摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-15页 |
·植物耐热性研究进展 | 第7-14页 |
·植物耐热的遗传学进展 | 第7-8页 |
·耐热性的遗传学分析和细胞学定位 | 第7页 |
·耐热性的QTL分析 | 第7页 |
·耐热性相关的突变体和转基因进展 | 第7-8页 |
·植物对高温胁迫应答的分子机制 | 第8-14页 |
·植物对高温胁迫的适应-耐热性的获得 | 第8-9页 |
·热激蛋白与植物耐热 | 第9-12页 |
·植物激素与耐热 | 第12页 |
·抗氧化与植物耐热 | 第12页 |
·质膜与植物耐热 | 第12-13页 |
·钙信号与植物耐热 | 第13-14页 |
·本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
第二章 利用AFFYMETRIX BARLEY1基因芯片对小麦热胁迫前后基因表达谱的分析 | 第15-25页 |
·材料与方法 | 第15-16页 |
·供试材料 | 第15页 |
·总RNA的提取 | 第15页 |
·RNA的反转录和生物素标记的cRNA的合成 | 第15-16页 |
·芯片的杂交、洗涤、染色与扫描 | 第16页 |
·数据分析 | 第16页 |
·结果与分析 | 第16-22页 |
·芯片质量以及杂交结果的可靠性分析 | 第16-17页 |
·杂交结果分析 | 第17-19页 |
·差异表达基因的功能分类 | 第19-22页 |
·热激蛋白与分子伴侣相关基因热胁迫前后的表达变化 | 第20-21页 |
·其它逆境相关蛋白基因热胁迫前后的表达变化 | 第21页 |
·物质运输相关基因热胁迫前后的表达变化 | 第21页 |
·泛素-蛋白酶体通路相关基因热胁迫前后的表达变化 | 第21-22页 |
·讨论 | 第22-25页 |
·利用大麦芯片进行小麦热胁迫前后基因表达谱分析的可行性 | 第22页 |
·小麦热胁迫前后的基因表达谱分析 | 第22-25页 |
第三章 利用半定量RT-PCR和REALTIME RT-PCR的方法对芯片杂交结果的验证 | 第25-32页 |
·材料与方法 | 第25-28页 |
·供试材料 | 第25页 |
·总RNA提取和纯化 | 第25-26页 |
·cDNA合成 | 第26页 |
·PCR引物设计及反应体系 | 第26-27页 |
·扩增片段的回收其与pGEM-Teasy(promega)载体的连接 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
·连接产物转化 | 第27-28页 |
·核酸序列测定、同源性比较 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-31页 |
·半定量RT-PCR验证结果 | 第28-29页 |
·RealTime RT-PCR验证结果 | 第29-31页 |
·结论 | 第31-32页 |
第四章 热胁迫响应基因TACDPK和TAPK基因的克隆 | 第32-46页 |
·材料和方法 | 第32页 |
·供试材料 | 第32页 |
·电子克隆ORF的方法 | 第32页 |
·模板准备、PCR扩增以及克隆、测序 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-44页 |
·TaPK基因的ORF拼接、克隆、测序以及序列分析 | 第33-37页 |
·TaPK基因ORF的获得 | 第33-35页 |
·TaPK基因推测蛋白的蛋白质性质分析 | 第35-36页 |
·小麦TaPK基因编码蛋白质与其它物种同源基因氨基酸序列比较 | 第36-37页 |
·TaCDPK基因的ORF拼接、克隆、测序以及序列分析 | 第37-44页 |
·TaCDPK基因ORF的获得 | 第37-40页 |
·TaCDPK基因推测蛋白的蛋白质性质分析 | 第40-42页 |
·小麦TaCDPK基因编码蛋白质与其它物种同源基因氨基酸序列比较 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
·TaCDPK基因的结构和功能分析 | 第44页 |
·TaPK基因的结构和功能推测 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54页 |