| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-35页 |
| 副猪嗜血杆菌研究进展 | 第12-28页 |
| 1 病原学 | 第12页 |
| 2 临床与病理学特征 | 第12-13页 |
| 3 流行病学 | 第13-14页 |
| 4 致病因素研究进展 | 第14-19页 |
| ·荚膜多糖(CPS) | 第15页 |
| ·脂多糖(LPS) | 第15页 |
| ·脂寡糖(LOS) | 第15-16页 |
| ·外膜蛋白(OMP) | 第16页 |
| ·转铁结合蛋白(TBP) | 第16-17页 |
| ·神经氨酸酶(NA) | 第17页 |
| ·生物被膜(BF) | 第17-18页 |
| ·cAMP依赖性自然转化系统 | 第18页 |
| ·其它 | 第18-19页 |
| 5. 分型学研究 | 第19-23页 |
| ·血清学分型 | 第19-20页 |
| ·分子生物学分型 | 第20-23页 |
| ·外膜蛋白(OMP)指纹图谱法 | 第20页 |
| ·多位点酶切电泳图谱法(MEE) | 第20-21页 |
| ·限制性内切酶酶切指纹图谱法(REF) | 第21页 |
| ·肠科杆菌基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR) | 第21页 |
| ·多位点序列分型法(MLST) | 第21-22页 |
| ·限制性片段长度多态性PCR分型法(RFLP-PCR) | 第22页 |
| ·随机扩增多态性DNA分型法(RAPD) | 第22页 |
| ·Hsp60分型法 | 第22-23页 |
| 6. 诊断方法研究进展 | 第23-25页 |
| ·免疫组化法诊断 | 第23页 |
| ·血清学诊断 | 第23-24页 |
| ·分子生物学诊断 | 第24-25页 |
| ·特异寡核苷酸捕获平板杂交(OSCPH) | 第24页 |
| ·原位杂交(ISH) | 第24页 |
| ·PCR | 第24-25页 |
| 7. 预防与治疗研究进展 | 第25-27页 |
| ·非免疫接种保护 | 第25页 |
| ·免疫接种保护 | 第25-26页 |
| ·药物预防与治疗 | 第26-27页 |
| 8. 总结与展望 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-35页 |
| 第二篇 试验研究 | 第35-86页 |
| 第一章 副猪嗜血杆菌PCR诊断方法的建立与临床运用 | 第35-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·试验材料 | 第35-36页 |
| ·菌株 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第36页 |
| ·PCR反应条件的摸索 | 第36页 |
| ·特异性试验 | 第36页 |
| ·敏感性试验 | 第36页 |
| ·PCR的临床运用和序列测定与比对 | 第36-37页 |
| 2. 结果 | 第37-39页 |
| ·PCR反应条件的优化 | 第37页 |
| ·PCR特异性测定 | 第37-38页 |
| ·PCR敏感性测定 | 第38页 |
| ·PCR的临床运用和序列测定与比对 | 第38-39页 |
| 3. 讨论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 第二章 上海地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定及血清学调查 | 第43-60页 |
| 1. 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·样品的采集及细菌的分离 | 第44-45页 |
| ·形态学鉴定 | 第45页 |
| ·培养特性鉴定 | 第45-46页 |
| ·PCR检测 | 第46页 |
| ·生化试验 | 第46页 |
| ·药敏试验 | 第46页 |
| ·兔抗标准血清的制备 | 第46页 |
| ·琼脂扩散分型抗原的制备 | 第46-47页 |
| ·琼脂扩散试验血清学分型 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-50页 |
| ·分离菌的形态学特性 | 第47-48页 |
| ·分离菌的培养特性 | 第48页 |
| ·PCR检测结果 | 第48-50页 |
| ·分离菌株的生化特性鉴定 | 第50页 |
| ·药敏试验结果 | 第50页 |
| ·分离菌株的血清型鉴别 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 第三章 IRS-PCR在副猪嗜血杆菌基因分型研究中的应用 | 第60-68页 |
| 1. 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·试验材料 | 第61页 |
| ·菌株 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-62页 |
| ·引物的设计与合成 | 第61页 |
| ·基因组DNA的制备 | 第61页 |
| ·连接体的制备 | 第61页 |
| ·双酶切及DNA连接 | 第61-62页 |
| ·IRS-PCR | 第62页 |
| ·HPS分离株IRS-PCR及遗传相关性分析 | 第62页 |
| 2 结论 | 第62-64页 |
| ·HPS IRS-PCR扩增结果 | 第62-63页 |
| ·HPS分离株IRS-PCR遗传相关性分析 | 第63-64页 |
| 3. 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌基因组文库的构建及抗原肽的筛选 | 第68-86页 |
| 1. 材料与方法 | 第69-73页 |
| ·试验材料 | 第69页 |
| ·质粒和菌株 | 第69页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·实验动物 | 第69页 |
| ·仪器设备 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-73页 |
| ·细菌基因组文库的建立 | 第69-71页 |
| ·基因组文库的免疫学筛选 | 第71-73页 |
| 2. 结果 | 第73-77页 |
| ·SH08-54P基因组的提取 | 第73页 |
| ·最佳酶切条件的确定 | 第73-74页 |
| ·载体质粒pUC18的准备 | 第74页 |
| ·DNA酶切片段与载体重组及PCR鉴定 | 第74-75页 |
| ·库容量确定 | 第75页 |
| ·基因组文库的免疫学筛选 | 第75-77页 |
| ·阳性克隆子的获得 | 第75-76页 |
| ·阳性克隆子插入片段大小的鉴定 | 第76-77页 |
| ·重组子插入片段核苷酸序列测定及同源性分析 | 第77页 |
| 3. 讨论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 全文总结 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的主要论文 | 第90页 |
