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小麦(Triticum aestivum L.)磷转运子编码cDNA的克隆及其功能研究

1 引言第1-25页
 1.1 磷元素在植物生长发育和新陈代谢中的作用第9页
 1.2 土壤中磷元素的含量及其分布状况第9-10页
 1.3 植物对低磷胁迫的反应及其适应性机制第10-21页
  1.3.1 形态结构上的变化第10-11页
  1.3.2 生理生化上的变化第11-13页
  1.3.3 植物适应低磷胁迫的基础第13-21页
   1.3.3.1 磷转运蛋白编码基因的结构特征第14-15页
   1.3.3.2 磷转运蛋白编码基因器官和组织定位第15-16页
   1.3.3.3 磷转运蛋白编码基因的表达调控第16-19页
   1.3.3.4 磷转运蛋白编码基因的功能鉴定第19-21页
 1.4 小麦高效利用磷的研究进展第21-25页
  1.4.1 小麦磷高效的遗传学基础研究进展第22-23页
  1.4.2 小麦耐低磷性状的分子遗传学研究进展第23-25页
2 材料与方法第25-38页
 2.1 材料第25-26页
  2.1.1 普通小麦(Triticum aestivum L.)第25页
  2.1.2 酵母菌株和载体第25页
  2.1.3 TaPT2克隆第25页
  2.1.4 主要仪器第25-26页
 2.2 方法第26-38页
  2.2.1 植物材料培养第26页
  2.2.2 酵母培养基第26-27页
  2.2.3 总RNA的提取第27-28页
  2.2.4 总RNA中基因组DNA的去除第28页
  2.2.5 cDNA链的合成第28-29页
  2.2.6 PCR第29页
   2.2.6.1 PCR体系第29页
   2.2.6.2 PCR程序第29页
  2.2.7 RACE-PCR第29-30页
   2.2.7.1 引物的设计第29页
   2.2.7.2 RACE-PCR体系第29-30页
   2.2.7.3 RACE-PCR程序第30页
   2.2.7.4 PCR产物的检测第30页
  2.2.8 回收第30-31页
  2.2.9 连接第31页
  2.2.10 转化第31-32页
   2.2.10.1 大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
   2.2.10.2 连接产物的转化第31-32页
  2.2.11 提质粒第32-33页
  2.2.12 酶切检测第33页
  2.2.13 测序第33页
  2.2.14 Southern杂交分析第33-36页
   2.2.14.1 CTAB法提取基因组总DNA第33-34页
   2.2.14.2 DNA浓度的检测第34页
   2.2.14.3 基因组总DNA酶切第34页
   2.2.14.4 转膜第34-35页
   2.2.14.5 预杂交第35页
   2.2.14.6 探针标记第35页
   2.2.14.7 杂交第35页
   2.2.14.8 洗膜第35-36页
   2.2.14.9 检测结果第36页
  2.2.15 基因功能分析第36-38页
   2.2.15.1 酵母突变体培养和质粒载体的提取第36页
   2.2.15.2 酵母感受态的制备第36-37页
   2.2.15.3 重组子构建第37页
   2.2.15.4 酵母转化第37页
   2.2.15.5 基因的表达第37-38页
    2.2.15.5.1 基因表达产物的检测第37页
    2.2.15.5.2 酵母生长情况的测定第37-38页
    2.2.15.5.3 酵母生长过程磷吸收的检测第38页
3 结果与分析第38-43页
 3.1 TaPT2基因的功能第38页
 3.2 TaPT2基因组织分析第38-39页
 3.3 TaPT2基因的活性第39-40页
 3.4 小麦磷转运子编码基因片段的获得第40-43页
4 讨论第43-45页
 4.1 TaPT2基因的功能第43-44页
 4.2 磷转运子基因在小麦基因组中存在多个拷贝第44-45页
参考文献第45-54页
致谢第54页

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