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口蹄疫病毒单链抗体核糖体展示文库的构建与鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 单链抗体的研究进展及在医学上的应用前景第13-28页
   ·单链抗体第13-17页
     ·单价单链抗体第13-14页
     ·基于单链抗体的多价抗体片段第14-16页
     ·基于ScFv 的双功能片段第16-17页
   ·自然抗体基因第17-18页
   ·核糖体展示技术第18-19页
   ·设计恢复FC效应功能第19-20页
   ·在医学上的应用第20-28页
     ·用于改良药物代谢动力学第20-21页
     ·在疾病诊断和治疗上的应用第21-28页
第二章 口蹄疫病毒单链抗体库的构建及鉴定第28-44页
   ·试验材料第28-29页
     ·试验试剂第28页
     ·试剂准备第28-29页
     ·病毒抗原制备、动物第29页
     ·主要仪器设备第29页
   ·试验方法第29-35页
     ·提取完整的1465FMDV 病毒粒子(蔗糖密度梯度离心法)第29-30页
     ·动物免疫第30页
     ·琼脂扩散试验第30-31页
     ·分离脾脏细胞第31页
     ·引物设计第31页
     ·提取RNA第31-32页
     ·反转录第32页
     ·VH 及VL 的扩增第32-33页
     ·PCR 产物的纯化、回收第33页
     ·扩增VH-linker 和VL-linker第33页
     ·重叠PCR 扩增VH-linker-VL第33页
     ·连接至pMD18-T 载体第33-35页
     ·序列分析及三级结构分子模拟第35页
   ·结果第35-42页
     ·病毒粒子纯化结果第35页
     ·琼脂扩散试验结果第35页
     ·VH、VL 及VH-linker、VL-linker 扩增结果第35-36页
     ·重叠PCR 扩增结果第36页
     ·PCR 及双酶切鉴定结果第36页
     ·序列分析第36-39页
     ·ScFv 三级结构的分子模拟与分析第39-42页
   ·讨论第42-44页
第三章 口蹄疫病毒SCFV 核糖体展示文库的构建及鉴定第44-59页
   ·材料第44页
     ·试验试剂第44页
     ·主要仪器设备第44页
     ·试剂准备第44页
   ·试验方法第44-48页
     ·引物设计第45页
     ·提取RNA 及合成cDNA第45页
     ·兔轻链恒定区(Ck)的扩增第45页
     ·Ck 序列分析第45-46页
     ·连接spacer 区域第46页
     ·加入SDA 序列第46页
     ·加入T78 序列第46页
     ·文库序列分析第46-47页
     ·文库的体外转录活性测定第47-48页
     ·文库的可扩增性鉴定第48页
     ·文库容量的测定第48页
   ·结果第48-56页
     ·兔轻链恒定区扩增结果第48页
     ·加入spacer 序列第48-50页
     ·加入SDA 序列第50页
     ·加入T78 序列第50页
     ·文库序列测定第50-51页
     ·体外转录第51-55页
     ·ScFv 核糖体展示文库库容第55-56页
     ·文库的可扩增性鉴定第56页
   ·讨论第56-59页
第四章 研究结论第59-60页
参考文献第60-70页
致谢第70-71页
作者简历第71页

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