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新城疫病毒V蛋白的表达及其对干扰素活性影响的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
1 引言第14-29页
   ·新城疫病毒研究概况与相关进展第14-23页
     ·新城疫病毒的一般生物学特性第15-17页
     ·新城疫病毒的基因组特点第17-18页
     ·新城疫病毒致病的机制第18-21页
     ·新城疫病毒P 基因的RNA 编辑第21-23页
   ·副粘病毒抗IFN 作用机制第23-28页
     ·IFN 抗病毒作用的机理与副粘病毒RNA 编辑的关系第23-24页
     ·副粘病毒V 蛋白拮抗IFN 的研究进展第24-28页
   ·研究的目的和意义第28-29页
2 材料与方法第29-42页
   ·实验材料第29-30页
     ·病毒及分子生物学相关材料第29页
     ·工具酶与主要试剂第29页
     ·实验仪器第29-30页
   ·实验方法第30-42页
     ·三种不同宿主(鸡、鸽、鹅)新城疫病毒部分P 基因的克隆第30-33页
     ·三种不同宿主(鸡、鸽、鹅)新城疫病毒V 基因的克隆第33-34页
     ·鸡新城疫病毒F48E9株V 基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备第34-37页
     ·三种不同宿主新城疫病毒V 基因真核表达载体的构建第37页
     ·NDV V 蛋白重组质粒真核表达及Western blot 检测第37-38页
     ·MTT 法检测NDV V 蛋白拮抗IFN 的活性研究第38-39页
     ·动物体内NDV V 蛋白拮抗IFN 活性的研究第39-42页
3 实验结果第42-59页
   ·三种不同宿主新城疫病毒 NDV 部分P 基因的克隆第42页
   ·三种不同宿主新城疫病毒 NDV V 基因的克隆第42-43页
     ·NDV V12 片段的PCR 扩增第42页
     ·NDV V 基因的PCR 扩增第42-43页
     ·NDV V 基因序列比较第43页
   ·NDVF_(48)E_9 株V 基因原核表达载体的构建第43-44页
   ·NDVF_(48)E_9 株V 基因在大肠杆菌中表达研究第44-46页
     ·NDVF_(48)E_9 株V 基因在大肠杆菌中表达及鉴定第44-45页
     ·目的蛋白最佳表达条件的优化第45页
     ·目的蛋白的纯化第45-46页
     ·目的蛋白的Western blot 检测第46页
   ·NDV V 基因真核表达载体的构建第46-49页
     ·三种宿主的NDV V 基因真核表达载体的构建及鉴定第46-48页
     ·NDV V 蛋白在Vero 细胞中的表达第48-49页
   ·V 蛋白功能研究第49-59页
     ·NDV 诱导IFN 最佳条件的确定第49-51页
     ·MTT 法体外检测NDV V 重组蛋白拮抗IFN 活性第51-54页
     ·动物免疫实验体内检测F48E9株 NDV V 蛋白拮抗IFN 活性第54-59页
4 讨论第59-70页
   ·NDV V 基因的克隆和序列分析第59-62页
     ·NDV V 基因的克隆第59页
     ·V 基因的序列分析第59-62页
   ·NDV V 蛋白的表达第62-65页
     ·NDVF_(48)E_9 株V 蛋白的原核表达和抗血清的制备第63-64页
     ·鸡、鸽和鹅源NDV V 蛋白真核表达载体的构建第64-65页
   ·NDV V 蛋白功能研究第65-70页
     ·NDV 重组V 蛋白体外拮抗IFN 的研究第65-67页
     ·动物免疫试验检测NDV V 重组蛋白拮抗IFN 活性第67-70页
5 结论第70-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-84页
附录A V 基因克隆路线第84-85页
附录B NDV V 基因核苷酸序列比较第85-92页
附录CF_(48)E_9株NDV V 基因原核表达载体的构建第92-93页
附录D NDV V 蛋白基因真核表达载体的构建第93-94页
附录E 试验主要试剂的配制第94-96页
攻读博士研究生期间发表的论文第96页

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