DNA的硅藻土纯化法与脐橙番茄红素β环化酶基因筛选及上游序列分析
| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-14页 |
| 1 DNA提取与纯化 | 第8-11页 |
| ·氯化铯密度梯度离心法 | 第8-9页 |
| ·液相色谱层析法(FPLC或HPLC) | 第9页 |
| ·高盐沉淀法 | 第9页 |
| ·乙醚抽提法 | 第9-10页 |
| ·试剂盒纯化法 | 第10页 |
| ·硅藻土纯化法 | 第10-11页 |
| 2 柑桔番茄红素BETA环化酶基因的研究进展 | 第11-12页 |
| 3 启动子预测研究进展 | 第12-14页 |
| ·转录起始位点 | 第12-13页 |
| ·启动子组成 | 第13-14页 |
| 第二章 硅藻土纯化DNA法的改进及其应用 | 第14-26页 |
| 1 材料与方法 | 第15-17页 |
| ·材料与试剂 | 第15页 |
| ·质粒与菌株、基因组DNA提取材料 | 第15页 |
| ·硅藻土的制备 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·方法 | 第15-17页 |
| ·细菌的培养和质粒的提取 | 第15页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第15-16页 |
| ·DNA的定量 | 第16页 |
| ·DNA纯化标准方案 | 第16页 |
| ·确定硅藻土的最佳用量 | 第16页 |
| ·DNA纯度的定义以及纯化倍数的计算 | 第16-17页 |
| ·测序 | 第17页 |
| ·PCR检测 | 第17页 |
| 2 结果 | 第17-23页 |
| ·硅藻土最佳用量 | 第17页 |
| ·pLZ14质粒纯化的回收率和纯化倍数 | 第17-18页 |
| ·质粒纯化对测序结果的影响 | 第18-20页 |
| ·应用硅藻土法纯化基因DNA | 第20-22页 |
| ·PCR检测脐橙果肉基因组DNA | 第22-23页 |
| 3 讨论 | 第23-26页 |
| ·硅藻土的分级 | 第23页 |
| ·硅藻土的用量标准 | 第23-24页 |
| ·DNA纯度与定量 | 第24页 |
| ·硅石(含硅藻土)粉法适用范围 | 第24页 |
| ·应用硅藻土纯化果树难提取组织基因组DNA | 第24-26页 |
| 第三章 脐橙番茄红素B环化酶基因筛选 | 第26-33页 |
| 1 材料与方法 | 第26-28页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·噬菌体文库铺板和转移 | 第26-27页 |
| ·引物设计与合成 | 第27页 |
| ·PCR反应 | 第27-28页 |
| ·噬菌体文库PCR筛选 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-32页 |
| ·特异引物 | 第28-29页 |
| ·特异引物和通用引物组合 | 第29-30页 |
| ·UP19+R1DP2引物选择 | 第30-31页 |
| ·筛选结果 | 第31-32页 |
| ·UP197+LCYBDP2引物对筛选结果 | 第31页 |
| ·UP19+R1DP2筛选结果 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 脐橙番茄红素B环化酶基因上游序列分析 | 第33-38页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·λ噬菌体的大量培养 | 第33页 |
| ·λDNA的提取 | 第33-34页 |
| ·λDNA的纯化 | 第34页 |
| ·测序 | 第34页 |
| 2.结果 | 第34-36页 |
| 3 分析与讨论 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| ABSTRACT | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
