| 缩写词 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 去饱和酶的研究进展 | 第12-19页 |
| ·去饱和酶的研究概况 | 第12-14页 |
| ·去饱和酶的种类 | 第14-15页 |
| ·去饱和酶的结构特点 | 第15页 |
| ·植物细胞的脂肪酸去饱和作用 | 第15-17页 |
| ·去饱和酶与温度胁迫的关系 | 第17-19页 |
| 2 FAD2 的研究进展 | 第19-21页 |
| ·FAD2 的性质 | 第19-20页 |
| ·活性调节 | 第20页 |
| ·FAD2 的多基因多拷贝现象 | 第20-21页 |
| ·FAD2 功能缺失对生物膜的影响 | 第21页 |
| 3 RNA 干扰技术的发展和在植物中的应用 | 第21-26页 |
| ·RNA 干扰技术的发展 | 第21-22页 |
| ·RNA 干扰技术的作用机制 | 第22-23页 |
| ·转录后基因沉默技术在植物中的应用 | 第23-25页 |
| ·RNAi 技术优势和存在的问题 | 第25-26页 |
| 4 实验的目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-44页 |
| 1 实验材料 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·引物 | 第28-29页 |
| ·质粒 | 第29-30页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-44页 |
| ·植物总DNA 的微量提取(SDS 法) | 第30-31页 |
| ·植物总DNA 的大量提取(CTAB 法) | 第31-32页 |
| ·植物总RNA 的提取 | 第32页 |
| ·植物SiRNA 的提取 | 第32-33页 |
| ·RNA 的变性凝胶电泳 | 第33页 |
| ·Northern 印迹 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA 的微量提取(碱裂解法) | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第35-36页 |
| ·普通PCR 扩增 | 第36页 |
| ·cDNA 第一条链的反转录合成 | 第36-37页 |
| ·玻璃奶法回收DNA 片段 | 第37页 |
| ·离心柱法回收DNA 片段 | 第37-38页 |
| ·酶切与连接 | 第38页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞制备(小量) | 第38-39页 |
| ·农杆菌细胞转化(三亲交配法) | 第39页 |
| ·农杆菌双元载体中mini-Ti 质粒提取 | 第39-40页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第40-41页 |
| ·膜脂的提取、分离及脂肪酸组成分析 | 第41页 |
| ·Southern 印迹 | 第41-44页 |
| 第三章 烟草NtFAD2 基因的克隆和沉默表达载体的构建 | 第44-57页 |
| 1 材料和方法 | 第44-47页 |
| ·NtFAD2 基因的克隆 | 第44-45页 |
| ·PCR 产物的亚克隆 | 第45页 |
| ·序列分析 | 第45页 |
| ·烟草NtFAD2 沉默载体的构建策略 | 第45-47页 |
| 2 结果 | 第47-56页 |
| ·烟草NtFAD2 基因克隆 | 第47-55页 |
| ·烟草NtFAD2 沉默表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 转基因烟草的鉴定 | 第57-63页 |
| 1 前言 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-62页 |
| ·产物鉴定 | 第57-58页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第58-60页 |
| ·遗传学鉴定 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 第五章 烟草NtFAD2 基因沉默对脂肪酸去饱和的影响 | 第63-69页 |
| 1 前言 | 第63页 |
| 2 结果 | 第63-67页 |
| ·烟草叶片总脂 | 第63-64页 |
| ·烟草叶片单脂 | 第64-65页 |
| ·烟草不同器官的脂肪酸含量的变化 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 第六章 温度对烟草NtFAD2 沉默效应的影响 | 第69-79页 |
| 1 前言 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-76页 |
| ·不同生长温度下烟草叶片总脂中油酸的含量随着处理时间的变化 | 第69-70页 |
| ·烟草充分伸展的叶片总脂中油酸的含量与生长温度的关系 | 第70-72页 |
| ·烟草充分伸展的叶片单脂中油酸的含量与生长温度的关系 | 第72-73页 |
| ·烟草叶片在不同的温度下NtFAD2 的m RNA 变化 | 第73-74页 |
| ·烟草在不同的生长温度下种子总脂中油酸的含量随时间的变化 | 第74-75页 |
| ·温度对烟草叶片总脂中软脂酸含量的影响 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-79页 |
| 总结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 博士期间论文情况 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
