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应力对植物生长行为的影响及其相关基因的表达

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-17页
1 绪  论第17-27页
   ·引 言第17页
   ·应力刺激对植物形态建成的作用第17-19页
   ·应力刺激对植物细胞生长行为的影响第19-21页
     ·应力刺激对单个细胞生长的影响第19-20页
     ·应力刺激对植物细胞内Ca+的影响第20-21页
   ·应力刺激下植物基因的表达变化第21-22页
   ·本文的主要工作第22-23页
     ·建立应力加载的实验装置第22页
     ·应力刺激对植物苗的作用第22页
     ·应力刺激对植物愈伤组织的作用第22-23页
     ·应力刺激对植物细胞的作用第23页
     ·应力刺激下植物基因的表达第23页
   ·本文的研究意义第23-24页
   ·课题的研究思路与构想第24-25页
   ·课题的创新之处第25-27页
2 实验材料的培养及声波加载实验模型的建立第27-31页
   ·引 言第27页
   ·实验材料的培养第27-28页
     ·取 材第27页
     ·培养基的配制第27-28页
     ·菊花苗的培养第28页
     ·菊花愈伤组织的培养第28页
   ·加载方式的选择第28-31页
     ·实验加载装置第28-29页
     ·实验材料处理第29-31页
3 应力刺激对植物苗的作用第31-45页
   ·引 言第31-32页
   ·对苗生长影响的测定第32-34页
     ·鲜重的测定第32页
     ·光合速率的测定第32页
     ·呼吸速率的测定第32页
     ·SOD活性的测定第32-33页
     ·CAT活性的测定第33-34页
     ·POD活性的测定第34页
     ·抑制剂的处理第34页
   ·对根生长影响的测定第34-36页
     ·可溶性糖含量的测定第34-35页
     ·可溶性蛋白含量的测定第35-36页
     ·根系活力的测定第36页
   ·实验结果第36-41页
     ·声波刺激对菊花苗生长的影响第36-37页
     ·声波对菊花苗光合速率和呼吸速率的影响第37-38页
     ·声波刺激对菊花CAT、POD和SOD活性的影响第38-39页
     ·抑制剂CHM对POD和CAT活性的影响第39页
     ·声波刺激对菊花根系中可溶性糖含量的影响第39-40页
     ·声波刺激对菊花根系中可溶性蛋白含量的影响第40页
     ·声波刺激对菊花根系参数的影响第40-41页
   ·讨 论第41-45页
     ·声波刺激对苗生长的影响第41-42页
     ·声波刺激对根系生长的影响第42-43页
     ·声波刺激对菊花根系合成及分解代谢能力的影响第43-45页
4 应力刺激对愈伤组织的作用第45-55页
   ·引 言第45-46页
   ·材料和方法第46-47页
     ·实验材料第46页
     ·愈伤组织增长率的测定第46页
     ·可溶性糖含量的测定第46页
     ·可溶性蛋白质含量的测定第46页
     ·内源IAA和ABA的测定第46-47页
   ·实验结果第47-51页
     ·一定强度下不同频率的声波对菊花愈伤组织生长的影响第47页
     ·一定频率下不同强度的声波刺激对愈伤组织生长的影响第47-48页
     ·声波刺激对愈伤组织可溶性蛋白与可溶性糖含量的影响第48-49页
     ·声波刺激后IAA含量的变化第49-50页
     ·声波刺激后ABA含量的变化第50页
     ·内源IAA和ABA比值的关系第50-51页
   ·讨 论第51-55页
     ·应力对菊花愈伤组织生长的影响第51-52页
     ·声波对愈伤组织内源激素的影响第52-55页
5 声波刺激对菊花细胞质膜的影响第55-67页
   ·引 言第55-56页
   ·实验材料与方法第56-58页
     ·质膜的分离与纯化第56-57页
     ·DPH(二苯己三烯)荧光偏振测定第57页
     ·Merocyanine540(MC540)荧光测定第57页
     ·质膜蛋白的红外分析测定第57页
     ·H+-ATPase活性的测定第57-58页
     ·可溶性蛋白质的提取第58页
     ·可溶性蛋白含量的测定第58页
     ·主要试剂与仪器第58页
   ·实验结果第58-63页
     ·声波刺激对质膜物理状态的影响第58-59页
     ·声波刺激对质膜蛋白二级结构的影响第59-61页
     ·声波刺激对分离质膜的影响第61页
     ·声波刺激对质膜H+-ATPase活性的影响第61页
     ·H+-ATPase在声波刺激下的响应及调控模式第61-63页
   ·讨 论第63-67页
     ·声波刺激对质膜膜脂物理状态变化的影响第63-64页
     ·声波刺激对菊花细胞质膜蛋白二级结构的影响第64-65页
     ·声波刺激对细胞质膜H+-ATPase活性的影响第65-67页
6 声波刺激下植物基因的表达第67-87页
   ·引 言第67-68页
   ·声波刺激对DNA和RNA含量的影响第68-71页
     ·DNA含量的测定第68-69页
     ·总RNA的提取第69-70页
     ·RNA质量和纯度的测定第70页
     ·RNA完整性鉴定第70-71页
   ·声波刺激菊花差异表达基因的筛选第71-74页
     ·模板的选择第71页
     ·引物的设计第71页
     ·反转录RNA第71-72页
     ·PCR扩增第72页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第72-73页
     ·银 染第73页
     ·分离差异表达的基因片段第73-74页
     ·回收差异条带第74页
     ·重扩增第74页
     ·重扩增产物的电泳第74页
     ·重扩增产物的回收和纯化第74页
   ·Northern 点杂交第74-76页
     ·杂交膜的制备第74-75页
     ·探针标记第75页
     ·预杂交和杂交第75页
     ·洗 膜第75页
     ·胶片曝光第75-76页
   ·实验结果第76-83页
     ·声波刺激对菊花DNA含量的影响第76页
     ·声波刺激组和对照组菊花总RNA质量第76-77页
     ·声波刺激组和对照组菊花总RNA纯度第77-78页
     ·声波刺激组和对照组菊花总RNA完整性第78页
     ·引物的筛选第78-80页
     ·分离差异条带第80-81页
     ·回收差异条带及重扩增第81-82页
     ·Northern点杂交第82-83页
   ·讨 论第83-87页
7 结 论第87-91页
   ·全文的主要结论第87-88页
     ·声波刺激对苗的作用第87页
     ·声波刺激对植物愈伤组织的作用第87-88页
     ·声波刺激对植物细胞的作用第88页
     ·声波刺激下植物基因的表达第88页
   ·应力对植物生长行为影响的可能作用机理第88-90页
     ·启动了植物的生理防御系统第88-89页
     ·通过物理作用使植物细胞的生长行为产生变化第89-90页
     ·引起基因的特异性表达第90页
   ·后续工作建议第90-91页
致    谢第91-93页
参考文献第93-101页
附录1 作者在攻读博士学位期间发表的论文第101-103页
附录2 作者在攻读博士学位期间参加科研项目及获奖情况第103-104页
附录3 英汉对照表第104-105页

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