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绿豆中抗菌肽的分离纯化与表征及其晶体培养

第 1 章 综述第1-23页
   ·绿豆生物活性物质与生理功能研究进展第9-13页
     ·绿豆组成成分第9页
     ·绿豆生物活性物质第9-11页
       ·抗真菌蛋白第10页
       ·蛋白水解酶第10页
       ·苯丙氨酸解氨酶第10-11页
       ·超氧物歧化酶(SOD)第11页
       ·抗氧化活性成分第11页
       ·其它第11页
     ·绿豆生理功能研究进展第11-13页
       ·抑菌作用第11页
       ·抗肿瘤作用第11页
       ·抗氧化作用第11-12页
       ·提高免疫力作用第12页
       ·降血脂作用第12页
       ·解毒作用第12页
       ·其他第12-13页
   ·植物抗菌肽研究进展第13-17页
     ·植物抗菌肽的研究意义第13页
     ·植物抗菌肽的种类第13-16页
       ·脂转移蛋白(Lipid transfer proteins,LTPs)第14页
       ·硫堇(Thionins)第14-15页
       ·植物防卫素(Plant defensins)第15页
       ·hevein 类和 knottin 类抗菌肽第15页
       ·含4个Cys的抗菌肽第15-16页
     ·植物抗菌肽抑菌机理第16-17页
     ·植物抗菌肽基因工程第17页
   ·植物非特异性脂转移蛋白研究进展第17-20页
     ·植物脂转移蛋白的研究现状   第17页
     ·植物nsLTPs的生物性质第17-19页
       ·植物nsLTPs的生化特性第17-18页
       ·脂转移活性第18-19页
       ·抑菌活性第19页
     ·非特异性脂转移蛋白的结构第19-20页
   ·蛋白质结晶第20-21页
   ·本研究的目的与意义第21-23页
第 2 章 材料与方法第23-39页
   ·绿豆中脂转移蛋白(Lipid transfer protein)的分离纯化第23-26页
     ·绿豆汁的初分离--硫酸铵沉降第23-24页
       ·盐析原理第23页
       ·材料与仪器第23页
       ·实验步骤第23-24页
     ·离子交换色谱法(IEC)第24-26页
       ·原理第24页
       ·常压色谱分离第24-25页
       ·高效离子交换液相色谱分离第25-26页
   ·脂转移蛋白组分分析方法第26-33页
     ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第26-29页
     ·蛋白质含量测定-Folin-酚法第29-31页
     ·脂转移蛋白 N-末端序列测定及序列分析第31-32页
       ·N-末端氨基酸序列测定原理第31页
       ·仪器设备与材料第31-32页
       ·N-末端序列测定第32页
       ·序列分析第32页
     ·基质辅助激光解吸附/离子化飞行时间质谱分析第32-33页
       ·MALDI-TOF 技术原理第32页
       ·仪器与设备第32页
       ·质谱分析第32-33页
   ·脂转移蛋白抑菌活性测定第33-35页
     ·原理第33页
     · 仪器设备与材料第33页
     ·实验部分第33-35页
       ·抗真菌活性测定第33-34页
       ·抗细菌活性测定第34页
       ·细菌形态的观测第34页
       ·脂转移蛋白抑菌效果分析第34-35页
   ·脂转移蛋白脂结合活性的测定第35-36页
     ·原理第35页
     ·仪器设备与材料第35页
     ·实验步骤第35-36页
   ·脂转移蛋白质的结晶第36-38页
     ·结晶方法原理第36页
     ·材料与仪器第36-37页
     ·实验步骤第37-38页
   ·本课题的实验流程第38-39页
第 3 章 结果与讨论第39-63页
   ·非特异性脂转移蛋白(nsLTP)的分离纯化第39-42页
     ·绿豆汁的初步分离--硫酸铵沉淀第39页
     ·CM-Sephadex 弱阳离子交换色谱初步纯化第39-40页
     ·P1 组分的高效液相色谱纯化第40-42页
   ·nsLTP 的表征第42-54页
     ·纯度鉴定和分子量标定第42-44页
       ·SDS-PAGE 电泳分析第42-43页
       ·质谱鉴定第43-44页
     ·nsLTP 的 N-末端序列测定与分析第44-47页
     ·nsLTP 抗真菌活性第47-50页
     ·nsLTP 抗细菌活性第50-53页
     ·nsLTP 的脂结合活性第53-54页
   ·nsLTP 对金黄色葡萄球菌抑菌机理的初步分析第54-63页
第4章 总结与展望第63-65页
   ·总结第63-64页
   ·展望第64-65页
参考文献第65-70页
附录 1 vr-nsLTP1 在 NCBI 中检索结果第70-72页
附录2 98种结晶条件第72-76页
致谢第76-77页

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