| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 缩写 | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第9-23页 |
| 1.植物抗病的分子生物学基础 | 第9-20页 |
| ·植物与微生物之间的相互作用 | 第9-14页 |
| ·激发子 | 第9-11页 |
| ·受体 | 第11页 |
| ·信号传导 | 第11-14页 |
| ·植物体内与抗菌有关的物质 | 第14-20页 |
| ·植保素 | 第14-16页 |
| ·植物体中的抗菌蛋白或多肽 | 第16-20页 |
| ·植物内的物理性防御物质 | 第20页 |
| 2.我国西洋参生产的现状及存在的问题 | 第20-21页 |
| 3.选题的目的、依据和设想 | 第21-23页 |
| 二.美洲商陆抗菌蛋白的分离、纯化及测序 | 第23-35页 |
| 1.实验材料 | 第23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·西洋参病原真菌 | 第23页 |
| 2.实验方法 | 第23-27页 |
| ·PAFP-S的分离、纯化 | 第23-24页 |
| ·植物材料的处理 | 第23页 |
| ·植物蛋白的提取 | 第23页 |
| ·蛋白提取液的热处理 | 第23页 |
| ·离子交换柱层析 | 第23-24页 |
| ·凝胶过滤 | 第24页 |
| ·蛋白质样品的冷冻干燥 | 第24页 |
| ·蛋白质的电泳 | 第24-26页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24-25页 |
| ·Tricine电泳 | 第25-26页 |
| ·等电聚焦(IEF)电泳 | 第26页 |
| ·抗菌活性的检测 | 第26页 |
| ·蛋白质N-末端氨基酸序列的测定 | 第26-27页 |
| 3.实验结果 | 第27-34页 |
| ·PAFP-S的抗菌活性 | 第27-29页 |
| ·PAFP-S的分离与纯化 | 第29-31页 |
| ·PAFP-S的部分理化性质 | 第31-33页 |
| ·PAFP-S的氨基酸序列测定 | 第33-34页 |
| 4.讨论 | 第34-35页 |
| 三.抗菌蛋白PAFP-S基因的人工合成及其序列测定 | 第35-48页 |
| 1.实验材料 | 第35页 |
| ·菌株和质粒 | 第35页 |
| ·酶和试剂 | 第35页 |
| ·寡聚核苷酸 | 第35页 |
| 2.实验方法 | 第35-41页 |
| ·基因片段的合成 | 第35-36页 |
| ·递归PCR法合成pafp-s基因 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的连接 | 第37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37-38页 |
| ·转化子的筛选 | 第38-39页 |
| ·PCR产物的DNA序列测定 | 第39-41页 |
| ·DNA序列的手工测定 | 第39-41页 |
| ·DNA序列的自动测定 | 第41页 |
| 3.实验结果 | 第41-47页 |
| ·PCR产物电泳检测结果 | 第41-43页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第43-47页 |
| ·pafp-s基因的DNA序列测定 | 第47页 |
| ·手工测序的结果 | 第47页 |
| ·pafp-s基因的全自动序列测定结果 | 第47页 |
| 4.讨论 | 第47-48页 |
| 四.PAFP-S基因表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 | 第48-61页 |
| 1.实验材料 | 第48页 |
| ·菌种和质粒 | 第48页 |
| ·酶和试剂 | 第48页 |
| 2.实验方法 | 第48-49页 |
| ·PAFS-S基因非融合蛋白表达载体的构建 | 第48页 |
| ·PAFP-S非融合蛋白pRSET-210的表达 | 第48页 |
| ·PAFP-S非融合蛋白的N端序列测定 | 第48-49页 |
| ·PAFP-S基因融合蛋白表达载体的构建 | 第49页 |
| ·pafp-s基因在pTrcA-210上的表达 | 第49页 |
| 3.实验结果 | 第49-60页 |
| ·PAFP-S基因非融合蛋白表达载体pRSETB-210的构建 | 第49-51页 |
| ·抗菌蛋白pafp-s基因在pRSETB-210上的表达 | 第51-52页 |
| ·表达产物的薄层扫描分析结果 | 第52页 |
| ·表达产物的氨基酸序列测定 | 第52页 |
| ·pafp-s基因融合蛋白表达载体pTrc A-210的构建与鉴定 | 第52-60页 |
| ·pUC18-210的构建及鉴定 | 第52页 |
| ·pTrcA-210的构建及鉴定 | 第52-60页 |
| ·pafp-s基因在融合表达载体pTrcA-210上的表达 | 第60页 |
| ·电泳结果 | 第60页 |
| ·表达产物的电泳扫描结果 | 第60页 |
| 4.结果 | 第60页 |
| 5.讨论 | 第60-61页 |
| 五.结论 | 第61-62页 |
| 六.参考文献 | 第62-71页 |
