柽柳泛素交联酶基因的遗传转化及抗逆性分析
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-24页 |
| ·柽柳的概况 | 第9页 |
| ·植物基因工程研究现状 | 第9-10页 |
| ·逆境胁迫对植物的影响 | 第10-13页 |
| ·盐胁迫对植物形态结构及生理生化过程的影响 | 第10-12页 |
| ·干旱胁迫对植物形态结构和生理生化过程的影响 | 第12-13页 |
| ·植物泛素交联酶基因研究进展 | 第13-23页 |
| ·泛素的发现 | 第13页 |
| ·泛素系统的组成及相关功能 | 第13-21页 |
| ·泛素与环境胁迫响应 | 第21-23页 |
| ·研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 泛素交联酶基因植物表达载体构建及遗传转化 | 第24-31页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·酶和试剂 | 第25-26页 |
| ·泛素交联酶基因植物表达载体构建 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第26页 |
| ·三亲交配法将中间载体导入农杆菌EHA105 | 第26-27页 |
| ·泛素交联酶基因烟草的遗传转化 | 第27-28页 |
| ·无菌苗的继代培养 | 第27-28页 |
| ·根癌农杆菌介导的烟草的遗传转化 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·中间表达载体PUR的鉴定 | 第28-29页 |
| ·三亲交配转化质粒的PCR电泳检测图谱 | 第29页 |
| ·泛素交联酶基因烟草的高效遗传转化体系的建立 | 第29-31页 |
| 3 转泛素交联酶基因烟草的分子检测 | 第31-39页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·DNA提取试剂 | 第31页 |
| ·总RNA提取试剂 | 第31页 |
| ·酶类及试制盒 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·转化烟草的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·PCR-Southern杂交过程 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR检测 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·转化烟草的PCR检测 | 第35页 |
| ·转化烟草的PCR-Southern杂交 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR检测 | 第36页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR检测 | 第36-39页 |
| 4 泛素交联酶基因功能验证 | 第39-52页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·仪器设备 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·NaCl胁迫实验 | 第39-40页 |
| ·干旱胁迫实验 | 第40页 |
| ·生理指标测定方法 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-52页 |
| ·NaCl胁迫相关数据分析 | 第41-47页 |
| ·干旱胁迫相关数据分析 | 第47-52页 |
| 5 讨论 | 第52-58页 |
| ·柽柳泛素交联酶基因可提高植物抗逆性 | 第52-56页 |
| ·逆境胁迫下转泛素交联酶基因烟草细胞膜稳定性提高 | 第52-54页 |
| ·逆境胁迫下转泛素交联酶基因烟草SOD活性提高 | 第54-55页 |
| ·泛素交联酶基因可提高转基因烟草的叶绿素含量 | 第55页 |
| ·逆境胁迫下转泛素交联酶基因烟草生长量的提高 | 第55-56页 |
| ·外源基因表达量与转泛素交联酶基因烟草抗逆相关性 | 第56-57页 |
| ·研究问题展望 | 第57-58页 |
| 6 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 图板 | 第66-67页 |
| 缩略词 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-70页 |
