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法呢基焦磷酸合酶基因(fps)转化烟草的研究

摘要第1-9页
1.文献综述第9-14页
   ·烟草基因工程发展简史第9-10页
     ·国外烟草基因工程发展简史第9页
     ·国内烟草基因工程发展简史第9-10页
   ·烟草抗真菌病害基因工程研究现状第10-11页
     ·真菌病害及其危害第10页
     ·抗真菌病害基因工程途径第10-11页
       ·抑菌蛋白第10-11页
       ·病原真菌酶的抑制蛋白第11页
       ·增强细胞壁强度的酶的利用第11页
       ·植保素与植物抗真菌性第11页
   ·烟草植保素相关基因的研究应用第11-14页
     ·植保素的发现第11-12页
     ·代谢途径第12-13页
     ·倍半萜类植保素相关基因的应用第13-14页
2.引言第14-15页
3.材料与方法第15-26页
   ·fps基因转化烟草K326转化植株的获得第15-17页
     ·材料第15页
       ·基因克隆及载体构建第15页
       ·植物材料第15页
       ·培养基第15页
       ·主要仪器第15页
     ·实验方法第15-17页
       ·K326无菌的诱导第16页
       ·菌株活化第16页
       ·转化方案及转化植株的筛选第16-17页
   ·转化植株的分子检测第17-23页
     ·材料第17页
       ·供试材料第17页
       ·试剂盒第17页
       ·主要仪器与试剂第17页
     ·试验方法第17-23页
       ·质粒DNA提取与纯化第17-18页
       ·叶片DNA的提取第18-19页
       ·PCR检测第19-20页
       ·fps基因探针的标记第20页
       ·PCR-Southern印迹杂交检测第20-21页
       ·叶片总RNA的提取第21-22页
       ·Northern印迹杂交检测第22-23页
       ·转基因植株fps酶活性鉴定第23页
   ·抗病试验及纯合系的筛选第23-25页
     ·材料第23-24页
       ·病菌第23页
       ·主要仪器和试剂第23-24页
     ·试验方法第24-25页
       ·离体叶片的赤星病接种第24页
       ·卡那霉素抗性试验第24页
       ·黑胫病活体接种第24页
       ·转基因烟草纯系的获得第24-25页
   ·转基因株系T2代的大田试验第25-26页
     ·材料第25页
     ·试验方法第25-26页
       ·成熟期各株系农艺性状第25页
       ·各株系田间赤星病调查第25页
       ·烤后烟总类胡萝卜素含量测定第25页
       ·烤后烟的香气测定第25页
       ·烤后烟的常规化学成分分析第25页
       ·不同株系烟叶样品评吸结果分析第25-26页
4.结果和分析第26-36页
   ·fps基因转化烟草K326转化植株的获得第26-27页
   ·转基因株系的分子检测第27-28页
     ·转化植株的PCR检测第27页
     ·PCR-Southern印迹杂交第27-28页
     ·Northern-blot杂交第28页
     ·转基因植株FPS酶活性鉴定第28页
   ·抗病实试验及纯系的初步筛选第28-31页
     ·离体叶片赤星病接种第29页
     ·转基因烟草种子卡那霉素抗性第29-30页
     ·活体黑胫病接种第30-31页
     ·转基因烟草纯系的获得第31页
   ·转基因株系的大田试验第31-36页
     ·成熟时期各株系的农艺性状第32页
     ·赤星病病情调查第32-33页
     ·烤后总类胡萝卜素含量比较第33页
     ·烤后烟叶的香气物质含量分析第33-34页
     ·常规化学成分分析第34-35页
     ·不同株系烟叶样品评吸结果分析第35-36页
5.结论与讨论第36-38页
   ·结论第36页
   ·讨论第36-37页
   ·需要进一步开展的工作第37-38页
Abstract第38-40页
参考文献第40-43页

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