | 第61页 |
| ·Floral Dip 法转拟南芥突变体 | 第61-63页 |
| 第三节 实验结果与讨论 | 第63-75页 |
| 1 水母雪莲查耳酮合成酶CHS（Chalcone synthase）基因的克隆 | 第63-70页 |
| ·RT-PCR 获得SmCHS 上游基因片断 | 第63页 |
| ·RT-PCR 获得SmCHS 全长cDNA | 第63-64页 |
| ·SmCHS cDNA 基因结构序列分析 | 第64-66页 |
| ·SmCHS 推测蛋白序列分析 | 第66-70页 |
| 2 水母雪莲查耳酮合成酶基因真核表达载体的构建 | 第70-72页 |
| ·SmCHS 表达载体pBICHS 构建程序 | 第70-71页 |
| ·表达载体的分子鉴定 | 第71-72页 |
| 3 Froral Dip 法转拟南芥突变体 | 第72-73页 |
| 4 小结 | 第73页 |
| 5 下一步工作 | 第73-75页 |
| 总结与展望 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 附录 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 个人简历及硕士期间研究成果 | 第90页 |
