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苹果抗轮纹病种质资源和基因筛选以及NO介导的防御响应

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
1 前言第15-37页
   ·抗病遗传与抗性机理第15-16页
   ·基因的分子标记第16-19页
   ·遗传图谱的构建第19-21页
   ·植物的抗病响应机制第21-23页
   ·植物抗病基因的分离与克隆第23-24页
   ·植物抗病相关防御酶及其基因研究第24-29页
   ·NO在植物抗性响应的作用第29-30页
   ·苹果轮纹病研究进展第30-35页
     ·轮纹病菌生物学特性、发病症状与发生规律第30-32页
     ·轮纹病菌在苹果枝干及果实上的侵入途径第32-33页
     ·品种抗病性第33-35页
   ·本研究的目的和意义第35-37页
2 材料与方法第37-50页
   ·实验试剂及仪器第37页
     ·SSH 文库构建第37页
     ·斑点杂交第37页
     ·耗材第37页
     ·实验仪器第37页
   ·实验材料第37-38页
     ·试材来源地土壤营养状况第37-38页
     ·菌种来源第38页
     ·杂种实生苗第38页
     ·苹果细胞悬浮系第38页
     ·SSH 用材料第38页
   ·实验方法第38-50页
     ·枝干和果实轮纹病自然发病情况调查及分级第38页
     ·接种菌液的制备第38-39页
     ·枝条接种方法第39页
     ·枝条接种调查方法第39页
     ·苹果枝条接种轮纹病菌病害分级标准第39-40页
     ·苹果细胞悬浮系的培养第40页
     ·轮纹病菌激发子的制备第40页
     ·苹果细胞悬浮系的处理第40-41页
     ·NO 产量测定第41页
     ·PAL 活性测定第41页
     ·植保素、丙二醛、过氧化氢含量测定第41页
     ·数据采集与统计分析方法第41页
     ·总RNA 的提取第41-42页
     ·RNA 纯化第42页
     ·mRNA 分离纯化第42-43页
     ·cDNA 第一链合成第43页
     ·cDNA 二链合成第43-44页
     ·cDNA 纯化第44页
     ·cDNA RsaI 酶切第44-45页
     ·接头连接第45页
     ·第一轮杂交第45-46页
     ·第二轮杂交第46页
     ·两轮差减PCR第46-47页
     ·两次差减PCR 扩增产物的纯化第47-48页
     ·差减文库的克隆第48页
     ·转化第48页
     ·PCR 鉴定差减文库的克隆插入片断大小第48-49页
     ·点膜及膜处理第49页
     ·探针标记及纯化第49-50页
     ·预杂交和杂交第50页
     ·洗膜第50页
3 结果与分析第50-86页
   ·苹果种质资源轮纹病的抗性评价第50-61页
     ·苹果野生种质资源抗性评价第50-54页
     ·苹果砧木种质资源抗性评价第54-56页
     ·苹果品种种质资源抗性评价第56-61页
   ·苹果轮纹病性状的遗传第61-64页
     ·苹果果实轮纹病性状的遗传第62-63页
     ·苹果枝干轮纹病性状的遗传第63-64页
   ·NO 介导的苹果果实和细胞悬浮系对轮纹病的防御响应第64-76页
     ·四种激发子诱导富士苹果果实对轮纹病病菌侵染的防御响应第64-67页
     ·NO介导苹果细胞悬浮系对轮纹病侵染的防卫响应第67-72页
     ·茉莉酸甲酯诱导的苹果细胞悬浮系发生与轮纹病菌激发子相似的防卫响应第72-76页
   ·抑制性消减杂交分离苹果轮纹病菌侵染诱导的抗病相关基因第76-86页
4 讨论第86-91页
5 结论第91-93页
参考文献第93-127页
发表论文第127-129页
致谢第129页

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