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家蚕生殖发育相关基因BmSTAT的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-28页
 1 果蝇性别决定第13-17页
   ·体细胞性别决定第13页
   ·剂量补偿第13-14页
   ·生殖细胞分化第14-17页
 2 JAK/STAT 信号通路在果蝇生殖细胞分化的功能第17-24页
   ·STAT 蛋白家族结构与功能第17-19页
   ·JAK/STAT 信号通路的调节第19-21页
   ·JAK/STAT 信号通路在生殖细胞增殖分化的功能第21-24页
 参考文献第24-28页
第二章 研究目的与研究内容第28-30页
 1 研究的目的和意义第28-29页
 2 研究的主要内容第29页
 3 技术路线第29-30页
第三章 实验材料与方法第30-45页
 1 实验材料第30-35页
   ·载体与菌种第30页
   ·生物材料第30页
   ·工具酶及试剂盒第30页
   ·其它试剂第30-31页
   ·主要实验试剂与配制第31-35页
 2 常用仪器第35-36页
 3 试验常用方法第36-43页
   ·感受态细胞的制备第36页
   ·DNA 的连接反应体系第36页
   ·连接产物的转化第36-37页
   ·重组质粒的筛选第37页
   ·碱裂解法少量制备质粒DNA第37-38页
   ·DNA 的酶切反应体系第38页
   ·目的片段的分离和回收第38页
   ·PCR 扩增目的片段第38-39页
   ·琼脂糖凝胶电泳第39页
   ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第39页
   ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色第39页
   ·Western blot第39-40页
   ·过柱纯化蛋白第40-41页
   ·免疫小鼠,制备多克隆抗体第41-42页
   ·RNA 反转录成cDNA第42页
   ·细胞的培养和保存第42页
   ·定量PCR(Quantitative PCR.qPCR)第42-43页
 参考文献第43-45页
第四章 家蚕STAT 基因cDNA 的克隆与序列分析第45-52页
 摘要第45-46页
 1 材料与方法第46-47页
   ·试剂材料第46页
   ·实验方法第46-47页
 2 结果与分析第47-51页
   ·Bm-STAT 基因的cDNA 克隆第47-49页
   ·Bm-STAT 的多重联配分析第49页
   ·家蚕STAT 的保守结构域预测第49-51页
 3 讨论第51页
 参考文献第51-52页
第五章 家蚕STAT 基因组结构分析第52-58页
 摘要第52-53页
 1 材料与方法第53-54页
   ·实验材料第53页
   ·引物第53页
   ·家蚕基因组的提取第53-54页
   ·PCR 扩增及克隆第54页
   ·序列拼接第54页
 2 结果与分析第54-56页
   ·Bm-STAT 基因组结构第54-55页
   ·Bm-STAT 基因的选择性剪接第55-56页
 3 讨论第56-57页
 参考文献第57-58页
第六章 基于STAT 序列的系统进化分析第58-62页
 摘要第58页
 1 材料与方法第58-59页
   ·数据来源第58-59页
   ·基于STAT 氨基酸序列的系统进化分析第59页
 2 结果与分析第59-60页
 3 讨论第60-61页
 参考文献第61-62页
第七章 Bm-STAT 基因在家蚕不同组织中的表达差异第62-67页
 摘要第62页
 1 材料与方法第62-63页
   ·材料第62页
   ·方法第62-63页
 2 结果与分析第63-64页
   ·q-PCR 分析Bm-STAT 在不同组织中的表达第63页
   ·基于基因芯片的Bm-STAT 的表达谱第63-64页
 3 讨论第64-65页
 参考文献第65-67页
第八章 家蚕STAT 在雌雄生殖腺间蛋白水平差异第67-74页
 摘要第67页
 1 材料与方法第67-69页
   ·试剂材料第67-68页
   ·实验方法第68-69页
 2 结果与分析第69-71页
   ·家蚕STAT 基因重组表达载体的鉴定第69页
   ·Bm-STAT 重组蛋白的诱导表达第69-70页
   ·Bm-STAT 蛋白的过柱纯化第70页
   ·家蚕雌雄性腺组织的western blotting 检测第70-71页
 3 讨论第71-73页
   ·原核表达重组蛋白的纯化第71-72页
   ·家蚕雌雄性腺组织的western blotting 检测第72-73页
 参考文献第73-74页
第九章 Bm-STAT 在细胞中的定位第74-78页
 摘要第74页
 1 材料与方法第74-76页
   ·材料第74页
   ·免疫荧光细胞化学试剂第74-75页
   ·免疫荧光检测第75-76页
 2 结果与分析第76页
 3 讨论第76-77页
 参考文献第77-78页
结论第78-79页
 1 已取得的成果第78页
 2 有待进行的研究第78-79页
附录第79-80页
在校期间发表论文情况第80-81页
致谢第81-82页

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