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鸡Mx基因表达及其抗体血清制备的研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
引言第13页
第一章 文献综述第13-24页
 1 不同物种Mx 基因的发现及其命名第13-15页
   ·Mx 基因的发现第13-14页
   ·其他哺乳动物Mx 蛋白的发现第14-15页
   ·鱼类Mx 蛋白的发现第15页
   ·禽类Mx 基因的发现第15页
 2 Mx 蛋白的结构第15-17页
 3 Mx 蛋白的诱导表达调控机理第17-19页
 4 Mx 蛋白的表达定位、功能第19-20页
 5 Mx 蛋白的抗病毒机理第20-21页
 6 Mx 基因多态性与抗病活性的关系第21-22页
 7 Mx 基因在抗病育种中的研究展望第22-24页
第二篇 试验研究第24-60页
 实验一 鸡Mx 基因在E.coli 的表达、纯化及其鉴定第24-38页
  1 材料和方法第24-31页
   ·材料与试剂第24-26页
   ·方法第26-31页
  2 结果与分析第31-35页
   ·基因克隆第31页
   ·稀有密码子统计分析结果第31-32页
   ·Mx 基因的T-A 克隆鉴定第32页
   ·重组原核表达载体鉴定结果第32-33页
   ·重组质粒外源蛋白的诱导表达第33页
   ·表达条件的优化分析第33-35页
   ·表达产物纯化和电泳鉴定第35页
  3 讨论第35-38页
   ·原核表达系统第35-36页
   ·稀有密码子对外源基因在大肠杆菌中表达的影响第36-38页
 实验二 鸡抗病毒蛋白 Mx 基因在毕赤酵母 GS115 中的表达第38-44页
  1 材料和方法第38-40页
   ·材料第38-39页
   ·方法第39-40页
  2 结果第40-43页
   ·鸡抗病毒蛋白Mx 基因的克隆第40-41页
   ·重组载体pMD-Mx 的构建与鉴定第41页
   ·重组穿梭质粒pPIC9K-Mx 的构建与鉴定第41-42页
   ·重组酵母菌株的筛选第42页
   ·诱导表达产物的SDS-PAGE 检测第42-43页
  3 讨论第43-44页
  实验三 真核表达载体 pIRES2-EGFP-Mx 的构建及其在 293 细 胞内的表达研究第44-53页
  1 材料和方法第44-48页
   ·材料第44-45页
   ·方法第45-48页
  2 结果第48-51页
   ·目的基因的克隆第48页
   ·pIRES2-EGFP-Mx 的构建鉴定结果第48-49页
   ·多聚乙烯亚胺介导质粒对293 细胞的瞬时转染第49-50页
   ·目的基因在293 细胞中的表达检测第50-51页
  3 讨论第51-53页
 实验四 基因免疫制备鸡 Mx 基因抗体血清及其初步应用第53-60页
  1 材料和方法第53-56页
   ·材料第53-54页
   ·方法第54-55页
   ·细胞转染第55页
   ·转染pcDNA3.0-MMx 后NIH-3T3 的筛选第55页
   ·RT-PCR 检测Mx 的表达第55-56页
   ·IFA 检测抗体血清第56页
  2 结果第56-58页
   ·真核表达载体的鉴定结果第56页
   ·RT-PCR 检测Mx 蛋白在3T3 细胞中的表达第56-57页
   ·IFA 检测抗血清效价第57-58页
  3 讨论第58-60页
全文结论第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
硕士期间发表的论文第70页

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