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抗草甘膦(EPSPs)基因及柠檬酸合酶(CS)基因对水稻的遗传转化

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表第10-11页
1 文献综述第11-26页
   ·引言第11页
   ·根系有机酸分泌与磷吸收效率的关系第11-16页
     ·植物对缺磷逆境的适应性第11-12页
     ·根系有机酸分泌在植物磷利用方面的作用第12-13页
     ·有机酸活化土壤难溶磷的机制第13-14页
     ·根系分泌物中有机酸的来源第14页
     ·根系分泌物中有机酸的分泌机制第14-15页
     ·增加柠檬酸分泌提高植株对低磷耐性的研究第15-16页
   ·抗除草剂草甘膦基因及应用第16-19页
     ·草甘膦作用机理第16-17页
     ·草甘膦抗性及其转基因研究第17-19页
   ·根癌农杆菌介导的植物基因转化第19-25页
     ·根癌农杆菌的研究历史第20页
     ·根癌农杆菌转化的分子机制第20-21页
     ·农杆菌工程载体系统第21-22页
     ·根癌农杆菌转化水稻的研究进展第22-23页
     ·根癌农杆菌转化的应用前景第23-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
2 不同水稻品种的磷肥试验和转基因受体材料的确定第26-33页
   ·材料和方法第26-27页
     ·供试材料第26页
     ·试验方法和过程第26-27页
     ·植株各项指标测定第27页
     ·数据处理与统计分析第27页
   ·结果与分析第27-31页
     ·双因素方差分析第27-29页
     ·不同的处理间的比较第29-31页
   ·讨论第31-33页
     ·关于合适的筛选浓度第31页
     ·关于筛选指标和时期的确定第31页
     ·关于转基因受体的确定第31-33页
3 抗除草剂草甘膦(EPSPs)基因对水稻的遗传转化第33-49页
   ·材料和方法第33-37页
     ·植物材料第33页
     ·菌株、基因和质粒第33页
     ·主要试剂第33页
     ·植物表达载体的构建第33页
     ·根癌农杆菌介导的水稻转化第33-34页
     ·再生植株的分子检测第34-37页
     ·T_0转基因植株的除草剂抗性检测第37页
     ·转基因植株T_1代除草剂草甘膦抗性分离情况第37页
   ·结果与分析第37-45页
     ·表达载体的构建第37-38页
     ·水稻胚性愈伤对草甘膦敏感性试验第38-40页
     ·转基因再生植株的获得第40页
     ·T_0代植株的PCR检测第40-41页
     ·T_0代转基因阳性植株的Southern分析第41页
     ·T_0转基因植株的除草剂抗性检测第41-42页
     ·转基因植株T_1代除草剂草甘膦抗性分离情况第42-45页
   ·讨论第45-49页
     ·选择合适的筛选浓度是转基因的关键第45-46页
     ·遗传规律分析第46-47页
     ·外源基因在水稻受体中的遗传表现第47页
     ·抗除草剂基因在作物遗传育种上的应用第47-49页
4 柠檬酸合酶(CS)基因对水稻的遗传转化第49-61页
   ·材料和方法第49-53页
     ·植物材料第49页
     ·菌株、基因和质粒第49页
     ·主要试剂第49页
     ·植物表达载体的构建第49-50页
     ·根癌农杆菌介导的水稻转化第50页
     ·再生植株的分子检测第50-52页
     ·T_0代转基因植株成熟种子的抗性发芽实验第52-53页
   ·结果与分析第53-57页
     ·表达载体的构建第53页
     ·转基因再生植株的获得第53页
     ·T_0代植株的二重PCR检测第53-54页
     ·T_0代转基因阳性植株的Southern分析第54-55页
     ·转基因植株的草甘膦抗性检测第55-56页
     ·T_0代单拷贝转基因植株的Northern分析第56-57页
     ·发芽试验及遗传分析第57页
   ·讨论第57-61页
     ·努力提高明恢86胚性愈伤组织形成能力第57-58页
     ·单拷贝率低的可能原因第58页
     ·关于提高外源基因表达的途径第58-59页
     ·农杆菌介导水稻遗传转化的一些体会第59-61页
参考文献第61-68页
附录第68-83页
致谢第83页

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