1 引言 | 第1-25页 |
1.1 磷元素在植物生长发育和新陈代谢中的作用 | 第9页 |
1.2 土壤中磷元素的含量及其分布状况 | 第9-10页 |
1.3 植物对低磷胁迫的反应及其适应性机制 | 第10-21页 |
1.3.1 形态结构上的变化 | 第10-11页 |
1.3.2 生理生化上的变化 | 第11-13页 |
1.3.3 植物适应低磷胁迫的基础 | 第13-21页 |
1.3.3.1 磷转运蛋白编码基因的结构特征 | 第14-15页 |
1.3.3.2 磷转运蛋白编码基因器官和组织定位 | 第15-16页 |
1.3.3.3 磷转运蛋白编码基因的表达调控 | 第16-19页 |
1.3.3.4 磷转运蛋白编码基因的功能鉴定 | 第19-21页 |
1.4 小麦高效利用磷的研究进展 | 第21-25页 |
1.4.1 小麦磷高效的遗传学基础研究进展 | 第22-23页 |
1.4.2 小麦耐低磷性状的分子遗传学研究进展 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-38页 |
2.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.1 普通小麦(Triticum aestivum L.) | 第25页 |
2.1.2 酵母菌株和载体 | 第25页 |
2.1.3 TaPT2克隆 | 第25页 |
2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-38页 |
2.2.1 植物材料培养 | 第26页 |
2.2.2 酵母培养基 | 第26-27页 |
2.2.3 总RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.4 总RNA中基因组DNA的去除 | 第28页 |
2.2.5 cDNA链的合成 | 第28-29页 |
2.2.6 PCR | 第29页 |
2.2.6.1 PCR体系 | 第29页 |
2.2.6.2 PCR程序 | 第29页 |
2.2.7 RACE-PCR | 第29-30页 |
2.2.7.1 引物的设计 | 第29页 |
2.2.7.2 RACE-PCR体系 | 第29-30页 |
2.2.7.3 RACE-PCR程序 | 第30页 |
2.2.7.4 PCR产物的检测 | 第30页 |
2.2.8 回收 | 第30-31页 |
2.2.9 连接 | 第31页 |
2.2.10 转化 | 第31-32页 |
2.2.10.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
2.2.10.2 连接产物的转化 | 第31-32页 |
2.2.11 提质粒 | 第32-33页 |
2.2.12 酶切检测 | 第33页 |
2.2.13 测序 | 第33页 |
2.2.14 Southern杂交分析 | 第33-36页 |
2.2.14.1 CTAB法提取基因组总DNA | 第33-34页 |
2.2.14.2 DNA浓度的检测 | 第34页 |
2.2.14.3 基因组总DNA酶切 | 第34页 |
2.2.14.4 转膜 | 第34-35页 |
2.2.14.5 预杂交 | 第35页 |
2.2.14.6 探针标记 | 第35页 |
2.2.14.7 杂交 | 第35页 |
2.2.14.8 洗膜 | 第35-36页 |
2.2.14.9 检测结果 | 第36页 |
2.2.15 基因功能分析 | 第36-38页 |
2.2.15.1 酵母突变体培养和质粒载体的提取 | 第36页 |
2.2.15.2 酵母感受态的制备 | 第36-37页 |
2.2.15.3 重组子构建 | 第37页 |
2.2.15.4 酵母转化 | 第37页 |
2.2.15.5 基因的表达 | 第37-38页 |
2.2.15.5.1 基因表达产物的检测 | 第37页 |
2.2.15.5.2 酵母生长情况的测定 | 第37-38页 |
2.2.15.5.3 酵母生长过程磷吸收的检测 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-43页 |
3.1 TaPT2基因的功能 | 第38页 |
3.2 TaPT2基因组织分析 | 第38-39页 |
3.3 TaPT2基因的活性 | 第39-40页 |
3.4 小麦磷转运子编码基因片段的获得 | 第40-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
4.1 TaPT2基因的功能 | 第43-44页 |
4.2 磷转运子基因在小麦基因组中存在多个拷贝 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-54页 |
致谢 | 第54页 |