| 摘要 | 第1-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| ·林木转基因的研究历史 | 第10页 |
| ·林木基因工程研究 | 第10-19页 |
| ·抗虫基因工程研究 | 第11-14页 |
| ·苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因(Bt基因) | 第11-12页 |
| ·蛋白酶抑制剂(PI)基因 | 第12-13页 |
| ·其它 | 第13-14页 |
| ·抗病基因工程研究 | 第14-15页 |
| ·抗病毒基因工程研究 | 第14页 |
| ·抗真菌、细菌病害基因工程研究 | 第14-15页 |
| ·抗除草剂基因工程研究 | 第15-16页 |
| ·抗逆基因工程研究 | 第16-17页 |
| ·生殖发育调控基因工程研究 | 第17-18页 |
| ·材性改良基因工程研究 | 第18-19页 |
| ·林木遗传转化方法 | 第19-24页 |
| ·直接转化法 | 第19-20页 |
| ·间接转化法 | 第20-24页 |
| ·农杆菌和植物转化 | 第20页 |
| ·农杆菌介导遗传转化的基本原理 | 第20-21页 |
| ·农杆菌介导的载体系统 | 第21页 |
| ·农杆菌转化林木的方法 | 第21-22页 |
| ·影响根癌农杆菌介导转化林木的因素 | 第22-24页 |
| ·生殖细胞转化法 | 第24页 |
| ·转基因植物的鉴定 | 第24-25页 |
| 2 引言 | 第25-26页 |
| 3 材料与方法 | 第26-36页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·试剂及主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·泡桐无菌苗的培养 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·转基因工程菌的制备 | 第27-30页 |
| ·细菌的培养和菌种的保存 | 第27页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第27-28页 |
| ·表达载体质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·农杆菌感受态的制备和转化 | 第28-29页 |
| ·工程农杆菌的鉴定 | 第29-30页 |
| ·根癌农杆菌介导兰考泡桐转化体系的建立 | 第30-32页 |
| ·外植体对卡那霉素(Km)的敏感性 | 第30页 |
| ·外植体对头孢霉素(Cef)和羧苄青霉素(Carb)的敏感性 | 第30页 |
| ·脱菌时Cef浓度的确定 | 第30-31页 |
| ·根癌农杆菌的培养 | 第31页 |
| ·共转化 | 第31页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第31-32页 |
| ·侵染时间和菌液浓度对转化的影响 | 第32页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第32页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)对转化的影响 | 第32页 |
| ·转化效率评价指标 | 第32页 |
| ·转化植株的检测 | 第32-36页 |
| ·转化植株的组织化学分析 | 第32-33页 |
| ·泡桐总DNA提取方法的筛选 | 第33-35页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第35-36页 |
| 4 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第36页 |
| ·工程农杆菌的鉴定 | 第36-37页 |
| ·农杆菌介导兰考泡桐转化体系的建立 | 第37-43页 |
| ·外植体对Km的敏感性 | 第37-38页 |
| ·外植体对Cef和Carb的敏感性 | 第38-39页 |
| ·Cef最适浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·预培养对兰考泡桐转化效率的影响 | 第40-41页 |
| ·时间和菌液浓度对兰考泡桐转化效率的影响 | 第41-42页 |
| ·共培养时间对兰考泡桐转化效率的影响 | 第42页 |
| ·乙酰丁香酮对兰考泡桐转化效率的影响 | 第42-43页 |
| ·转化体系的建立 | 第43页 |
| ·转化植株的鉴定 | 第43-46页 |
| ·转化植株的组织化学鉴定及GUS转化频率 | 第43-44页 |
| ·泡桐DNA提取方法的筛选 | 第44-45页 |
| ·DNA的纯度及产量测定 | 第44页 |
| ·电泳测定样品DNA最大分子量 | 第44页 |
| ·样品DNA的限制性酶切实验 | 第44页 |
| ·RAPD反应体系建立 | 第44-45页 |
| ·转反义LFY基因兰考泡桐的PCR扩增 | 第45-46页 |
| 5 结论与讨论 | 第46-50页 |
| ·结论 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 英文摘要 | 第55-56页 |