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纳米技术在RNA研究中的应用

摘要第1-3页
Abstract第3-6页
第一章 文献综述第6-19页
   ·研究意义第6-7页
   ·研究进展第7-14页
     ·磁性纳米粒子及其在生命科学领域的应用第7-9页
     ·mRNA 结构及其功能第9-11页
     ·壳聚糖在药载中的应用第11-12页
     ·RNA 干扰研究进展第12-14页
   ·实验方法和表征手段第14-18页
     ·原子力显微镜(AFM)第15-16页
     ·透射电子显微镜第16-17页
     ·振动样品磁强计(VSM)第17-18页
   ·本论文的研究目的及内容第18-19页
     ·功能化超顺磁性纳米粒子的制备和表征第18页
     ·单个细胞的分离和裂解,mRNA 的分离提取和扩增、检测第18页
     ·Cs 包裹γ-Fe_2O_3和siRNA第18-19页
第二章:功能化磁性纳米粒子分离K562 细胞mRNA第19-31页
   ·引言第19-20页
   ·实验部分第20-24页
     ·试剂与仪器第20页
     ·磁性γ-Fe_2O_3 的合成第20-21页
     ·微乳液的制备第21页
     ·在γ-Fe_2O_3 的表面包覆SiO_2第21-22页
     ·核壳型磁性粒子表面-SH的修饰第22页
     ·Ellman 方法测定功能化磁性纳米粒子表面的巯基第22页
     ·oligo(dT)探针的连接第22-23页
     ·K562 细胞的裂解和总RNA 的提取第23页
     ·mRNA 的分离和一步法RT-PCR第23-24页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测目标片段的扩增结果第24页
   ·结果与讨论第24-30页
     ·磁性纳米粒子的表征第24-26页
     ·磁性纳米粒子表面巯基测定方法的建立第26-28页
     ·在磁性纳米粒子的表面连接oligo(dT)第28-29页
     ·提取、分离的mRNA 一步法RT-PCR第29-30页
     ·琼脂糖凝胶电泳结果第30页
   ·结论第30-31页
第三章:单个细胞mRNA 的提取和检测第31-41页
   ·前言第31-32页
   ·实验部分第32-34页
     ·试剂与仪器第32-33页
     ·单个细胞的分离第33页
     ·单个K562 细胞选择性裂解细胞膜第33-34页
   ·结果与讨论第34-39页
     ·分离得到的单个细胞第34页
     ·细胞膜选择性裂解的验证第34-37页
     ·单个细胞mRNA 的提取和两步法RT-PCR第37-38页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测被扩增的目标片段第38-39页
   ·结论第39-41页
第四章 壳聚糖磁性纳米粒子包裹siRNA 诱导K562 细胞凋亡第41-53页
   ·前言第41-43页
   ·实验部分第43-45页
     ·试剂与仪器第43-44页
     ·复合粒子的制备第44页
     ·siRNA 包封效率的测定第44页
     ·Cs 对siRNA 的抗RNase 降解保护第44页
     ·复合粒子对K562 细胞的诱导凋亡第44-45页
   ·结果和讨论第45-52页
     ·AFM 分析复合物粒子第45-47页
     ·复合粒子的磁响应性分析第47页
     ·Cs 对siRNA 包封效率的测定第47-49页
     ·Cs 对siRNA 抗RNase 降解保护效果的评定第49-52页
   ·结论第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-60页
攻读学位期间的研究成果第60-62页
附件第62页

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