摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-6页 |
第一章 文献综述 | 第6-19页 |
·研究意义 | 第6-7页 |
·研究进展 | 第7-14页 |
·磁性纳米粒子及其在生命科学领域的应用 | 第7-9页 |
·mRNA 结构及其功能 | 第9-11页 |
·壳聚糖在药载中的应用 | 第11-12页 |
·RNA 干扰研究进展 | 第12-14页 |
·实验方法和表征手段 | 第14-18页 |
·原子力显微镜(AFM) | 第15-16页 |
·透射电子显微镜 | 第16-17页 |
·振动样品磁强计(VSM) | 第17-18页 |
·本论文的研究目的及内容 | 第18-19页 |
·功能化超顺磁性纳米粒子的制备和表征 | 第18页 |
·单个细胞的分离和裂解,mRNA 的分离提取和扩增、检测 | 第18页 |
·Cs 包裹γ-Fe_2O_3和siRNA | 第18-19页 |
第二章:功能化磁性纳米粒子分离K562 细胞mRNA | 第19-31页 |
·引言 | 第19-20页 |
·实验部分 | 第20-24页 |
·试剂与仪器 | 第20页 |
·磁性γ-Fe_2O_3 的合成 | 第20-21页 |
·微乳液的制备 | 第21页 |
·在γ-Fe_2O_3 的表面包覆SiO_2 | 第21-22页 |
·核壳型磁性粒子表面-SH的修饰 | 第22页 |
·Ellman 方法测定功能化磁性纳米粒子表面的巯基 | 第22页 |
·oligo(dT)探针的连接 | 第22-23页 |
·K562 细胞的裂解和总RNA 的提取 | 第23页 |
·mRNA 的分离和一步法RT-PCR | 第23-24页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测目标片段的扩增结果 | 第24页 |
·结果与讨论 | 第24-30页 |
·磁性纳米粒子的表征 | 第24-26页 |
·磁性纳米粒子表面巯基测定方法的建立 | 第26-28页 |
·在磁性纳米粒子的表面连接oligo(dT) | 第28-29页 |
·提取、分离的mRNA 一步法RT-PCR | 第29-30页 |
·琼脂糖凝胶电泳结果 | 第30页 |
·结论 | 第30-31页 |
第三章:单个细胞mRNA 的提取和检测 | 第31-41页 |
·前言 | 第31-32页 |
·实验部分 | 第32-34页 |
·试剂与仪器 | 第32-33页 |
·单个细胞的分离 | 第33页 |
·单个K562 细胞选择性裂解细胞膜 | 第33-34页 |
·结果与讨论 | 第34-39页 |
·分离得到的单个细胞 | 第34页 |
·细胞膜选择性裂解的验证 | 第34-37页 |
·单个细胞mRNA 的提取和两步法RT-PCR | 第37-38页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测被扩增的目标片段 | 第38-39页 |
·结论 | 第39-41页 |
第四章 壳聚糖磁性纳米粒子包裹siRNA 诱导K562 细胞凋亡 | 第41-53页 |
·前言 | 第41-43页 |
·实验部分 | 第43-45页 |
·试剂与仪器 | 第43-44页 |
·复合粒子的制备 | 第44页 |
·siRNA 包封效率的测定 | 第44页 |
·Cs 对siRNA 的抗RNase 降解保护 | 第44页 |
·复合粒子对K562 细胞的诱导凋亡 | 第44-45页 |
·结果和讨论 | 第45-52页 |
·AFM 分析复合物粒子 | 第45-47页 |
·复合粒子的磁响应性分析 | 第47页 |
·Cs 对siRNA 包封效率的测定 | 第47-49页 |
·Cs 对siRNA 抗RNase 降解保护效果的评定 | 第49-52页 |
·结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第60-62页 |
附件 | 第62页 |