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利用GFP标记对胞外钙调素定位的研究

缩写表第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
文献综述第10-32页
 1 钙调素研究进展第10-25页
   ·钙调素研究概况第10-12页
   ·植物中钙调素亚型的研究第12-19页
     ·植物中钙调素亚型的存在第12-13页
     ·植物中不同钙调素亚型激活靶酶的特性第13-16页
     ·植物中钙调素亚型的组织分布和生物学功能第16-19页
   ·细胞外钙调素的研究第19-25页
     ·胞外钙调素的存在第19-21页
     ·胞外钙调素的生物学功能第21-23页
     ·胞外钙调素的信号转导机制第23-25页
 2 绿色荧光蛋白研究进展第25-32页
   ·绿色荧光蛋白的特性第25-26页
   ·绿色荧光蛋白的突变体第26-28页
   ·绿色荧光蛋白在植物中的应用第28-32页
     ·在植物遗传转化中作为报告基因研究基因表达第28-29页
     ·作为蛋白标记用于亚细胞定位以及蛋白质分泌的研究第29-30页
     ·检测蛋白-蛋白之间的相互作用第30-31页
     ·GFP进行定量的观测第31-32页
引言第32-34页
材料与方法第34-45页
 1 材料第34-35页
   ·实验材料第34页
   ·实验试剂第34-35页
 2 实验方法第35-45页
   ·中间载体和双元载体的构建第35-38页
     ·质粒DNA的碱裂解法小量提取第35页
     ·质粒DNA的碱裂解法大量提取第35-36页
     ·目的片段的回收第36-37页
     ·线状质粒DNA的去磷酸化第37页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第37-38页
     ·CaCl_2法转化大肠杆菌第38页
     ·序列测定第38页
   ·SCaMs-GFP、GFP转基因植株的获得及鉴定第38-44页
     ·农杆菌转化第38-39页
     ·烟草的遗传转化第39-40页
     ·转基因愈伤组织的诱导第40页
     ·转基因烟草的鉴定第40-44页
   ·转基因烟草细胞的激光共聚焦显微镜观察第44-45页
结果与分析第45-59页
 1 含SCaM5-GFP融合基因中间载体的构建第45-48页
 2 双元载体pGTV-SCaMs的构建和农杆菌转化第48-51页
   ·双元载体pGTV-SCaM2、pGTV-SCaM5的构建及鉴定第48-50页
   ·双元载体转化农杆菌菌株第50-51页
 3 转pGTV-SCaMs烟草的制备和鉴定第51-56页
   ·烟草的遗传转化第51-53页
   ·转基因烟草愈伤组织建立第53页
   ·转基因烟草的鉴定第53-56页
 4 SCaMs-GFP融合蛋白的亚细胞定位第56-59页
讨论第59-65页
 1 含SCaMs-GFP融合基因中间载体、双元载体的构建和农杆菌转化第59-60页
 2 烟草的遗传转化和鉴定第60-61页
 3 细胞外钙调素的存在第61-63页
 4 细胞外钙调素的亚型特异性分析第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-75页
致谢第75-76页
个人简历第76页

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