| 中文摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-8页 |
| 引言 | 第8-11页 |
| 第一章 材料和方法 | 第11-26页 |
| ·材料 | 第11-13页 |
| ·主要仪器设备 | 第11页 |
| ·质粒菌株与细胞株 | 第11页 |
| ·主要试验试剂 | 第11-13页 |
| ·方法 | 第13-26页 |
| ·SP22对CD59分子补体结合位点的封闭作用研究 | 第13-17页 |
| ·PC-3细胞的培养 | 第13页 |
| ·PC-3细胞的转染 | 第13页 |
| ·转染细胞的筛选培养 | 第13-14页 |
| ·FIH法检测PC-3细胞表面CD59抗原 | 第14页 |
| ·FACS检测PC-3细胞表面CD59抗原 | 第14页 |
| ·PC-3细胞内总RNA提取 | 第14-15页 |
| ·突变CD59基因(mCD59)mRNA的RT-PCR检测 | 第15页 |
| ·CD59基因mRNA表达水平的RT-PCR检测 | 第15-16页 |
| ·兔抗PC-3细胞多克隆抗体的制备 | 第16页 |
| ·补体溶解试验 | 第16-17页 |
| ·统计学处理 | 第17页 |
| ·SP22基因真核表达体系的构建 | 第17-26页 |
| ·SP22基因的设计 | 第17-18页 |
| ·SP22基因dsDNA的制备 | 第18页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第18-19页 |
| ·SP-dsDNA的纯化回收 | 第19页 |
| ·SP-dsDNA与pMD18-T vector的连接 | 第19页 |
| ·重组质粒SP-pMD18转化E.coli.JM109 | 第19-20页 |
| ·菌液PCR检测SP22基因 | 第20页 |
| ·碱裂解法提取转化菌质粒 | 第20-21页 |
| ·质粒双酶切和测序鉴定 | 第21-22页 |
| ·SP-dsDNA的双酶切 | 第22-23页 |
| ·SP-dsDNA双酶切产物的纯化回收 | 第23页 |
| ·pIRES质粒的双酶切 | 第23-24页 |
| ·pIRES质粒双酶切产物的纯化回收 | 第24页 |
| ·SP-dsDNA与pIRES质粒酶切产物的连接 | 第24页 |
| ·重组质粒SP-pIRES转化E.coli.JM109 | 第24页 |
| ·菌液PCR检测SP22基因 | 第24页 |
| ·SP-pIRES转化菌质粒双酶切和测序鉴定 | 第24-26页 |
| 第二章 实验结果 | 第26-37页 |
| ·PC-3细胞的培养 | 第26页 |
| ·转染细胞表面CD59抗原的FIH检测结果 | 第26-27页 |
| ·FACS检测转染细胞表面CD59抗原的表达 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR检测转染细胞内突变CD59基因mRNA | 第28页 |
| ·RT-PCR半定量检测转染细胞内CD59 mRNA | 第28-29页 |
| ·兔抗PC-3细胞多克隆抗体的效价测定 | 第29-30页 |
| ·SP22对补体介导的转染细胞溶解的影响 | 第30-31页 |
| ·SP-dsDNA的制备与纯化回收 | 第31-32页 |
| ·菌液PCR检测SP-pMD18转化菌中的SP22基因 | 第32页 |
| ·SP-pMD18转化菌质粒的双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·SP-pMD18转化菌质粒的DNA测序 | 第33页 |
| ·SP-dsDNA的双酶切与酶切产物的纯化回收 | 第33-34页 |
| ·pIRES质粒的双酶切与酶切产物的纯化回收 | 第34-35页 |
| ·菌液PCR检测SP-pIRES转化菌中的SP22基因 | 第35-36页 |
| ·SP-pIRES转化菌质粒的双酶切鉴定 | 第36页 |
| ·SP-pIRES转化菌质粒的DNA测序 | 第36-37页 |
| 第三章 讨论 | 第37-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 综述 | 第45-52页 |
| 综述的参考文献 | 第50-52页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
