| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一章 材料与方法 | 第14-25页 |
| 1 研究对象 | 第14页 |
| 2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 3 主要仪器 | 第15页 |
| 4 实验方法 | 第15-25页 |
| ·细胞培养 | 第15-16页 |
| ·细胞复苏 | 第15页 |
| ·细胞传代 | 第15页 |
| ·细胞同步 | 第15-16页 |
| ·实验分组 | 第16页 |
| ·分组一 | 第16页 |
| ·分组二 | 第16页 |
| ·甲基化特异性PCR | 第16-19页 |
| ·CTGF基因启动子的CpG岛在线分析 | 第16-17页 |
| ·细胞基因组DNA提取 | 第17页 |
| ·亚硫酸氢钠修饰DNA | 第17页 |
| ·修饰后DNA纯化回收 | 第17-18页 |
| ·纯化回收后DNA用于PCR | 第18-19页 |
| ·MSP的结果分析 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19-21页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·总RNA质量鉴定 | 第20页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·逆转录(RT) | 第20页 |
| ·多聚酶链式反应(PCR) | 第20-21页 |
| ·PCR产物的鉴定 | 第21页 |
| ·WesternBlotting | 第21-24页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第21页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第21-22页 |
| ·制备10%的SDS-聚丙烯酰胺分离胶 | 第22页 |
| ·制备4%浓缩胶 | 第22-23页 |
| ·样品处理 | 第23页 |
| ·SDS—PAGE电泳 | 第23页 |
| ·转膜 | 第23页 |
| ·封闭 | 第23页 |
| ·杂交与洗膜 | 第23页 |
| ·3,3′—二氨基联苯胺(DAB)显色 | 第23页 |
| ·Westblot条带分析 | 第23-24页 |
| ·酶联免疫吸附实验 | 第24页 |
| ·统计分析 | 第24-25页 |
| 第二章 实验结果 | 第25-33页 |
| ·高糖对HMCs CTGF基因启动子甲基化状态和基因表达的影响 | 第25-30页 |
| ·CpG岛的在线分析工具CpGPlot分析的结果 | 第25-26页 |
| ·DNA和RNA质量图 | 第26-27页 |
| ·NG组HMCs CTGF基因启动子的MSP结果 | 第27页 |
| ·HG组HMCs CTGF基因启动子的MSP结果 | 第27-28页 |
| ·不同浓度D-葡萄糖对HMCs CTGF mRNA表达的影响 | 第28-29页 |
| ·不同浓度D-葡萄糖对HMCs CTGF蛋白表达的影响 | 第29页 |
| ·不同浓度D-葡萄糖对HMCs纤连蛋白分泌的影响 | 第29-30页 |
| ·5-aza-dCyd对HMCs CTGF基因启动子的甲基化状态和基因表达的影响 | 第30-33页 |
| ·5-aza-dCyd对HMCs CTGF基因启动子甲基化状态的影响 | 第30-31页 |
| ·5-aza-dCyd对HMCs CTGF mRNA表达的影响 | 第31-32页 |
| ·5-aza-dCyd对HMCs CTGF蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 第三章 讨论 | 第33-36页 |
| 第四章 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 综述 | 第41-49页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 科研成果 | 第53页 |
