| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 水蛭素研究现状及其聚乙二醇修饰 | 第11-32页 |
| ·水蛭素结构和理化性质 | 第11-12页 |
| ·水蛭素的结构 | 第11-12页 |
| ·水蛭素的理化性质 | 第12页 |
| ·水蛭素的分离纯化 | 第12-13页 |
| ·天然水蛭素的分离纯化 | 第12-13页 |
| ·重组水蛭素的分离纯化 | 第13页 |
| ·水蛭素的药理作用和药代动力学 | 第13-16页 |
| ·水蛭素的药理作用 | 第13-14页 |
| ·水蛭素的药代动力学 | 第14-16页 |
| ·水蛭素的聚乙二醇修饰 | 第16-25页 |
| ·蛋白类药物聚乙二醇修饰研究进展 | 第16-23页 |
| ·蛋白类药物聚乙二醇固相修饰 | 第23-24页 |
| ·水蛭素的聚乙二醇修饰 | 第24-25页 |
| ·水蛭素聚乙二醇修饰产物分离与纯化 | 第25-27页 |
| ·聚乙二醇化蛋白质的分离纯化 | 第25-27页 |
| ·水蛭素聚乙二醇修饰产物分离与纯化 | 第27页 |
| ·聚乙二醇修饰产物检测与分析 | 第27-29页 |
| ·色谱法 | 第27-28页 |
| ·电泳法 | 第28页 |
| ·其他方法 | 第28-29页 |
| ·水蛭素的体外抗凝活性的检测方法 | 第29-31页 |
| ·凝血酶直接滴定法 | 第29-30页 |
| ·Chromonym TH为生色底物的比色法 | 第30-31页 |
| ·光散射法 | 第31页 |
| ·本文的研究思路 | 第31-32页 |
| 2 天然水蛭素的提取及纯化 | 第32-42页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-36页 |
| ·水蛭的预处理 | 第33-34页 |
| ·粗提方法的选取 | 第34页 |
| ·水蛭素纯化 | 第34-35页 |
| ·水蛭素纯度鉴定(SDS-PAGE) | 第35页 |
| ·水蛭素含量测定 | 第35页 |
| ·水蛭素活力测定 | 第35-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-41页 |
| ·预处理方法对水蛭素活力的影响 | 第36页 |
| ·粗提方法的选取 | 第36-37页 |
| ·水蛭素的纯化 | 第37-40页 |
| ·水蛭素纯度鉴定(SDS-PAGE) | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 3 聚乙二醇修饰水蛭素及其分离与分析 | 第42-57页 |
| ·引言 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·液相PEG修饰水蛭素 | 第44页 |
| ·离子交换柱辅助PEG修饰水蛭素 | 第44页 |
| ·离子交换柱辅助PEG 20 kDa修饰水蛭素条件优化 | 第44页 |
| ·离子交换柱辅助PEG连续修饰水蛭素 | 第44-45页 |
| ·电泳(SDS-PAGE) | 第45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-56页 |
| ·液相PEG修饰水蛭素 | 第45-48页 |
| ·离子交换柱辅助PEG修饰水蛭素 | 第48-51页 |
| ·离子交换柱辅助PEG 20 kDa修饰水蛭素条件优化 | 第51-54页 |
| ·离子交换柱辅助PEG连续修饰水蛭素 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 4 聚乙二醇修饰产物性质的初步研究 | 第57-66页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58页 |
| ·修饰产物活力测定 | 第58页 |
| ·修饰产物蛋白浓度测定 | 第58页 |
| ·修饰产物凝胶柱行为研究(表观分子量) | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-64页 |
| ·修饰产物比活测定 | 第58-59页 |
| ·修饰产物凝胶柱行为研究 | 第59-63页 |
| ·修饰位点预测 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 5 结论与展望 | 第66-68页 |
| ·结论 | 第66页 |
| ·展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |