| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-24页 |
| ·Tet-on系统 | 第8-10页 |
| ·IRES | 第10-12页 |
| ·2A序列 | 第12-15页 |
| ·慢病毒载体 | 第15-18页 |
| ·研究目的和意义 | 第18-19页 |
| ·研究的技术路线 | 第19-24页 |
| 第2章 实验内容 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·菌株和载体 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24页 |
| ·工具酶 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·其它试剂 | 第25-26页 |
| ·引物 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·耗材 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-38页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第38-62页 |
| ·pTRE DsRed1-2A-EGFP AutoR_3载体的构建(流程见图1-8B) | 第38-42页 |
| ·pTRE DsRed1-IRES-EGFPAutoR_3载体的构建(流程见图1-8A) | 第42-47页 |
| ·病毒的生产 | 第47-49页 |
| ·病毒滴度测定 | 第49页 |
| ·慢病毒感染293T细胞并诱导 | 第49-56页 |
| ·Real-time PCR相对定量 | 第56-62页 |
| 第4章 讨论 | 第62-68页 |
| ·双报告基因Tet-on慢病毒载体的构建 | 第62-63页 |
| ·分子克隆和SOE-PCR定点突变 | 第63页 |
| ·慢病毒包装生产和超浓缩 | 第63-64页 |
| ·慢病毒的感染和强力霉素诱导 | 第64页 |
| ·Real-time PCR的ΔΔCt相对定量法 | 第64页 |
| ·改造后的两个单质粒单启动子双报告基因Tet-on表达载体 | 第64-68页 |
| 第5章 结论 | 第68-70页 |
| 附录1 Fermentas DNA Marker分子量示意图 | 第70-71页 |
| 附录2 pTRE 2A-EGFP测序图 | 第71-72页 |
| 附录3 pTRE DsRedl-2A-EGFP测序图 | 第72-73页 |
| 附录4 pTRE DsRedl-IRES-EGFP测序图 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 个人简历 | 第84-86页 |
