第 1 章 综述 | 第1-23页 |
·绿豆生物活性物质与生理功能研究进展 | 第9-13页 |
·绿豆组成成分 | 第9页 |
·绿豆生物活性物质 | 第9-11页 |
·抗真菌蛋白 | 第10页 |
·蛋白水解酶 | 第10页 |
·苯丙氨酸解氨酶 | 第10-11页 |
·超氧物歧化酶(SOD) | 第11页 |
·抗氧化活性成分 | 第11页 |
·其它 | 第11页 |
·绿豆生理功能研究进展 | 第11-13页 |
·抑菌作用 | 第11页 |
·抗肿瘤作用 | 第11页 |
·抗氧化作用 | 第11-12页 |
·提高免疫力作用 | 第12页 |
·降血脂作用 | 第12页 |
·解毒作用 | 第12页 |
·其他 | 第12-13页 |
·植物抗菌肽研究进展 | 第13-17页 |
·植物抗菌肽的研究意义 | 第13页 |
·植物抗菌肽的种类 | 第13-16页 |
·脂转移蛋白(Lipid transfer proteins,LTPs) | 第14页 |
·硫堇(Thionins) | 第14-15页 |
·植物防卫素(Plant defensins) | 第15页 |
·hevein 类和 knottin 类抗菌肽 | 第15页 |
·含4个Cys的抗菌肽 | 第15-16页 |
·植物抗菌肽抑菌机理 | 第16-17页 |
·植物抗菌肽基因工程 | 第17页 |
·植物非特异性脂转移蛋白研究进展 | 第17-20页 |
·植物脂转移蛋白的研究现状 | 第17页 |
·植物nsLTPs的生物性质 | 第17-19页 |
·植物nsLTPs的生化特性 | 第17-18页 |
·脂转移活性 | 第18-19页 |
·抑菌活性 | 第19页 |
·非特异性脂转移蛋白的结构 | 第19-20页 |
·蛋白质结晶 | 第20-21页 |
·本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
第 2 章 材料与方法 | 第23-39页 |
·绿豆中脂转移蛋白(Lipid transfer protein)的分离纯化 | 第23-26页 |
·绿豆汁的初分离--硫酸铵沉降 | 第23-24页 |
·盐析原理 | 第23页 |
·材料与仪器 | 第23页 |
·实验步骤 | 第23-24页 |
·离子交换色谱法(IEC) | 第24-26页 |
·原理 | 第24页 |
·常压色谱分离 | 第24-25页 |
·高效离子交换液相色谱分离 | 第25-26页 |
·脂转移蛋白组分分析方法 | 第26-33页 |
·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第26-29页 |
·蛋白质含量测定-Folin-酚法 | 第29-31页 |
·脂转移蛋白 N-末端序列测定及序列分析 | 第31-32页 |
·N-末端氨基酸序列测定原理 | 第31页 |
·仪器设备与材料 | 第31-32页 |
·N-末端序列测定 | 第32页 |
·序列分析 | 第32页 |
·基质辅助激光解吸附/离子化飞行时间质谱分析 | 第32-33页 |
·MALDI-TOF 技术原理 | 第32页 |
·仪器与设备 | 第32页 |
·质谱分析 | 第32-33页 |
·脂转移蛋白抑菌活性测定 | 第33-35页 |
·原理 | 第33页 |
· 仪器设备与材料 | 第33页 |
·实验部分 | 第33-35页 |
·抗真菌活性测定 | 第33-34页 |
·抗细菌活性测定 | 第34页 |
·细菌形态的观测 | 第34页 |
·脂转移蛋白抑菌效果分析 | 第34-35页 |
·脂转移蛋白脂结合活性的测定 | 第35-36页 |
·原理 | 第35页 |
·仪器设备与材料 | 第35页 |
·实验步骤 | 第35-36页 |
·脂转移蛋白质的结晶 | 第36-38页 |
·结晶方法原理 | 第36页 |
·材料与仪器 | 第36-37页 |
·实验步骤 | 第37-38页 |
·本课题的实验流程 | 第38-39页 |
第 3 章 结果与讨论 | 第39-63页 |
·非特异性脂转移蛋白(nsLTP)的分离纯化 | 第39-42页 |
·绿豆汁的初步分离--硫酸铵沉淀 | 第39页 |
·CM-Sephadex 弱阳离子交换色谱初步纯化 | 第39-40页 |
·P1 组分的高效液相色谱纯化 | 第40-42页 |
·nsLTP 的表征 | 第42-54页 |
·纯度鉴定和分子量标定 | 第42-44页 |
·SDS-PAGE 电泳分析 | 第42-43页 |
·质谱鉴定 | 第43-44页 |
·nsLTP 的 N-末端序列测定与分析 | 第44-47页 |
·nsLTP 抗真菌活性 | 第47-50页 |
·nsLTP 抗细菌活性 | 第50-53页 |
·nsLTP 的脂结合活性 | 第53-54页 |
·nsLTP 对金黄色葡萄球菌抑菌机理的初步分析 | 第54-63页 |
第4章 总结与展望 | 第63-65页 |
·总结 | 第63-64页 |
·展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
附录 1 vr-nsLTP1 在 NCBI 中检索结果 | 第70-72页 |
附录2 98种结晶条件 | 第72-76页 |
致谢 | 第76-77页 |