| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-26页 |
| ·研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-24页 |
| ·野生大豆的研究进展 | 第13-16页 |
| ·全长cDNA文库构建的研究进展 | 第16-21页 |
| ·抗渗透胁迫基因的高通量筛选 | 第21-24页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·与SMART技术匹配的通用高效植物表达载体卡盒的构建 | 第26-29页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·通用高效植物表达载体卡盒pEMT-5的功能验证 | 第29-32页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·野生大豆全长cDNA超量表达文库构建技术的建立 | 第32-38页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| 3.结果与分析 | 第38-58页 |
| ·与SMART技术匹配的通用高效植物表达载体卡盒的构建 | 第38-43页 |
| ·重叠延伸PCR扩增P-MN和E-MN序列 | 第38-39页 |
| ·载体卡盒pBMT-5的构建 | 第39-41页 |
| ·载体卡盒pEMT-5的构建 | 第41-43页 |
| ·通用高效植物表达载体卡盒的功能验证 | 第43-50页 |
| ·质粒pBHT-5,pEMT-5转化根癌农杆菌LBA4404 | 第43页 |
| ·烟草植株遗传转化途径 | 第43-44页 |
| ·转pBHT-5质粒的转基因植株获得 | 第44-45页 |
| ·转pEMT-5质粒的转基因植株获得 | 第45-46页 |
| ·目的基因转录水平的检测 | 第46-50页 |
| ·野生大豆全长cDNA超量表达文库的构建 | 第50-58页 |
| ·野生大豆总RNA的提取 | 第50-51页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第51页 |
| ·双链cDNA Sfi酶切产物的回收 | 第51-52页 |
| ·cDNA植物超量表达载体库的构建 | 第52-55页 |
| ·cDNA表达载体库转化拟南芥及转基因植株的获得 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| ·重叠延伸PCR的应用 | 第58页 |
| ·MAR在基因工程中的应用 | 第58页 |
| ·高效的大肠杆菌和农杆菌转化方法探讨 | 第58-59页 |
| ·拟南芥侵染技术的探讨 | 第59页 |
| ·下一步研究展望 | 第59-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| ·通用高效超量表达植物载体卡盒的构建 | 第60页 |
| ·通用高效超量表达植物载体卡盒的功能分析 | 第60页 |
| ·野生大豆全长cDNA超量表达文库构建技术的建立 | 第60页 |
| ·转基因植株的筛选及基因分离 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第71页 |
