| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| ·GSTs家族的分类与命名 | 第8-9页 |
| ·分类 | 第8-9页 |
| ·命名 | 第9页 |
| ·GSTs家族的结构特点 | 第9-11页 |
| ·GSTs的表达与调控 | 第11-13页 |
| ·GSTs家族的功能 | 第13-16页 |
| ·GSTs的解毒作用 | 第13-14页 |
| ·GSTs的抗氧化作用 | 第14-15页 |
| ·GSTs的其它功能 | 第15-16页 |
| ·PHI类GSTs简介 | 第16-17页 |
| ·研究进展与展望 | 第17-18页 |
| 2 毛白杨PHI类GST基因的分子克隆及序列分析 | 第18-33页 |
| ·材料与方法 | 第18-23页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·克隆引物的设计 | 第18-19页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第19页 |
| ·cDNA的制备 | 第19-21页 |
| ·总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·RNA的DNase处理 | 第20页 |
| ·cDNA的合成 | 第20-21页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第21页 |
| ·PCR产物割胶回收 | 第21-22页 |
| ·克隆载体的构建和测序 | 第22-23页 |
| ·连接 | 第22页 |
| ·转化 | 第22-23页 |
| ·菌落PCR检测 | 第23页 |
| ·蛋白质结构域分析 | 第23页 |
| ·系统发生关系分析 | 第23页 |
| ·序列相似性分析 | 第23页 |
| ·毛白杨GSTF蛋白的结构模拟 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-32页 |
| ·毛白杨基因组DNA与总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·毛白杨基因组DNA的提取 | 第24页 |
| ·毛白杨总RNA的提取 | 第24页 |
| ·目的基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·基因组目的基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·cDNA目的基因的扩增 | 第25页 |
| ·克隆载体的构建与鉴定 | 第25-27页 |
| ·目的基因的测序结果及序列分析 | 第27-28页 |
| ·毛白杨Phi类GST蛋白质结构分析 | 第28页 |
| ·蛋白质结构模拟 | 第28-29页 |
| ·多序列比对分析 | 第29-31页 |
| ·系统进化分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 3 毛白杨PHI类GST基因的表达模式分析 | 第33-37页 |
| ·材料与方法 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·PCR引物的设计 | 第33页 |
| ·各组织总RNA的提取 | 第33页 |
| ·RNA的DNase处理 | 第33页 |
| ·cDNA的合成 | 第33页 |
| ·PCR反应 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-36页 |
| ·毛白杨总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·毛白杨cDNA的检测 | 第35页 |
| ·PCR结果检测 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 4 毛白杨PHI类GST蛋白质的表达、纯化及生化性质研究 | 第37-47页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·表达引物的设计 | 第37页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第37页 |
| ·PCR产物割胶回收 | 第37页 |
| ·克隆载体的构建和测序 | 第37页 |
| ·表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·质粒提取 | 第37-38页 |
| ·双酶切反应 | 第38页 |
| ·连接 | 第38-39页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·转化 | 第39页 |
| ·菌落PCR检测 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的原核表达 | 第40页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第40页 |
| ·蛋白质酶学活性测定 | 第40-41页 |
| ·底物活性测定 | 第40-41页 |
| ·酶促动力学分析 | 第41页 |
| ·热力学稳定性分析 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·克隆测序 | 第41-42页 |
| ·表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·质粒的提取及酶切 | 第42页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白的体外诱导表达和纯化 | 第43-44页 |
| ·蛋白活性的测定 | 第44-46页 |
| ·底物活性的测定 | 第44-45页 |
| ·酶促动力学分析 | 第45页 |
| ·热力学稳定性分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 5 总结 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 个人简介 | 第54-55页 |
| 导师简介 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |