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禽呼肠孤病毒检测方法的建立及病毒分离鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 引言第15-22页
   ·病原学第15-17页
     ·病毒的形态和结构第15-16页
     ·理化特性第16页
     ·血清学第16页
     ·病毒的培养特性第16-17页
   ·分子生物学特性第17-18页
     ·病毒的基因组第17页
     ·编码的蛋白与功能第17-18页
     ·ARV 的复制第18页
   ·流行病学第18-19页
     ·流行概况第18-19页
     ·致病性第19页
     ·临床症状第19页
   ·诊断方法第19-21页
     ·病毒分离鉴定第20页
     ·血清学诊断方法第20页
     ·分子生物学诊断方法第20-21页
   ·本研究的目的及意义第21-22页
第二章 禽呼肠孤病毒 TaqMan 荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立及应用第22-30页
   ·材料与方法第22-24页
     ·病毒株与实验动物第22页
     ·仪器及试剂第22页
     ·引物、探针设计及合成第22-23页
     ·病毒的繁殖、病毒 RNA 的提取及 cDNA 的合成第23页
     ·阳性质粒标准品的制备第23-24页
     ·Real-time RT-PCR 反应条件的建立与优化第24页
     ·Real-time RT-PCR 标准曲线的建立第24页
     ·特异性实验第24页
     ·敏感性试验第24页
     ·重复性试验第24页
     ·雏鸡人工感染试验第24页
   ·实验结果第24-28页
     ·退火温度的确定第24-25页
     ·Real-time RT-PCR 反应条件的确定第25页
     ·标准曲线的建立第25-26页
     ·特异性实验第26页
     ·敏感性实验第26-27页
     ·重复性实验第27页
     ·ARV 感染后体内病毒分布及病毒复制时间的检测第27-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 禽呼肠孤病毒σC 蛋白的原核表达及间接 ELISA 检测方法的建立第30-44页
   ·材料与方法第30-33页
     ·载体及血清第30页
     ·仪器及试剂第30-31页
     ·σC 蛋白的原核表达及蛋白纯化第31页
     ·σC 重组蛋白间接 ELISA 检测方法的建立第31-32页
     ·判定标准的确定第32-33页
     ·特异性实验第33页
     ·符合性实验第33页
     ·重复性实验第33页
     ·临床样品的检测第33页
   ·实验结果第33-42页
     ·σC 蛋白的原核表达及蛋白纯化第33-35页
     ·间接 EILSA 检测方法工作条件的确定第35-39页
     ·判定标准的确定第39-40页
     ·间接 ELISA 反应程序的确定第40页
     ·特异性实验结果第40页
     ·符合性实验结果第40-41页
     ·重复性实验结果第41-42页
     ·临床样品检测结果第42页
   ·讨论第42-44页
第四章 禽呼肠孤病毒的分离与鉴定第44-53页
   ·材料与方法第44-46页
     ·病毒、细胞、菌种、病料第44页
     ·主要试剂和仪器第44页
     ·病毒的分离与鉴定第44-45页
     ·ARV S1 基因克隆第45-46页
     ·S1 基因序列比较分析第46页
   ·实验结果第46-51页
     ·病毒分离结果第46页
     ·电镜结果第46-47页
     ·血凝实验结果第47页
     ·ARV 特异性 PCR 检测结果第47页
     ·间接免疫荧光结果第47-48页
     ·序列分析结果第48-49页
     ·动物回归实验结果第49-51页
   ·讨论第51-53页
第五章 全文结论第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
作者简历第60页

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