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小麦苗期热胁迫基因表达谱分析及相关基因的克隆

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第5-7页
第一章 文献综述第7-15页
   ·植物耐热性研究进展第7-14页
     ·植物耐热的遗传学进展第7-8页
       ·耐热性的遗传学分析和细胞学定位第7页
       ·耐热性的QTL分析第7页
       ·耐热性相关的突变体和转基因进展第7-8页
     ·植物对高温胁迫应答的分子机制第8-14页
       ·植物对高温胁迫的适应-耐热性的获得第8-9页
       ·热激蛋白与植物耐热第9-12页
       ·植物激素与耐热第12页
       ·抗氧化与植物耐热第12页
       ·质膜与植物耐热第12-13页
       ·钙信号与植物耐热第13-14页
   ·本研究的目的和意义第14-15页
第二章 利用AFFYMETRIX BARLEY1基因芯片对小麦热胁迫前后基因表达谱的分析第15-25页
   ·材料与方法第15-16页
     ·供试材料第15页
     ·总RNA的提取第15页
     ·RNA的反转录和生物素标记的cRNA的合成第15-16页
     ·芯片的杂交、洗涤、染色与扫描第16页
     ·数据分析第16页
   ·结果与分析第16-22页
     ·芯片质量以及杂交结果的可靠性分析第16-17页
     ·杂交结果分析第17-19页
     ·差异表达基因的功能分类第19-22页
       ·热激蛋白与分子伴侣相关基因热胁迫前后的表达变化第20-21页
       ·其它逆境相关蛋白基因热胁迫前后的表达变化第21页
       ·物质运输相关基因热胁迫前后的表达变化第21页
       ·泛素-蛋白酶体通路相关基因热胁迫前后的表达变化第21-22页
   ·讨论第22-25页
     ·利用大麦芯片进行小麦热胁迫前后基因表达谱分析的可行性第22页
     ·小麦热胁迫前后的基因表达谱分析第22-25页
第三章 利用半定量RT-PCR和REALTIME RT-PCR的方法对芯片杂交结果的验证第25-32页
   ·材料与方法第25-28页
     ·供试材料第25页
     ·总RNA提取和纯化第25-26页
     ·cDNA合成第26页
     ·PCR引物设计及反应体系第26-27页
     ·扩增片段的回收其与pGEM-Teasy(promega)载体的连接第27页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27页
     ·连接产物转化第27-28页
     ·核酸序列测定、同源性比较第28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·半定量RT-PCR验证结果第28-29页
     ·RealTime RT-PCR验证结果第29-31页
   ·结论第31-32页
第四章 热胁迫响应基因TACDPK和TAPK基因的克隆第32-46页
   ·材料和方法第32页
     ·供试材料第32页
     ·电子克隆ORF的方法第32页
     ·模板准备、PCR扩增以及克隆、测序第32页
   ·结果与分析第32-44页
     ·TaPK基因的ORF拼接、克隆、测序以及序列分析第33-37页
       ·TaPK基因ORF的获得第33-35页
       ·TaPK基因推测蛋白的蛋白质性质分析第35-36页
       ·小麦TaPK基因编码蛋白质与其它物种同源基因氨基酸序列比较第36-37页
     ·TaCDPK基因的ORF拼接、克隆、测序以及序列分析第37-44页
       ·TaCDPK基因ORF的获得第37-40页
       ·TaCDPK基因推测蛋白的蛋白质性质分析第40-42页
       ·小麦TaCDPK基因编码蛋白质与其它物种同源基因氨基酸序列比较第42-44页
   ·讨论第44-46页
     ·TaCDPK基因的结构和功能分析第44页
     ·TaPK基因的结构和功能推测第44-46页
结论第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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