摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-18页 |
1.1 研究的目的与意义 | 第12页 |
1.2 文献综述 | 第12-17页 |
1.2.1 转录因子 | 第12-13页 |
1.2.2 BES1转录因子结构与功能 | 第13-14页 |
1.2.3 BES1转录因子研究进展 | 第14-15页 |
1.2.4 病毒诱导的基因沉默 | 第15-16页 |
1.2.5 逆境胁迫对植物的影响 | 第16-17页 |
1.3 研究内容与技术路线 | 第17-18页 |
1.3.1 研究内容 | 第17页 |
1.3.2 技术路线 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 试验材料 | 第18页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 主要生化试剂 | 第18页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第18页 |
2.2 试验方法 | 第18-27页 |
2.2.1 生物信息学分析方法 | 第18-19页 |
2.2.2 番茄材料的培育及胁迫处理 | 第19-20页 |
2.2.3 基因表达模式分析 | 第20-22页 |
2.2.4 构建沉默载体 | 第22-25页 |
2.2.5 番茄植株侵染 | 第25-27页 |
2.2.6 基因沉默植株沉默效果检测 | 第27页 |
2.2.7 基因沉默植株逆境胁迫下表达量分析 | 第27页 |
2.3 相关生理指标测定 | 第27-30页 |
2.3.1 超氧化物歧化酶SOD的测定 | 第27-28页 |
2.3.2 过氧化物酶POD的测定 | 第28页 |
2.3.3 脯氨酸PRO的测定 | 第28页 |
2.3.4 丙二醛MDA的测定 | 第28-29页 |
2.3.5 活性氧的测定 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-48页 |
3.1 番茄BES1转录因子家族生物信息学分析 | 第30-34页 |
3.1.1 番茄BES1转录因子家族挖掘及鉴定 | 第30页 |
3.1.2 番茄BES1家族保守域的鉴定和分析 | 第30-31页 |
3.1.3 番茄BES1基因家族进化树构建分析 | 第31-32页 |
3.1.4 番茄BES1基因家族保守元件及基因结构分析 | 第32-33页 |
3.1.5 番茄BES1基因家族染色体定位分析 | 第33-34页 |
3.2 番茄BES1家族组织特异性与非生物胁迫应答分析 | 第34-38页 |
3.2.1 RNA检测及反转录 | 第34-35页 |
3.2.2 番茄BES1基因家族组织特异性分析 | 第35-36页 |
3.2.3 番茄BES1基因家族非生物胁迫下表达模式分析 | 第36-38页 |
3.3 基因的沉默载体构建及遗传转化 | 第38-44页 |
3.3.1 目的基因的克隆 | 第38-39页 |
3.3.2 质粒提取 | 第39页 |
3.3.3 质粒和目的基因的双酶切 | 第39-40页 |
3.3.4 重组质粒测序 | 第40-41页 |
3.3.5 转化株系的获得 | 第41页 |
3.3.6 沉默植株基因表达量检测 | 第41-42页 |
3.3.7 沉默植株逆境胁迫表型观察 | 第42-43页 |
3.3.8 沉默植株逆境胁迫下表达模式分析 | 第43-44页 |
3.4 胁迫沉默植株相关生理指标分析 | 第44-48页 |
3.4.1 活性氧测定结果分析 | 第44-46页 |
3.4.2 丙二醛(MDA)含量测定 | 第46页 |
3.4.3 脯氨酸(Pro)含量测定 | 第46-47页 |
3.4.4 超氧化物歧化酶(SOD)含量测定 | 第47页 |
3.4.5 过氧化物酶(POD)含量测定 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
4.1 番茄BES1基因家族的生物信息学分析 | 第48页 |
4.2 番茄BES1家族组织特异性与非生物胁迫诱导分析 | 第48-49页 |
4.3 BES1基因沉默载体构建及遗传转化 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |