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羊泰勒虫病PCR诊断方法的建立及初步应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
引言第10-17页
 1 羊泰勒虫病第10页
 2 羊泰勒虫病原学研究进展第10-11页
   ·病原种类第10-11页
   ·病原形态第11页
 3 羊泰勒虫病的分布和危害第11-12页
 4 羊泰勒虫病诊断技术的研究进展第12-14页
   ·病原学诊断第12-13页
   ·血清学诊断第13-14页
   ·分子生物学诊断第14页
 5 羊泰勒虫病防治研究进展第14-15页
   ·预防第14-15页
   ·治疗第15页
 6 本研究的目的和意义第15-17页
材料与方法第17-28页
 1 材料第17-20页
   ·被检材料采集第17页
   ·特异性试验所需材料第17页
   ·菌种与质粒第17-18页
   ·试剂第18页
   ·试验用溶液及其配制第18-19页
   ·主要仪器设备第19-20页
 2 方法第20-28页
   ·血液涂片检查第20页
   ·模板DNA的提取第20-21页
   ·引物的设计与合成第21页
   ·PCR反应第21-22页
   ·PCR产物的纯化回收第22页
   ·感受态细胞的制备第22-23页
   ·连接反应第23页
   ·重组质粒DNA的转化第23页
   ·克隆的筛选第23页
   ·质粒DNA的小量制备——碱裂解法第23-24页
   ·重组质粒的酶切鉴定第24-25页
   ·阳性质粒的PCR鉴定第25页
   ·序列测定及分析第25页
   ·常规PCR方法的建立第25-26页
   ·半套式PCR方法的建立第26-27页
   ·不同PCR方法对羊泰勒虫检测结果的比较第27页
   ·应用半套式PCR方法对吉林省珲春地区羊泰勒虫病流行情况初步调查第27-28页
结果第28-45页
 1 血液涂片结果第28页
 2 不同方法提取总DNA结果第28页
 3 PCR扩增结果第28-29页
 4 目的基因的克隆第29页
 5 重组质粒的鉴定第29-31页
 6 序列测定及分析第31-36页
 7 常规PCR诊断方法的建立第36-39页
 8 半套式PCR诊断方法的建立第39-40页
 9 不同PCR方法对羊泰勒虫检测结果的比较第40-43页
 10 应用半套式PCR方法对吉林省珲春地区羊泰勒虫病流行情况初步调查第43-45页
讨论第45-49页
 1 羊泰勒虫吉林分离株18S rRNA基因序列分析第45页
 2 羊泰勒虫吉林分离株表面蛋白基因序列分析第45-46页
 3 血液中DNA提取方法对虫体基因组DNA质量的影响第46页
 4 羊泰勒虫病两种常规PCR诊断方法的建立第46页
 5 羊泰勒虫病半套式PCR诊断方法的建立第46-47页
 6 不同PCR方法对羊泰勒虫检测结果的比较第47页
 7 应用半套式PCR方法对吉林省珲春地区羊泰勒虫病流行情况初步调查第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
附录(攻读学位期间发表论文目录)第57页

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