| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 1 绪论 | 第12-21页 |
| ·齐口裂腹鱼简介 | 第12-13页 |
| ·形态特征 | 第12页 |
| ·生活习性 | 第12-13页 |
| ·经济价值 | 第13页 |
| ·人工养殖 | 第13页 |
| ·胰蛋白酶 | 第13-21页 |
| ·胰蛋白酶和胰蛋白酶原 | 第13-14页 |
| ·胰蛋白酶作用机制 | 第14-15页 |
| ·胰蛋白酶活性研究 | 第15页 |
| ·胰蛋白酶研究进展 | 第15-17页 |
| ·冷水鱼类胰蛋白酶研究进展 | 第17页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶研究进展 | 第17-18页 |
| ·胰蛋白酶应用 | 第18-21页 |
| 2 齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体的克隆、表达和序列分析 | 第21-32页 |
| ·材料与方法 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·菌种与质粒 | 第21页 |
| ·药品与试剂 | 第21页 |
| ·试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·仪器和设备 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第23页 |
| ·检测 | 第23-24页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原 cDNA 单链合成 | 第24页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体基因中间片段的克隆 | 第24-25页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体基因 3’Race | 第25-26页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体基因 5’Race | 第26-27页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第27-30页 |
| ·目的片段的回收 | 第27-28页 |
| ·目的片段与 pMD19-T 载体连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌 DH5a 感受态的制备 | 第28-29页 |
| ·转化 E.coli DH5α感受态细胞 | 第29页 |
| ·转化子的蓝白斑筛选及 PCR 鉴定 | 第29-30页 |
| ·克隆重组子的扩大培养 | 第30页 |
| ·测序与分析 | 第30页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体在各组织中的表达 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体基因克隆结果 | 第32-36页 |
| ·总 RNA 提取 | 第32页 |
| ·胰蛋白酶原前体基因 | 第32-33页 |
| ·胰蛋白酶前体基因的 cDNA 序列分析 | 第33-35页 |
| ·内含子外显子分析 | 第35-36页 |
| ·氨基酸序组成分析 | 第36-40页 |
| ·基本参数 | 第36页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第36页 |
| ·氨基酸序列比对与同源性分析 | 第36-40页 |
| ·二级结构 | 第40页 |
| ·齐口裂腹鱼胰蛋白酶原前体基因组织表达 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·胰蛋白酶原前体的信号肽和激活肽 | 第42页 |
| ·胰蛋白酶基因序列的二硫键 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-52页 |
| 附录 A 攻读硕士学位期间发表论文及科研情况 | 第50-51页 |
| 附录 B 缩略词 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |