缩略词 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-28页 |
1 光呼吸研究进展 | 第13-25页 |
·植物光呼吸途径 | 第13-15页 |
·C_4植物的光呼吸 | 第15-16页 |
·光呼吸的功能 | 第16-21页 |
·光呼吸的光保护作用 | 第17-19页 |
·光抑制和光氧化 | 第17页 |
·光呼吸减轻光抑制和光氧化 | 第17-19页 |
·光呼吸途径参与抗逆反应 | 第19-21页 |
·光呼吸突变体筛选及基因克隆 | 第21-23页 |
·对C_3植物光呼吸的调控和改造 | 第23-25页 |
·C_3植物的基因工程改造 | 第23-25页 |
·C_3植物的C_4途径改造 | 第23-24页 |
·改变磷酸乙醇酸代谢途径 | 第24-25页 |
2 丝氨酸羟甲基转移酶研究进展 | 第25-27页 |
·丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)催化的生化反应 | 第25-26页 |
·编码SHMT的基因 | 第26-27页 |
3 本研究目的与意义 | 第27-28页 |
第二章 OsmSHMT突变体表型及基因克隆 | 第28-56页 |
1 材料与方法 | 第28-42页 |
·材料 | 第28-29页 |
·植物材料 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·载体和菌株 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-42页 |
·材料培养 | 第29页 |
·色素含量测定 | 第29页 |
·水稻叶片GUS染色 | 第29-30页 |
·基因组DNA提取 | 第30页 |
·T-DNA插入潮霉素抗性基因PCR鉴定 | 第30-31页 |
·T-DNA插入位点侧翼序列分离 | 第31-33页 |
·PCR产物测序 | 第33-34页 |
·PCR验证预测基因(OsSHMT)与突变表型共分离 | 第34-35页 |
·RT-PCR检测OsmSHMT在突变体中的表达 | 第35-36页 |
·转基因互补回复 | 第36-40页 |
·水稻遗传转化 | 第40-42页 |
2 结果 | 第42-55页 |
·水稻线粒体丝氨酸羟甲基转移酶(OsmSHMT)突变体表型 | 第42-43页 |
·蔗糖能恢复突变体正常生长 | 第43-44页 |
·突变基因克隆 | 第44-55页 |
·突变表型与T-DNA插入共分离 | 第44页 |
·T-DNA插入位点侧翼序列分离 | 第44-46页 |
·突变体中Os03g0738400基因的表达 | 第46-47页 |
·基因编码蛋白分析 | 第47-48页 |
·疏水性和跨膜区分析 | 第48页 |
·蛋白功能位点和结构功能域分析 | 第48-50页 |
·基因功能互补验证 | 第50-55页 |
·互补载体构建 | 第51-52页 |
·水稻转化 | 第52-54页 |
·转基因互补植株鉴定 | 第54-55页 |
3 小结 | 第55-56页 |
第三章 OsmSHMT基因生物学功能研究 | 第56-72页 |
1 材料与方法 | 第56-60页 |
·植物材料 | 第56-57页 |
·主要试剂 | 第56页 |
·载体和菌株 | 第56-57页 |
·方法 | 第57-60页 |
·突变体高C02浓度培养 | 第57页 |
·GUS染色 | 第57页 |
·叶绿体电镜切片 | 第57-58页 |
·叶绿体类囊体膜蛋白蓝绿温和胶电泳 | 第58页 |
·OsmSHMT编码蛋白原核表达 | 第58-60页 |
·OsmSHMT-pET28a载体构建 | 第58-59页 |
·蛋白诱导表达 | 第59-60页 |
·叶绿素荧光测定 | 第60页 |
2 结果 | 第60-70页 |
·OsmSHMT基因组织器官表达模式 | 第60-61页 |
·OsmSHMT基因编码产物原核表达 | 第61-64页 |
·高CO_2浓度下突变体生长状况 | 第64-65页 |
·OsmSHMT突变对植株光合功能的影响 | 第65-70页 |
·叶绿体超微结构变化 | 第65-66页 |
·类囊体膜蛋白复合物变化 | 第66-67页 |
·突变体叶绿素慢诱导荧光变化 | 第67-70页 |
3 小结 | 第70-72页 |
讨论 | 第72-76页 |
1 增强子捕获载体提高水稻基因克隆效率 | 第72页 |
2 OsmSHMT基因表达模式 | 第72-73页 |
3 OsmSHMT突变体叶绿素缺失表型由光氧化造成 | 第73-74页 |
4 OsmSHMT突变体非光化学淬灭降低由类囊体膜通透性变化造成 | 第74页 |
5 OsmSHMT基因突变影响植株生长速率 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
博士期间发表论文 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |