摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 单链抗体的研究进展及在医学上的应用前景 | 第13-28页 |
·单链抗体 | 第13-17页 |
·单价单链抗体 | 第13-14页 |
·基于单链抗体的多价抗体片段 | 第14-16页 |
·基于ScFv 的双功能片段 | 第16-17页 |
·自然抗体基因 | 第17-18页 |
·核糖体展示技术 | 第18-19页 |
·设计恢复FC效应功能 | 第19-20页 |
·在医学上的应用 | 第20-28页 |
·用于改良药物代谢动力学 | 第20-21页 |
·在疾病诊断和治疗上的应用 | 第21-28页 |
第二章 口蹄疫病毒单链抗体库的构建及鉴定 | 第28-44页 |
·试验材料 | 第28-29页 |
·试验试剂 | 第28页 |
·试剂准备 | 第28-29页 |
·病毒抗原制备、动物 | 第29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·试验方法 | 第29-35页 |
·提取完整的1465FMDV 病毒粒子(蔗糖密度梯度离心法) | 第29-30页 |
·动物免疫 | 第30页 |
·琼脂扩散试验 | 第30-31页 |
·分离脾脏细胞 | 第31页 |
·引物设计 | 第31页 |
·提取RNA | 第31-32页 |
·反转录 | 第32页 |
·VH 及VL 的扩增 | 第32-33页 |
·PCR 产物的纯化、回收 | 第33页 |
·扩增VH-linker 和VL-linker | 第33页 |
·重叠PCR 扩增VH-linker-VL | 第33页 |
·连接至pMD18-T 载体 | 第33-35页 |
·序列分析及三级结构分子模拟 | 第35页 |
·结果 | 第35-42页 |
·病毒粒子纯化结果 | 第35页 |
·琼脂扩散试验结果 | 第35页 |
·VH、VL 及VH-linker、VL-linker 扩增结果 | 第35-36页 |
·重叠PCR 扩增结果 | 第36页 |
·PCR 及双酶切鉴定结果 | 第36页 |
·序列分析 | 第36-39页 |
·ScFv 三级结构的分子模拟与分析 | 第39-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
第三章 口蹄疫病毒SCFV 核糖体展示文库的构建及鉴定 | 第44-59页 |
·材料 | 第44页 |
·试验试剂 | 第44页 |
·主要仪器设备 | 第44页 |
·试剂准备 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-48页 |
·引物设计 | 第45页 |
·提取RNA 及合成cDNA | 第45页 |
·兔轻链恒定区(Ck)的扩增 | 第45页 |
·Ck 序列分析 | 第45-46页 |
·连接spacer 区域 | 第46页 |
·加入SDA 序列 | 第46页 |
·加入T78 序列 | 第46页 |
·文库序列分析 | 第46-47页 |
·文库的体外转录活性测定 | 第47-48页 |
·文库的可扩增性鉴定 | 第48页 |
·文库容量的测定 | 第48页 |
·结果 | 第48-56页 |
·兔轻链恒定区扩增结果 | 第48页 |
·加入spacer 序列 | 第48-50页 |
·加入SDA 序列 | 第50页 |
·加入T78 序列 | 第50页 |
·文库序列测定 | 第50-51页 |
·体外转录 | 第51-55页 |
·ScFv 核糖体展示文库库容 | 第55-56页 |
·文库的可扩增性鉴定 | 第56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
第四章 研究结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简历 | 第71页 |