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香菇子实体发育相关基因的克隆及分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
1 前言第10-19页
   ·香菇概述第10-11页
   ·香菇子实体形成机理相关研究第11-14页
     ·香菇的生活史第11页
     ·香菇子实体形成的环境因素第11-13页
     ·香菇子实体形成的遗传因素第13-14页
   ·mRNA差异显示技术及其研究概况第14-18页
     ·mRNA差异显示技术的原理及步骤第14-15页
     ·mRNA差异显示技术的优缺点第15-16页
     ·mRNA差异显示技术的改进方法第16页
     ·mRNA差异显示技术的衍生技术第16-17页
     ·mRNA差异显示技术在食用菌领域的运用第17-18页
   ·研究的目的与意义第18-19页
2 材料和方法第19-33页
   ·试验材料第19-23页
     ·供试菌株第19页
     ·供试培养基第19页
     ·供试试剂第19-23页
     ·主要仪器与设备第23页
   ·试验方法第23-33页
     ·香菇球形子实体菌株第一次出菇试验第23页
     ·香菇球形子实体菌株组织分离及第二次出菇试验第23-24页
     ·香菇球形子实体菌株的菌丝培养及取样保存第24页
     ·总RNA的提取及检测第24-26页
     ·cDNA第一链的合成第26页
     ·差异显示PCR反应第26-27页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第27-28页
     ·差异片段的回收及二次扩增第28页
     ·PCR产物的凝胶回收第28-29页
     ·反向Northern点杂交第29-30页
     ·阳性差异片段的克隆第30-32页
     ·序列分析比较第32-33页
3 结果与分析第33-44页
   ·香菇球形子实体菌株出菇结果第33-34页
   ·总RNA的提取及检测结果第34-36页
     ·总RNA的提取第34-35页
     ·cDNA的合成第35-36页
   ·DDRT-PCR及差异条带的获得第36-38页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果第36-37页
     ·差异条带的回收及二次扩增第37-38页
   ·反向Northern点杂交第38-39页
   ·克隆阳性差异片段第39-41页
   ·差异片段的测序与分析第41-44页
4 讨论第44-51页
   ·试验材料的选择第44页
   ·DDRT-PCR过程中一些问题的探讨第44-46页
     ·总RNA的提取及反转录第44-45页
     ·引物组合的筛选第45页
     ·差异片段的克隆及检测第45页
     ·关于差异片段真假阳性的鉴定第45-46页
   ·差异片段与香菇球形子实体子实体发育的关系第46-49页
     ·蓝光受体基因第46-47页
     ·蛋白质加工相关基因第47-48页
     ·代谢相关基因第48页
     ·抗逆相关蛋白第48-49页
     ·未知功能序列第49页
   ·展望第49-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
附录 测序结果第58-61页

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