广谱炎症相关趋化因子抑制剂先导物的筛选
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1 绪论 | 第12-24页 |
| ·炎症介绍 | 第12-13页 |
| ·趋化因子介绍 | 第13-15页 |
| ·炎症相关趋化因子抑制剂进展 | 第15-17页 |
| ·LUMINEX技术 | 第17-19页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第19-20页 |
| ·TTP的介绍 | 第20-22页 |
| ·课题意义与技术路线 | 第22-24页 |
| 2 实验器材与试剂 | 第24-28页 |
| ·主要实验材料和试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂配制方法 | 第26-28页 |
| 3 实验方法 | 第28-54页 |
| 第一部分 噬菌体十二肽库的筛选 | 第28-43页 |
| 1 实验内容 | 第28-35页 |
| ·外周血单核细胞的分离和培养 | 第28页 |
| ·炎性趋化因子的产生 | 第28-29页 |
| ·Luminex液相芯片分析检测模型的建立 | 第29-30页 |
| ·噬菌体十二肽库的亲和筛选 | 第30-32页 |
| ·阳性噬菌体克隆DNA的测序及序列分析 | 第32-33页 |
| ·短肽的趋化抑制效率 | 第33-35页 |
| 2 实验结果与分析 | 第35-43页 |
| ·急性炎症模型的建立结果 | 第35-36页 |
| ·LUMINEX液相芯片检测趋化因子的变化情况 | 第36-37页 |
| ·特异性噬菌体的富集 | 第37-39页 |
| ·阳性克隆斑的效价 | 第39-40页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳结果 | 第40页 |
| ·阳性克隆噬菌体的序列分析和特性预测 | 第40-42页 |
| ·所选短肽的趋化抑制效率结果 | 第42-43页 |
| 第二部分 P1肽作用机制的探讨 | 第43-54页 |
| 1 实验内容 | 第43-47页 |
| ·短肽的合成 | 第43页 |
| ·MTT法检测P1肽对PBMC细胞活性的影响 | 第43页 |
| ·活性检测 | 第43-44页 |
| ·钙流试验 | 第44页 |
| ·RT-PCR反应 | 第44-47页 |
| 2 实验结果与分析 | 第47-54页 |
| ·合成肽结果 | 第47-48页 |
| ·P1肽对PBMC细胞的活性结果 | 第48-49页 |
| ·短肽对炎症细胞所产生的趋化因子的作用效果 | 第49-50页 |
| ·钙流试验结果 | 第50-51页 |
| ·RNA的纯度结果 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR结果 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-60页 |
| ·噬菌体亲和筛选影响因素 | 第54-55页 |
| ·炎症模型的建立与验证方法优化 | 第55-56页 |
| ·P1短肽体外活性评价 | 第56页 |
| ·P1短肽抑制趋化因子表达的机制 | 第56-57页 |
| ·趋化因子及受体抑制剂的研究现状 | 第57-59页 |
| ·存在问题 | 第59-60页 |
| 5 实验总结 | 第60页 |
| 6 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 附录1 英文缩略词简表 | 第67-68页 |
| 附录2 氨基酸缩写表 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
