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辣椒叶片cDNA文库构建研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
1 引言第7-19页
   ·本研究的立题依据第7-8页
   ·国内外研究进展第8-14页
     ·增强的UV对植物生长及形态结构的影响第8-9页
     ·细胞膜及其氧化系统的影响第9页
     ·UV对植物蛋白质代谢的影响第9-10页
     ·UV对植物体内酶系统的影响第10-11页
     ·UV辐射对光合系统的影响第11-12页
     ·增强的UV辐射对基因表达的影响第12-13页
     ·UV辐射对植物防御反应的诱导第13-14页
   ·茄科植物在UV等诱导作用下倍半萜植保素代谢机制研究进展第14-16页
     ·UV诱导作用下植物防御反应的信号转导过程第14页
     ·倍半萜次生代谢物生物合成途径生化调控第14-15页
     ·倍半萜次生代谢物生物合成代谢频道调控的分子机制第15-16页
   ·cDNA文库的构建方法研究进展第16-19页
     ·Oligo-capping方法构建cDNA文库第16-17页
     ·SMART方法构建cDNA文库第17-18页
     ·其它有效方法第18-19页
2 材料与方法第19-33页
   ·实验材料第19页
     ·供试材料第19页
     ·主要试剂及酶第19页
     ·主要仪器设备第19页
   ·实验方法第19-33页
     ·材料准备第20页
     ·紫外线处理第20页
     ·总RNA提取第20-22页
     ·RNA质量检测第22-23页
     ·mRNA的纯化分离第23页
     ·cDNA第一链的合成第23-24页
     ·cDNA Amplication by LD PCR第24页
     ·蛋白酶消化第24-25页
     ·Sfi I Digestion第25-26页
     ·用CHROMA SPIN~(TM)-400进行cDNA大小片段分级第26-27页
     ·ds cDNA与λ TriplEx2 Vectot的连接第27-28页
     ·文库包装第28页
     ·菌株培养第28-29页
     ·未扩增文库滴度测定和重组克隆百分比的确定第29-30页
     ·文库的扩增第30-31页
     ·扩增后文库的滴定第31-33页
3 结果与分析第33-38页
   ·辣椒叶片总RNA提取第33-34页
     ·不同提取方法总RNA纯度比较第33页
     ·不同提取方法总RNA的质量比较第33-34页
   ·ds cDNA的合成第34-35页
   ·ds cDNA的分级第35-36页
   ·经UV辐射处理后的辣椒叶片cDNA文库滴度测定第36页
   ·噬菌体蓝白斑筛选第36-38页
4 讨论第38-42页
   ·RNA的提取方法第38-39页
   ·RNA提取过程中应该注意的问题第39页
   ·cDNA的合成及LD-PCR的应用第39-40页
   ·SMART技术与ZAP-cDNA文库构建的比较第40-41页
   ·连接效率第41-42页
附录1 英文缩略词和英汉对照第42-43页
附录2 所用试剂和缓冲液的配置第43-44页
附录3 所用培养基配方第44-45页
参考文献第45-51页
致谢第51页

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