| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第1章 引言 | 第7-9页 |
| 第2章 材料和仪器 | 第9-11页 |
| ·主要材料 | 第9-10页 |
| ·主要仪器 | 第10-11页 |
| 第3章 实验方法 | 第11-18页 |
| ·细胞培养 | 第11页 |
| ·目的基因的设计 | 第11页 |
| ·构建人CXCR4 shRNA 表达载体 | 第11-14页 |
| ·单链DNA 退火 | 第11页 |
| ·逆转录病毒载体pRNAT 酶切 | 第11页 |
| ·酶切产物纯化 | 第11-12页 |
| ·连接 | 第12页 |
| ·连接产物转化E.coli DH5α感受态菌种 | 第12页 |
| ·重组质粒提取 | 第12-13页 |
| ·酶切鉴定 | 第13页 |
| ·PCR 鉴定 | 第13-14页 |
| ·测序鉴定 | 第14页 |
| ·重组质粒转染病毒包装细胞株（PT67） | 第14页 |
| ·流式细胞仪和荧光显微镜检测转染率 | 第14页 |
| ·转染后的PT67 细胞的上清液感染SHI-1 细胞 | 第14-15页 |
| ·各组SHI-1 细胞CXCR4mRNA 表达量的检测 | 第15-16页 |
| ·RNA 的提取 | 第15页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第15-16页 |
| ·PCR 和电泳鉴定 | 第16页 |
| ·挑选单克隆SI-SHI-1 和NC-SHI-1 细胞 | 第16-17页 |
| ·统计学处理 | 第17-18页 |
| 第4章 结果 | 第18-25页 |
| ·酶切鉴定重组质粒 | 第18页 |
| ·PCR 鉴定重组质粒 | 第18页 |
| ·重组质粒序列测定 | 第18-19页 |
| ·重组质粒转染率的检测 | 第19-21页 |
| ·病毒上清转染SHI-1 细胞转染效率的检测 | 第21-22页 |
| ·挑选单克隆细胞 | 第22页 |
| ·各组SHI-1 细胞CXCR4 mRNA 表达的变化 | 第22-25页 |
| 第5章 讨论 | 第25-29页 |
| 第6章 结论与展望 | 第29-30页 |
| ·结论 | 第29页 |
| ·进一步工作的方向 | 第29-30页 |
| 致谢 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 附录 A 综述 | 第33-39页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第39页 |
