| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 第一部分 低氧及低氧预处理后淋巴细胞[Ca~(2+)]i变化与淋巴细胞增殖活化的关系 | 第12-23页 |
| 一、 实验材料 | 第12-13页 |
| 1 主要仪器 | 第12页 |
| 2 主要试剂 | 第12-13页 |
| 3 实验取材 | 第13页 |
| 二、 实验方法 | 第13-16页 |
| 1 淋巴细胞分离培养 | 第13页 |
| 2 实验分组 | 第13页 |
| 3 Fura-2／AM荧光分光光度法检测[Ca~(2+)]i | 第13-14页 |
| 4 ELISA法检测IgG | 第14页 |
| 5 ELISA法检测IL-2 | 第14-15页 |
| 6 MTT法检测淋巴细胞增殖率 | 第15-16页 |
| 7 统计分析 | 第16页 |
| 三、 实验结果 | 第16-19页 |
| 1 细胞内Ca~(2+)浓度检测结果 | 第16-17页 |
| 2 IgG分泌量检测结果 | 第17页 |
| 3 IL-2分泌量检测结果 | 第17-18页 |
| 4 淋巴细胞增殖率检测结果 | 第18-19页 |
| 四、 讨论 | 第19-22页 |
| 小节 | 第22-23页 |
| 第二部分 低氧对Mφ前炎症因子分泌的影响 | 第23-37页 |
| 一、 实验材料 | 第23-24页 |
| 1 主要仪器 | 第23页 |
| 2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3 实验取材 | 第24页 |
| 二、 实验方法 | 第24-27页 |
| 1 Mφ分离培养 | 第24页 |
| 2 非特异性酯酶染色法鉴定Mφ | 第24页 |
| 3 实验分组 | 第24-25页 |
| 4 ELISA法检测TNF-α | 第25页 |
| 5 ELISA法检测IL-6 | 第25页 |
| 6 Mφ总RNA分离与提取 | 第25-26页 |
| 7 RNA浓度分析和纯度鉴定 | 第26页 |
| 8 甲醛变性电泳鉴定RNA完整性 | 第26页 |
| 9 RT-PCR检测TNF-α mRNA和IL-6 mRNA表达水平 | 第26-27页 |
| 10 统计分析 | 第27页 |
| 三、 实验结果 | 第27-35页 |
| 1 Mφ培养 | 第28页 |
| 2 Mφ鉴定结果 | 第28-29页 |
| 3 不同氧浓度条件下TNF-α和IL-6的分泌量 | 第29页 |
| 4 不同低氧时间条件下TNF-α和IL-6的分泌量 | 第29-30页 |
| 5 RNA纯度鉴定的结果 | 第30页 |
| 6 RNA完整性鉴定的结果 | 第30-31页 |
| 7 不同氧浓度条件下TNF-α mRNA和IL-6.mRNA的表达量 | 第31-33页 |
| 8 不同低氧时间条件下TNF-α mRNA和IL-6.mRNA的表达量 | 第33-35页 |
| 四、 讨论 | 第35-36页 |
| 小节 | 第36-37页 |
| 第三部分 低氧后Mφ前炎症因子分泌增加的机制-NF-κB信号转导通路的激活 | 第37-51页 |
| 一、 实验材料 | 第37-38页 |
| 1 主要仪器 | 第37页 |
| 2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3 实验取材 | 第38页 |
| 二、 实验方法 | 第38-43页 |
| 1 Mφ分离培养 | 第38页 |
| 2 实验分组及检测指标 | 第38-39页 |
| 3 荧光分光光度法检测细胞内ROS水平 | 第39页 |
| 4 胞浆蛋白提取方法 | 第39-40页 |
| 5 细胞核内蛋白提取方法 | 第40页 |
| 6 考马斯亮蓝蛋白定量法 | 第40-41页 |
| 7 Western blotting法检测IκBα酪氨酸磷酸化水平 | 第41-43页 |
| 8 Western blotting法检测细胞核内NF-κB激活量 | 第43页 |
| 9 RT-PCR法检测NF-κBp56的转录水平 | 第43页 |
| 10 统计分析 | 第43页 |
| 三、 实验结果 | 第43-48页 |
| 1 细胞内ROS水平检测结果 | 第43-44页 |
| 2 IκBα酪氨酸磷酸化水平检测结果 | 第44页 |
| 3 细胞核内NF-κB激活量 | 第44-46页 |
| 4 抗氧化剂对低氧时IκBα磷酸化水平的影响 | 第46页 |
| 5 酪氨酸蛋白激酶抑制剂对低氧时Mφ核内NF-κB激活量的影响 | 第46-47页 |
| 6 NF-κBp65转录水平检测结果 | 第47-48页 |
| 四、 讨论 | 第48-50页 |
| 小节 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 文献综述 | 第62-72页 |
| 硕士期间发表和待发表的文章及参加的学术会议 | 第72-74页 |
