| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第17-23页 |
| 1.1 昆虫翅发育基因的研究 | 第17-19页 |
| 1.1.1 果蝇翅的研究 | 第17-18页 |
| 1.1.2 蝴蝶翅的研究 | 第18-19页 |
| 1.1.3 其他昆虫翅发育研究 | 第19页 |
| 1.2 家蚕翅相关研究 | 第19-21页 |
| 1.2.1 家蚕翅的多种组学研究概述 | 第19页 |
| 1.2.2 家蚕翅突变基因的研究 | 第19-20页 |
| 1.2.3 分子生物学技术在翅膀性状研究中的应用 | 第20-21页 |
| 1.2.4 家蚕基因定位 | 第21页 |
| 1.2.5 昆虫翅膀性状在转录组学水平上的研究 | 第21页 |
| 1.3 基因组编辑技术 | 第21-22页 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas9系统 | 第21-22页 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9系统的应用 | 第22页 |
| 1.4 本研究的主要内容和意义 | 第22-23页 |
| 第2章 翅膀大小不同的两种家蚕翅原基的转录组分析 | 第23-43页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第23-26页 |
| 2.2.1 家蚕 | 第23页 |
| 2.2.2 主要实验仪器和设备 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.4 常用溶液的配制 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.3.1 实验动物和样品准备 | 第26页 |
| 2.3.2 RNA提取和文库构建 | 第26-27页 |
| 2.3.3 转录组测序和质量控制 | 第27页 |
| 2.3.4 转录组测序结果初步分析 | 第27页 |
| 2.3.5 qRT-PCR验证 | 第27-31页 |
| 2.4 实验结果 | 第31-39页 |
| 2.4.1 转录组测序结果的概述 | 第31-34页 |
| 2.4.2 差异表达基因（DEGs）和GO富集分析 | 第34-36页 |
| 2.4.3 差异表达基因（DEGs）和KEGG富集分析 | 第36-37页 |
| 2.4.4 差异表达基因（DEGs）和qRT-PCR验证 | 第37-39页 |
| 2.4.5 蛋白酶体通路和Hippo信号通路在p50中表达较活跃 | 第39页 |
| 2.4.6 氨基糖和核苷酸糖代谢途径在u11中表达较活跃 | 第39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-40页 |
| 2.6 结论 | 第40-43页 |
| 第3章 差异表达基因的功能验证 | 第43-53页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 实验材料、试剂和设备 | 第43-44页 |
| 3.2.1 材料 | 第43页 |
| 3.2.2 实验仪器和试剂 | 第43-44页 |
| 3.3 本实验技术路线 | 第44页 |
| 3.4 实验方法 | 第44-48页 |
| 3.4.1 靶点选择与克隆测序引物设计 | 第44页 |
| 3.4.2 家蚕基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| 3.4.3 体外转录Cas9 mRNA | 第45页 |
| 3.4.4 sgRNA的合成 | 第45-46页 |
| 3.4.5 Cas9-sgRNA的纯化 | 第46-47页 |
| 3.4.6 家蚕胚胎显微注射 | 第47-48页 |
| 3.4.7 基因组DNA提取以及突变检测 | 第48页 |
| 3.5 结果与分析 | 第48-52页 |
| 3.5.1 转基因家蚕的获得 | 第48-49页 |
| 3.5.2 BGIBMGA010794基因突变引起蚕蛾翅膀变小 | 第49-51页 |
| 3.5.3 BGIBMGA010794基因靶点突变检测 | 第51页 |
| 3.5.4 BGIBMGA003335基因突变造成蚕卵死亡未能孵化 | 第51-52页 |
| 3.6 讨论与展望 | 第52-53页 |
| 第4章 小翅关键基因的沉默分析 | 第53-61页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 实验材料、试剂、和设备 | 第53-54页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.2.2 试剂和设备 | 第53-54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-57页 |
| 4.3.1 siRNA的设计 | 第54页 |
| 4.3.2 siRNA的合成 | 第54-56页 |
| 4.3.3 微量注射 | 第56页 |
| 4.3.4 取材 | 第56页 |
| 4.3.5 qRT-PCR验证 | 第56-57页 |
| 4.4 结果与分析 | 第57-59页 |
| 4.4.1 干扰后表型观察 | 第57-58页 |
| 4.4.2 基因沉默检测 | 第58-59页 |
| 4.5 讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
