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水稻叶片Rubisco纯化、抗体制备及火箭免疫电泳定量分析方法研究

中文摘要第1-3页
英文摘要第3-7页
前言第7-14页
 1 本项研究的目的和意义第7-8页
 2 Rubisco的研究进展第8-14页
  2.1 Rubisco的结构第8-9页
  2.2 Rubisco的活性调节第9-10页
  2.3 Rubisco的合成与组装第10-11页
  2.4 Rubisco的基因工程第11页
  2.5 Rubisco的纯化及分析方法第11-14页
   2.5.1 Rubisco的纯化方法第11-12页
   2.5.2 Rubisco的定量分析方法第12页
   2.5.3 Rubisco的活性分析方法第12-14页
材料与方法第14-21页
 1 主要试剂第14页
 2 主要仪器第14页
 3 试剂的配制第14-16页
 4 实验材料与方法第16-21页
  4.1 实验材料及培养第16页
  4.2 粗酶液的提取第16页
  4.3 可溶性蛋白质含量的测定第16页
  4.4 硫酸铵分级沉淀第16页
  4.5 制备电泳第16-18页
   4.5.1 凝胶板的制备第16-17页
   4.5.2 加样及电泳第17页
   4.5.3 切胶第17页
   4.5.4 洗脱与浓缩第17-18页
  4.6 SDS-PAGE第18页
   4.6.1 样品处理第18页
   4.6.2 凝胶板的制备第18页
   4.6.3 加样及电泳第18页
  4.7 大白兔的接种方法第18-19页
   4.7.1 皮内接种法第19页
   4.7.2 皮下接种法第19页
  4.8 采血、血清分离及保存第19页
  4.9 双向免疫扩散法测抗体效价第19页
   4.9.1 制备琼脂糖凝胶板第19页
   4.9.2 加样第19页
  4.10 火箭免疫电泳第19-21页
   4.10.1 制备琼脂糖凝胶板第19-20页
   4.10.2 纯酶和粗酶液的处理第20页
   4.10.3 加样及电泳第20-21页
结果与分析第21-30页
 1 酶提取介质的效果比较第21-22页
 2 硫酸铵分级分离范围的确定第22-23页
 3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化Rubisco以及纯化效果的检测第23-25页
  3.1 Rubisco的纯化第23页
  3.2 酶纯度的检测第23-25页
 4 Rubisco抗体的制备第25-27页
  4.1 实验动物的饲养第25页
  4.2 免疫方案第25-27页
 5 火箭免疫电泳第27-30页
  5.1 最佳上样浓度的摸索第27-29页
  5.2 几个水稻品种Rubisco含量的测定第29-30页
讨论第30-35页
 1 关于酶提取介质第30页
 2 关于Rubisco的纯化方案第30-32页
 3 关于聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的一些改进第32页
 4 关于免疫方案第32-33页
 5 关于火箭免疫电泳的一些问题第33页
 6 需要进一步研究的问题第33-35页
结论第35-36页
参考文献第36-41页
致谢第41-42页
作者简历第42页

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