中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
1 引言 | 第7-19页 |
·本研究的立题依据 | 第7-8页 |
·国内外研究进展 | 第8-14页 |
·增强的UV对植物生长及形态结构的影响 | 第8-9页 |
·细胞膜及其氧化系统的影响 | 第9页 |
·UV对植物蛋白质代谢的影响 | 第9-10页 |
·UV对植物体内酶系统的影响 | 第10-11页 |
·UV辐射对光合系统的影响 | 第11-12页 |
·增强的UV辐射对基因表达的影响 | 第12-13页 |
·UV辐射对植物防御反应的诱导 | 第13-14页 |
·茄科植物在UV等诱导作用下倍半萜植保素代谢机制研究进展 | 第14-16页 |
·UV诱导作用下植物防御反应的信号转导过程 | 第14页 |
·倍半萜次生代谢物生物合成途径生化调控 | 第14-15页 |
·倍半萜次生代谢物生物合成代谢频道调控的分子机制 | 第15-16页 |
·cDNA文库的构建方法研究进展 | 第16-19页 |
·Oligo-capping方法构建cDNA文库 | 第16-17页 |
·SMART方法构建cDNA文库 | 第17-18页 |
·其它有效方法 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-33页 |
·实验材料 | 第19页 |
·供试材料 | 第19页 |
·主要试剂及酶 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-33页 |
·材料准备 | 第20页 |
·紫外线处理 | 第20页 |
·总RNA提取 | 第20-22页 |
·RNA质量检测 | 第22-23页 |
·mRNA的纯化分离 | 第23页 |
·cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
·cDNA Amplication by LD PCR | 第24页 |
·蛋白酶消化 | 第24-25页 |
·Sfi I Digestion | 第25-26页 |
·用CHROMA SPIN~(TM)-400进行cDNA大小片段分级 | 第26-27页 |
·ds cDNA与λ TriplEx2 Vectot的连接 | 第27-28页 |
·文库包装 | 第28页 |
·菌株培养 | 第28-29页 |
·未扩增文库滴度测定和重组克隆百分比的确定 | 第29-30页 |
·文库的扩增 | 第30-31页 |
·扩增后文库的滴定 | 第31-33页 |
3 结果与分析 | 第33-38页 |
·辣椒叶片总RNA提取 | 第33-34页 |
·不同提取方法总RNA纯度比较 | 第33页 |
·不同提取方法总RNA的质量比较 | 第33-34页 |
·ds cDNA的合成 | 第34-35页 |
·ds cDNA的分级 | 第35-36页 |
·经UV辐射处理后的辣椒叶片cDNA文库滴度测定 | 第36页 |
·噬菌体蓝白斑筛选 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
·RNA的提取方法 | 第38-39页 |
·RNA提取过程中应该注意的问题 | 第39页 |
·cDNA的合成及LD-PCR的应用 | 第39-40页 |
·SMART技术与ZAP-cDNA文库构建的比较 | 第40-41页 |
·连接效率 | 第41-42页 |
附录1 英文缩略词和英汉对照 | 第42-43页 |
附录2 所用试剂和缓冲液的配置 | 第43-44页 |
附录3 所用培养基配方 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
致谢 | 第51页 |