| 缩写词 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-27页 |
| 1 ACS 基因研究进展 | 第13-15页 |
| ·ACS 基因的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·ACS 基因的克隆 | 第14-15页 |
| ·ACS 基因在植物遗传转化中的应用 | 第15页 |
| 2 植物基因工程研究进展 | 第15-22页 |
| ·植物基因克隆的常用方法 | 第15-18页 |
| ·植物遗传转化方法 | 第18-19页 |
| ·载体法 | 第18页 |
| ·外源DNA 直接转化法 | 第18-19页 |
| ·利用转基因技术改良植物性状 | 第19页 |
| ·植物基因工程主要研究成果 | 第19页 |
| ·转基因植物的检测及应用发展 | 第19-21页 |
| ·定性PCR 检测技术 | 第20页 |
| ·定量PCR 检测技术 | 第20-21页 |
| ·转基因植物的安全性评价 | 第21-22页 |
| 3 水仙花生物技术研究进展 | 第22-26页 |
| ·水仙花离体植株再生研究进展 | 第22-25页 |
| ·水仙花基因工程研究进展 | 第25-26页 |
| ·相关基因克隆研究 | 第25页 |
| ·遗传转化方面的研究 | 第25-26页 |
| 4 本研究的内容与意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第26页 |
| ·研究意义 | 第26-27页 |
| 第二章 中国水仙ACS 基因的克隆 | 第27-56页 |
| 第一节 中国水仙叶片总RNA 的提取与分离 | 第27-31页 |
| 1 材料和方法 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·仪器和试剂 | 第27-28页 |
| ·中国水仙叶片总RNA 提取方法 | 第28-29页 |
| ·通用植物总RNA 提取试剂盒法 | 第28页 |
| ·TRIZOL 试剂快速提取法 | 第28-29页 |
| ·申能博彩RNA 试剂盒与TRIZOL 试剂相结合的方法 | 第29页 |
| ·RNA 纯度及完整性检测 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-31页 |
| ·中国水仙叶片总RNA 提取纯度与浓度检测 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31页 |
| ·中国水仙叶片提取总RNA 的难点 | 第31页 |
| ·树立无RNA 酶思想的必要性 | 第31页 |
| 第二节 中国水仙ACS 基因的克隆 | 第31-56页 |
| 1 材料和方法 | 第32-39页 |
| ·材料和试剂 | 第32页 |
| ·供试材料 | 第32页 |
| ·供试菌株 | 第32页 |
| ·仪器 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-39页 |
| ·中国水仙ACS 基因cDNA 第一次保守区的克隆 | 第32-33页 |
| ·中国水仙ACS 基因cDNA 第二次保守区的克隆 | 第33-34页 |
| ·中国水仙ACS 基因cDNA 的3′RACE | 第34-36页 |
| ·PCR 产物目的片段的回收、连接、转化和鉴定 | 第36-39页 |
| ·序列拼接 | 第39页 |
| ·中国水仙ACS 基因序列分析及比较 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-54页 |
| ·中国水仙叶片ACS cDNA 第一次保守区的克隆 | 第39-41页 |
| ·中国水仙叶片ACS cDNA 第二次保守区的克隆 | 第41-44页 |
| ·中国水仙叶片ACS 的cDNA 的3′RACE 克隆结果 | 第44-46页 |
| ·序列拼接 | 第46-49页 |
| ·中国水仙ACS 基因克隆得出的氨基酸序列同源性分析 | 第49-54页 |
| ·第一次保守区克隆得到的氨基酸序列同源性分析 | 第49-51页 |
| ·第二次保守区克隆得到的核苷酸序列同源性分析 | 第51-52页 |
| ·拼接序列得到的核苷酸序列同源性分析 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| ·关于利用RACE 的方法克隆中国水仙ACS 基因的难点分析 | 第54页 |
| ·克隆中国水仙ACS 基因的意义 | 第54-56页 |
| 第三章 中国水仙愈伤组织培养 | 第56-64页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-57页 |
| ·鳞茎预处理及消毒 | 第56页 |
| ·愈伤组织的获得 | 第56-57页 |
| ·愈伤组织的增殖与筛选 | 第57页 |
| ·培养条件 | 第57页 |
| ·数据分析 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-62页 |
| ·不同培养基对中国水仙愈伤组织生长的影响 | 第58-60页 |
| ·不同碳源对中国水仙愈伤组织生长的影响 | 第60-61页 |
| ·不同接种量及接种方式对中国水仙愈伤组织生长的影响 | 第61页 |
| ·不同光照强度对中国水仙愈伤组织生长的影响 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| ·影响中国水仙愈伤组织长期继代的关键因素 | 第62页 |
| ·碳源对中国水仙愈伤组织继代增殖的影响 | 第62页 |
| ·接种方式与接种量对中国水仙愈伤组织继代增殖的影响 | 第62-63页 |
| ·光照强度对中国水仙愈伤组织长期继代的影响 | 第63页 |
| ·中国水仙愈伤组织继代难度较大 | 第63页 |
| ·良好的受体体统有利于转化 | 第63-64页 |
| 第四章 中国水仙初代转基因培养物的继代保持与移栽 | 第64-70页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| ·继代增殖培养 | 第64页 |
| ·生根培养 | 第64-65页 |
| ·炼苗与移栽 | 第65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·培养条件 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-68页 |
| ·不同培养基对转基因中国水仙苗继代增殖的影响 | 第65-66页 |
| ·不同浓度无机盐和活性炭对转基因中国水仙试管苗生根的影响 | 第66-67页 |
| ·不同移栽基质及预处理对中国水仙转基因试管苗移栽成活率的影响 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| ·适宜的蔗糖浓度有利于转基因试管小鳞茎的继代增殖 | 第68-69页 |
| ·较高浓度的无机盐有利于中国水仙试管小鳞茎的膨大增殖 | 第69页 |
| ·预处理及良好的基质有利于中国水仙转基因试管苗的移栽成活 | 第69-70页 |
| 第五章 小结 | 第70-72页 |
| 1 中国水仙ACS 基因的克隆 | 第70页 |
| ·中国水仙叶片总RNA 的提取 | 第70页 |
| ·中国水仙ACS 基因的克隆 | 第70页 |
| 2 中国水仙愈伤组织培养 | 第70-71页 |
| 3 转ACS 反义基因中国水仙初代培养物的继代保持与移栽 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-84页 |
| 附录 | 第84-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
