| 综述部分 | 第1-43页 |
| 综述一 根瘤菌遗传改造的分子机理和应用 | 第6-28页 |
| 一 引言 | 第6页 |
| 二 nodD 基因的表达调节和功能 | 第6-12页 |
| 1 nodD 基因的表达调节 | 第7-10页 |
| 2 nodD 基因与宿主特异性的关系 | 第10页 |
| 3 根瘤菌结瘤过程的氨调节机理 | 第10-12页 |
| 三 nifA 基因功能的多效性 | 第12-14页 |
| 1 nifA 对结瘤过程的影响 | 第12页 |
| 2 nifA 提高竞争结瘤能力 | 第12页 |
| 3 nifA 诱导豆血红蛋白的合成 | 第12-13页 |
| 4 NifA 激活hupSL 表达 | 第13页 |
| 5 NifA 激活苜蓿根瘤菌mos 基因的表达 | 第13页 |
| 6 NifA 激活 R.leguminosarum bv.phaseoli melA 基因的表达 | 第13页 |
| 7 NifA 激活慢生性大豆根瘤菌groESL 操纵子的表达 | 第13-14页 |
| 8 NifA 激活慢生型大豆根瘤菌glnⅡ的表达 | 第14页 |
| 四 共生结瘤固氮在农业生产过程中应用的限制因素 | 第14-15页 |
| 五 根瘤菌的遗传改造和应用 | 第15-21页 |
| 1 分离天然高效的土壤根瘤菌 | 第15页 |
| 2 额外拷贝组成型表达nifA 对根瘤菌结瘤固氮效率的促进作用 | 第15页 |
| 3 杂交nodD 基因扩大了根瘤菌宿主范围 | 第15-16页 |
| 4 三叶草素基因提高根瘤菌竞争结瘤能力 | 第16-18页 |
| 5 dct 基因改善类菌体二羧酸运输代谢 | 第18-19页 |
| 6 putA 基因提高根瘤菌结瘤竞争力 | 第19-20页 |
| 7 Hup 改善固氮酶能量供应 | 第20-21页 |
| 六 小结 | 第21-22页 |
| 文献 | 第22-28页 |
| 综述二 DNA 超螺旋的特性和功能 | 第28-43页 |
| 概述 | 第28页 |
| 一 DNA 超螺旋的特性 | 第28-30页 |
| 二 DNA 拓扑酶 | 第30-32页 |
| 三 环境因子对超螺旋构象的影响 | 第32-34页 |
| 1 氧分压 | 第32页 |
| 2 营养状况 | 第32页 |
| 3 温度 | 第32-33页 |
| 4 生长速率和时期 | 第33页 |
| 5 渗透压 | 第33-34页 |
| 四 DNA 超螺旋对 DNA 生理功能的影响 | 第34-38页 |
| 1 DNA 复制 | 第34-35页 |
| 2 DNA 转录 | 第35-37页 |
| 3 生长速率 | 第37页 |
| 4 重组 | 第37-38页 |
| 5 Hu-binding 和转座 | 第38页 |
| 文献 | 第38-43页 |
| 论文 | 第43-95页 |
| 第一部分 根瘤菌的遗传改造及应用 | 第43-74页 |
| 中文摘要 | 第44-45页 |
| 英文摘要 | 第45-46页 |
| 引言 | 第46-49页 |
| 材料与方法 | 第49-58页 |
| 一 植物种子 | 第49页 |
| 二 菌株与质粒 | 第49页 |
| 三 组成型表达Sm nodD3 的质粒构建 | 第49页 |
| 四 培养基 | 第49-50页 |
| 五 抗生素的使用 | 第50-51页 |
| 六 DNA 提取,回收和转化 | 第51-53页 |
| 七 工具酶的使用 | 第53-54页 |
| 八 接合转移(Ditta 1980) | 第54页 |
| 九 结瘤实验 | 第54-56页 |
| 十 根瘤菌菌剂的制备 | 第56页 |
| 十一 小区试验田块安排示意图 | 第56-58页 |
| 实验结果和讨论 | 第58-71页 |
| 一 带额外拷贝组成型表达nifA的重组大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)LMG101的大田施用效果研究 | 第58-66页 |
| (一) 重组大豆根瘤菌 LMG101 田间小区接种试验 | 第58-63页 |
| 1 接种工程菌LMG101促进大豆生长及生物量的提高 | 第58-59页 |
| 2 接种工程菌LMG101对大豆产量构成因素的影响 | 第59-60页 |
| 3 接种工程菌LMG101对大豆实际产量的影响 | 第60页 |
| 4 接种工程菌LMG101可节约氮肥的使用 | 第60-61页 |
| 5 接种工程菌LMG101 提高大豆根瘤的固氮酶活力 | 第61-63页 |
| (二) 重组大豆根瘤菌LMG101 的田间扩大接种试验 | 第63-66页 |
| 二 带额外拷贝组成型表达nifA 的重组豌豆根瘤菌( Rhizobium leguminosarum)LMG301 的结瘤固氮效率及其应用 | 第66-69页 |
| 1 重组豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum)LMG301 盆栽接种试验 | 第66-68页 |
| 2 接种重组豌豆根瘤菌LMG301的小区试验 | 第68-69页 |
| 三 带组成型表达和不依赖于宿主特异因子Sm nodD3 的重组大豆根瘤菌（Sinorhi-zobium fredii）LMG102 的结瘤固氮效率及其应用 | 第69-70页 |
| 四 根瘤菌菌剂发酵条件研究 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 文献 | 第72-74页 |
| 第二部分 DNA 超螺旋对nif 基因表达的调节作用 | 第74-95页 |
| 中文摘要 | 第75-76页 |
| 英文摘要 | 第76-77页 |
| 引言 | 第77-78页 |
| 材料与方法 | 第78-84页 |
| 一 菌株与质粒 | 第78页 |
| 二 引物和载体构建 | 第78-80页 |
| 三 培养基 | 第80-81页 |
| 四 抗生素的使用 | 第81页 |
| 五 DNA 提取,回收和转化 | 第81页 |
| 六 工具酶的使用 | 第81页 |
| 七 细菌无氮和无氧培养 | 第81-82页 |
| 八 DNA 超螺旋密度测定 | 第82页 |
| 九 PCR 产物制备及测序 | 第82页 |
| 十 β－半乳糖苷酶活力的测定(Miller 1972) | 第82-84页 |
| 实验结果 | 第84-91页 |
| 一 超螺旋对EcnifLA表达的作用 | 第84-87页 |
| 1 EcnifLA 表达启动子表达必须的序列 | 第85-87页 |
| 2 EcnifLA 启动子厌氧表达需要DNA 负超螺旋 | 第87页 |
| 二 SmnifH 启动子表达需要DNA 负超螺旋 | 第87-88页 |
| 三 不同固氮基因的表达对 DNA 超螺旋依赖程度不同 | 第88-89页 |
| 四 nif基因表达对DNA超螺旋敏感程度取决于激活它的反式作用因子 | 第89-91页 |
| 讨论 | 第91-94页 |
| 文献 | 第94-95页 |
