中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-7页 |
前言 | 第7-14页 |
1 本项研究的目的和意义 | 第7-8页 |
2 Rubisco的研究进展 | 第8-14页 |
2.1 Rubisco的结构 | 第8-9页 |
2.2 Rubisco的活性调节 | 第9-10页 |
2.3 Rubisco的合成与组装 | 第10-11页 |
2.4 Rubisco的基因工程 | 第11页 |
2.5 Rubisco的纯化及分析方法 | 第11-14页 |
2.5.1 Rubisco的纯化方法 | 第11-12页 |
2.5.2 Rubisco的定量分析方法 | 第12页 |
2.5.3 Rubisco的活性分析方法 | 第12-14页 |
材料与方法 | 第14-21页 |
1 主要试剂 | 第14页 |
2 主要仪器 | 第14页 |
3 试剂的配制 | 第14-16页 |
4 实验材料与方法 | 第16-21页 |
4.1 实验材料及培养 | 第16页 |
4.2 粗酶液的提取 | 第16页 |
4.3 可溶性蛋白质含量的测定 | 第16页 |
4.4 硫酸铵分级沉淀 | 第16页 |
4.5 制备电泳 | 第16-18页 |
4.5.1 凝胶板的制备 | 第16-17页 |
4.5.2 加样及电泳 | 第17页 |
4.5.3 切胶 | 第17页 |
4.5.4 洗脱与浓缩 | 第17-18页 |
4.6 SDS-PAGE | 第18页 |
4.6.1 样品处理 | 第18页 |
4.6.2 凝胶板的制备 | 第18页 |
4.6.3 加样及电泳 | 第18页 |
4.7 大白兔的接种方法 | 第18-19页 |
4.7.1 皮内接种法 | 第19页 |
4.7.2 皮下接种法 | 第19页 |
4.8 采血、血清分离及保存 | 第19页 |
4.9 双向免疫扩散法测抗体效价 | 第19页 |
4.9.1 制备琼脂糖凝胶板 | 第19页 |
4.9.2 加样 | 第19页 |
4.10 火箭免疫电泳 | 第19-21页 |
4.10.1 制备琼脂糖凝胶板 | 第19-20页 |
4.10.2 纯酶和粗酶液的处理 | 第20页 |
4.10.3 加样及电泳 | 第20-21页 |
结果与分析 | 第21-30页 |
1 酶提取介质的效果比较 | 第21-22页 |
2 硫酸铵分级分离范围的确定 | 第22-23页 |
3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化Rubisco以及纯化效果的检测 | 第23-25页 |
3.1 Rubisco的纯化 | 第23页 |
3.2 酶纯度的检测 | 第23-25页 |
4 Rubisco抗体的制备 | 第25-27页 |
4.1 实验动物的饲养 | 第25页 |
4.2 免疫方案 | 第25-27页 |
5 火箭免疫电泳 | 第27-30页 |
5.1 最佳上样浓度的摸索 | 第27-29页 |
5.2 几个水稻品种Rubisco含量的测定 | 第29-30页 |
讨论 | 第30-35页 |
1 关于酶提取介质 | 第30页 |
2 关于Rubisco的纯化方案 | 第30-32页 |
3 关于聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的一些改进 | 第32页 |
4 关于免疫方案 | 第32-33页 |
5 关于火箭免疫电泳的一些问题 | 第33页 |
6 需要进一步研究的问题 | 第33-35页 |
结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
作者简历 | 第42页 |