| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-28页 |
| 1．1 纤维堆囊菌的特性及研究现状 | 第12-13页 |
| 1．1．1 纤维堆囊菌的主要特性 | 第12-13页 |
| 1．1．2 纤维堆囊菌的研究现状 | 第13页 |
| 1．2 纤维素降解相关研究 | 第13-15页 |
| 1．2．1 纤维素酶及其研究进展 | 第13-14页 |
| 1．2．2 纤维小体及其研究进展 | 第14-15页 |
| 1．3 半纤维素降解相关研究 | 第15-26页 |
| 1．3．1 木聚糖的概念、结构和生理功能 | 第15-17页 |
| 1．3．2 木聚糖酶的概念及用途 | 第17-18页 |
| 1．3．3 木聚糖酶的产生菌株 | 第18-21页 |
| 1．3．4 木聚糖酶的特性 | 第21-23页 |
| 1．3．5 木聚糖酶合成的调节 | 第23-24页 |
| 1．3．6 木聚糖酶的分子生物学研究现状 | 第24-26页 |
| 1．4 本文研究的内容、目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二部分 纤维堆囊菌纤维素酶的初步研究 | 第28-38页 |
| 2．1 前言 | 第28页 |
| 2．2 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2．2．1 菌株 | 第28页 |
| 2．2．2 培养基 | 第28-29页 |
| 2．2．3 主要仪器及试剂 | 第29-30页 |
| 2．2．4 纤维堆囊菌降解滤纸的平板观察 | 第30页 |
| 2．2．5 纤维素酶粗酶活分析 | 第30-31页 |
| 2．2．6 So9733-1降解滤纸的扫描电镜观察 | 第31页 |
| 2．2．7 So9733-1降解木聚糖刚果红显色观察 | 第31页 |
| 2．2．8 So9733-1休止细胞降解不同多聚糖的TLC分析 | 第31-32页 |
| 2．3 结果与讨论 | 第32-37页 |
| 2．3．1 纤维堆囊菌降解滤纸的平板观察结果 | 第32-33页 |
| 2．3．2 纤维堆囊菌粗酶液不同底物下的酶活性 | 第33-34页 |
| 2．3．3 So9733-1的降解滤纸扫描电镜观察结果 | 第34-35页 |
| 2．3．4 So9733-1木聚糖底物平板刚果红显色观察结果 | 第35-36页 |
| 2．3．5 So9733-1休止细胞降解不同糖苷键组成的多聚糖 | 第36-37页 |
| 2．4 小结 | 第37-38页 |
| 第三部分 So9733-1纤维素降解酶相关基因片段的PCR筛选与分析 | 第38-49页 |
| 3．1 前言 | 第38页 |
| 3．2 材料与方法 | 第38-44页 |
| 3．2．1 培养基 | 第38页 |
| 3．2．2 菌株及质粒 | 第38-39页 |
| 3．2．3 主要仪器与试剂 | 第39-40页 |
| 3．2．4 纤维堆囊菌基因组DNA的提取 | 第40页 |
| 3．2．5 PCR扩增筛选纤维素降解酶相关基因片段 | 第40-41页 |
| 3．2．6 PCR产物回收 | 第41-42页 |
| 3．2．7 PCR片段的TA连接与转化 | 第42-43页 |
| 3．2．8 PCR片段序列分析 | 第43页 |
| 3．2．9 纤维素降解酶相关基因普遍存在性的检测及序列分析 | 第43-44页 |
| 3．3 结果与讨论 | 第44-48页 |
| 3．3．1 木聚糖酶基因片段的获得 | 第44-45页 |
| 3．3．2 木聚糖酶基因普遍性验证及序列分析 | 第45-48页 |
| 3．4 小结 | 第48-49页 |
| 第四部分 纤维堆囊菌So9733-1木聚糖酶基因的克隆和表征 | 第49-67页 |
| 4．1 前言 | 第49页 |
| 4．2 材料与方法 | 第49-57页 |
| 4．2．1 培养基 | 第49页 |
| 4．2．2 菌株及质粒 | 第49-50页 |
| 4．2．3 工具酶 | 第50页 |
| 4．2．4 主要仪器与试剂 | 第50页 |
| 4．2．5 So9733-1基因组DNA限制性内切酶酶解 | 第50-51页 |
| 4．2．6 杂交探针的标记及效率的快速分析 | 第51-52页 |
| 4．2．7 酶切基因组DNA的Southern杂交 | 第52-55页 |
| 4．2．8 木聚糖酶基因筛选文库的构建 | 第55页 |
| 4．2．9 斑点杂交法筛选木聚糖酶基因文库 | 第55-56页 |
| 4．2．10 木聚糖酶基因阳性克隆的序列测定 | 第56页 |
| 4．2．11 木聚糖酶基因序列的生物信息学表征分析 | 第56-57页 |
| 4．3 结果与讨论 | 第57-66页 |
| 4．3．1 So9733-1木聚糖酶基因的杂交筛选 | 第57-59页 |
| 4．3．2 So9733-1木聚糖酶基因序列及分析 | 第59-66页 |
| 4． 4 小结 | 第66-67页 |
| 第五部分 So9733-1木聚糖酶基因的异源表达及酶学性质分析 | 第67-80页 |
| 5．1 前言 | 第67页 |
| 5．2 材料与方法 | 第67-74页 |
| 5．2．1 菌株和质粒 | 第67页 |
| 5．2．2 主要仪器及试剂 | 第67-68页 |
| 5．2．3 木聚糖酶基因的异源表达 | 第68-70页 |
| 5．2．4 木聚糖酶包涵体蛋白的提取、纯化及复性 | 第70-72页 |
| 5．2．5 复性木聚糖酶蛋白的部分酶学性质测定 | 第72-74页 |
| 5．3 实验结果与讨论 | 第74-79页 |
| 5．3．1 木聚糖酶基因的异源表达及包涵体的提取纯化 | 第74-76页 |
| 5．3．2 BL-pET-xynB菌株表达木聚糖酶的部分酶学性质 | 第76-79页 |
| 5．4 小结 | 第79-80页 |
| 总结 | 第80-81页 |
| 附录 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第91页 |
