利用抑制消减杂交技术寻找无融合生殖相关基因
| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-4页 |
| 缩略词表 | 第4-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-31页 |
| ·无融合生殖概述 | 第13-18页 |
| ·无融合生殖的概念及分类 | 第13-14页 |
| ·无融合生殖研究的进展 | 第14-16页 |
| ·甜菜M14单体附加系的获得及研究现状 | 第16-18页 |
| ·抑制消减杂交概述 | 第18-26页 |
| ·抑制消减杂交原理 | 第19-22页 |
| ·抑制消减杂交操作流程 | 第22-23页 |
| ·抑制消减杂交的优点和缺点 | 第23-24页 |
| ·抑制消减杂交的应用 | 第24-26页 |
| ·抑制消减杂交的应用前景 | 第26页 |
| ·表达序列标签 | 第26-29页 |
| ·EST的概述 | 第26-27页 |
| ·EST的应用 | 第27-29页 |
| ·本实验拟采取的技术路线 | 第29-31页 |
| 第2章 材料与方法 | 第31-52页 |
| ·实验材料 | 第31-37页 |
| ·植物材料 | 第31-32页 |
| ·实验菌株与克隆载体 | 第32页 |
| ·引物与接头 | 第32页 |
| ·实验所用试剂 | 第32-33页 |
| ·缓冲液与常规试剂 | 第33-36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-52页 |
| ·M14单体附加系与栽培甜菜总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第38-39页 |
| ·抑制消减杂交 | 第39-44页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第44-45页 |
| ·细菌的扩增与冻存 | 第45-46页 |
| ·重组克隆的分析 | 第46-48页 |
| ·反向Northern Blot杂交 | 第48-52页 |
| 第3章 结果 | 第52-60页 |
| ·总RNA纯度及完整性检测 | 第52-53页 |
| ·抑制消减杂交 | 第53-55页 |
| ·cDNA双链的酶切 | 第53-55页 |
| ·消减杂交后两轮PCR扩增 | 第55页 |
| ·PCR产物α-互补筛选 | 第55-56页 |
| ·重组克隆的分析 | 第56-58页 |
| ·重组质粒的提取 | 第56页 |
| ·酶切分析 | 第56-57页 |
| ·PCR分析 | 第57-58页 |
| ·反向Northern Blot杂交 | 第58-60页 |
| ·探针效价的测定 | 第58页 |
| ·杂交结果的分析 | 第58-60页 |
| 第4章 讨论 | 第60-64页 |
| ·关于抑制消减杂交技术 | 第60-61页 |
| ·总RNA的完整性 | 第60页 |
| ·cDNA酶切的效率 | 第60-61页 |
| ·接头连接的高效性 | 第61页 |
| ·关于反向Northern Blot杂交筛选 | 第61-62页 |
| ·杂交筛选方法的探讨 | 第61-62页 |
| ·探针标记的方法 | 第62页 |
| ·后续工作思路 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的论文 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 独创性声明 | 第74页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第74页 |
